一种从海参中提取海参多糖的方法技术

本发明专利技术公开了一种从海参中提取海参多糖的方法，包括下述步骤:原料处理、酶解、脱色、除蛋白、干燥即得成品。相比现有的三氯乙酸沉淀法及savage法等，海参多糖的收率高、含量高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种多糖的制备方法，具体涉及。
技术介绍
海参(Holothurian, sea cucumber)为棘皮动物门海参纲动物的泛称。明朝万历年间谢肇制著的《五杂俎》中因记载:“海参在辽东海滨有之，其性温补，足敌人参，故曰海参”，被认为是海参名称的缘由。海参的生存历史十分惊人，它出现比原始鱼类还早，在六亿多年前的前寒武纪就开始存在了。海参分布于全球各大洋，大部分生活在热带海区数米至数千米深的海底，全球约有海参1100多种，我国约有140种，可以食用的海参全球约有40种，我国有21种。在我国，海参作为养生珍品的历史源远流长，海参具有极高的营养及药用价值，其肉质柔嫩、有弹性，味道鲜美爽滑，既是美食珍馐，又是名贵的滋补养生的佳品，深受名家推崇，被列为海产“八珍”之首。明姚可成的《食物本草》就指出海参有主补元气、滋益五脏六腑和祛虚损的养生功能；清吴仪洛《本草从新》、赵学敏《本草纲目拾遗》等中药典籍也将海参列为补益药物；认为海参“性温味甘咸，入心肾经。有生百脉血、补肾益精、壮阳疗萎、除劳祛症、滋阴利水、补正软坚和通肠润燥”的功能。在诸如《不药良方》、《食物宜忌》、《五杂俎》和《随息居饮食谱》等养生古籍中，海参均被推崇为养生佳品。海参可用于肾虚引起的阳痿早泄、遗精；血虚引起的贫血、萎黄；阴虚引起的便秘、烦渴；脾虚引起的乏力、四肢困倦等。对于阴虚内热症候的糖尿病、肺结核、咯血等也适合用海参食疗和调补。在过去的数百年来以海参单用或组方治疗肿瘤、再生障碍性贫血和糖尿病取得良好效果。而在辅佐诸如癫痫、胃及十二指肠溃疡、慢性乙型肝炎、慢性肾炎、高血压、肺结核、神经衰弱、静脉血栓、痔疮、脱肛和便秘等常见病治疗，以及为病后或产后康复过程的药膳或食疗中，海参都得到了广泛的应用和认同。现代药理研究表明:海参体壁真皮结缔组织、体腔、内腺管及内脏均含有海参多糖，海参多糖主要为海参糖胺聚糖或粘多糖(Holothurian Glycosaminoglycan, HG)其在组织中的含量之高和多糖的硫酸化程度之大在动物类中极为罕见，与传统中药补胶阿胶、鹿角胶、龟板胶和鳖甲胶中的总硫酸多糖含量仅占0.2%相比，海参高达6%。其药理作用综述如下:1、抗凝血、抗血栓:HG具有抗血栓的作用，在体外有明显的抑制血小板解聚作用，由于它使血小板聚集体不能通过脏器和组织中的毛细血管而被扣下出现血小板减少。药理研究表明，家兔注射HG后，血循环中血小板数量明显减少，而血小板数量减少是由于HG聚集性增高，导致血小板聚集体增多所致。由于血小板的粘附聚集在早期凝血过程中的重要作用，所以血循环中血小板数量的大量消耗造成动物早期凝血功能异常。主要是影响血液凝结的内在通路，粘多糖在抗血栓的作用是依靠加速血纤维蛋白酶的活力，以防止单位血纤维蛋白的聚合，并改变血纤维蛋白的构筑。HG对血小板的凝集作用并不引起血小板的活化和代谢，也不发生形态上的变化和功能，从而达到抗凝血和抗血栓的目的。2、抗肿瘤作用:刺海参中的HG能显著提高机体的免疫力，抑制癌细胞的生长，HG对抗多种实验动物肿瘤的生长，对MA — 737乳腺癌和T795肺癌生长抑制率分别高达7960 %以上，同时还能抑制M737乳腺癌的人工肺转移和Lewis肺自然转移这种粘多糖可促进骨髓造血机制，增加癌瘤细胞的血流量，提高药物在癌瘤组织中的浓度；海参所含丰富的海参素和微量元素等具有很好的防癌作用。3、调节免疫功能:HG能使人的白细胞悬浮物中的E花环数量增加，EAC花环和Smlg的表达，因此推知它有增强细胞免疫作用。HG也能提高机体的细胞免疫功能，促进淋巴细胞增值，增加脾、胸腺指数，增强细胞免疫，具有较强免疫活性。可改善使用药物引起的机体免疫功能低下。4、降血脂、预防动脉粥样硬化，冠心病的发生:研究HG时发现；给已服了胆甾醇的小鼠喂了粘多糖1%的胆甾醇会显著的增加等离子总胆留醇和LDL-胆留醇，当已服了粘多糖果后，总胆留醇和LDL-胆甾醇的小鼠又服了粘多糖后，总胆甾醇和LDL-胆甾醇会增加。HG在防止动脉粥样硬化疾病方面有着广阔的发展前景。5、预防病原菌感染作用可抑制多种霉素和粘蛋白，使致癌性真菌、黄曲霉素被抑制、阻断致癌活性，其高钙含量对防癌有功效，可阻断癌细胞繁殖周期，提高机体免疫力。6、延缓衰老、增强记忆力作用氧自由基的增多是导致机体衰老有主要原因，而超氧物歧化酶(SOD)通过清除氧自由基起到了延缓衰老的作用。药理研究表明花刺能(Stichopus ranegates Semper)提取物能显著提高小鼠红细胞SOD活性,具有延缓衰老的作用。