本发明专利技术公开了一种海参多糖的电离辐射降解法，依次包括以下步骤：1)将海参多糖完全溶于蒸馏水中，得到海参多糖的水溶液；2)于常温下采用60Co进行电离辐射降解海参多糖水溶液，吸收剂量为2kGy～200kGy；3)将步骤2)的所得物经静置沉降或离心除去非降解沉淀得到清液；将清液干燥，得到低分子量的寡糖。采用本发明专利技术方法处理后所得的产物，分子量均匀、集中，分子量分布指数接近于1，产品的均一性较好。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种多糖类化合物的降解法，特别是涉及一种电离辐射降解海参多糖的方法。
技术介绍
海参多糖主要有海参硫酸软骨素(seacucumber chondroitin sulfate, SC-CHS) (J Biol Chem 1996,271，(39)，23973-84 ;J Biol Chem 1988,263，(34),18176-83 ； Journal of Biological Chemistry 1991,266, (21), 13530-13536)和海参岩藻聚糖硫酸酯(SC-FUC) (Carbohydr Res 1994，255，225-40)两种多糖，其中 SC-CHS 是从海参体壁中提取的一种多糖，可来源于多种海参，虽其化学结构不尽相同，但生物学活性相似。Yutaka Kariya(J Biochem 2002，132，(2)，335-43)对日本刺参中SC-CHS的进行提取，糖组成分析表明其中岩藻糖(Fuc)乙酰氨基半乳糖(GalNAc)葡萄糖醛酸