综上所述，海参粘多糖具有多方面的生物活性，在医学中有广泛的应用前景，随着研究的逐步深入，海参能很有可能成为开发新型药物的资源。目前，已有一些海参多糖提取的文献或报道，如CN102002110B，采用三氯乙酸沉淀法，但都存在一些不足，公开了一种海参多糖的制备方法，采取氢氧化钠提取，酶解后用三氯乙酸除蛋白，乙醇重结晶。目前，海参多糖的制备，脱除多糖中蛋白的方法有三氯乙酸沉淀法及savage法等,利用三氯乙酸沉淀蛋白，多糖收率较高,但常伴有糖链降解；savage法采用氯仿及戊醇等有机试剂使蛋白变性、沉淀，其处理条件温和，能较好的避免多糖降解，但处理效率低，多糖损失严重。现有方法均存在不足，这在一定程度上制约了海参多糖的精深加工与应用。
技术实现思路
本专利技术提供了一种工艺可靠、便于生产的从海参中提取海参多糖的方法。本专利技术是通过如下技术方案实现的:，包括下述步骤:a.原料处理:取新鲜海参，去除内脏后，清洗干净，100°C漂烫，磨浆，调节浆液的pH 值至 1.5-8.5 ；b.酶解:加入浆液重量1.5-2.5%的胰蛋白酶，搅拌均匀，35-45°C酶解l_3h，调pH值至3.0-5.0，再加入浆液重量1.5-2.5%的胃蛋白酶，搅拌均匀，35-45°C酶解l_3h，然后沸水浴10-20分钟，过滤，收集滤液；C.脱色:向步骤b得到的滤液中加入相当于滤液重量2倍的质量浓度为95%的乙醇，4°C静置4h，过滤，滤液中加入滤液重量0.5%的活性碳，80°C保温25_35min进行脱色，抽滤，收集滤液；d.除蛋白:向步骤c得到的滤液中加入相当于滤液重量2倍的质量浓度为95%的乙醇，4°C静置4h，过滤，向滤液中缓缓加入醋酸钾稀溶液至终浓度2mol/L，4°C静置过夜，离心10-15min,沉淀进行冷冻干燥得成品。优选的,步骤a中漂烫4_6min。优选的，步骤a中浆液的pH值调至8.0。优选的，步骤b中胰蛋白酶或胃蛋白酶的酶解温度为40°C。优选的，步骤b中胰蛋白酶或胃蛋白酶的酶解时间为2h。优选的，步骤b中胰蛋白酶或胃蛋白酶的用量为2.0%。优选的，步骤c中，向步骤b得到的滤液中加入相当于滤液重量2倍的质量浓度为95%的乙醇，4°C静置4h，过滤，沉淀加入步骤b中，再次酶解。优选的，步骤d中，离心为5000r/min。采用本专利技术的方法得到的海参多糖，具有如下性状:白色粉末，无臭，无味，有吸湿性，易溶于水，尤易溶于热水，不溶于高浓度乙醇、丙酮、乙酸乙酯、正丁醇等有机溶剂。采用本专利技术的方法以海参为原料提取海参多糖，与现有技术相比，本专利技术的优点。1、本专利技术方法将蛋白酶解、醇沉、离心、冷冻干本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从海参中提取海参多糖的方法，包括下述步骤：a.原料处理：取新鲜海参，去除内脏后，清洗干净，100℃漂烫，磨浆,调节浆液的pH值至7.5‑8.5；b.酶解：加入浆液重量1.5‑2.5%的胰蛋白酶，搅拌均匀，35‑45℃酶解1‑3h，调pH值至3.0‑5.0，再加入浆液重量1.5‑2.5%的胃蛋白酶，搅拌均匀，35‑45℃酶解1‑3h，然后沸水浴10‑20分钟，过滤，收集滤液；c.脱色：向步骤b得到的滤液中加入相当于滤液重量2倍的质量浓度为95%的乙醇，4℃静置4h，过滤，滤液中加入滤液重量0.5%的活性碳，80℃保温25‑35min进行脱色，抽滤，收集滤液；d.除蛋白：向步骤c得到的滤液中加入相当于滤液重量2倍的质量浓度为95%的乙醇，4℃静置4h，过滤，向滤液中缓缓加入醋酸钾稀溶液至终浓度2mol/L，4℃静置过夜，离心10‑15min，沉淀进行冷冻干燥得成品。

【技术特征摘要】
1.一种从海参中提取海参多糖的方法，包括下述步骤: a.原料处理:取新鲜海参，去除内脏后，清洗干净，100°C漂烫，磨浆，调节浆液的pH值至 7.5-8.5 ； b.酶解:加入浆液重量1.5-2.5%的胰蛋白酶，搅拌均匀，35-45°C酶解l_3h，调pH值至3.0-5.0，再加入浆液重量1.5-2.5%的胃蛋白酶，搅拌均匀，35-45°C酶解l_3h，然后沸水浴10-20分钟，过滤，收集滤液； c.脱色:向步骤b得到的滤液中加入相当于滤液重量2倍的质量浓度为95%的乙醇，4°C静置4h，过滤，滤液中加入滤液重量0.5%的活性碳，80°C保温25-35min进行脱色，抽滤，收集滤液； d.除蛋白:向步骤c得到的滤液中加入相当于滤液重量2倍的质量浓度为95%的乙醇，4°C静置4h，过滤，向滤液中缓缓加入醋酸钾稀溶液至终浓度2mol/L，4°C静...

【专利技术属性】
技术研发人员：归三岷，
申请(专利权)人：钦州市山海生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广西;45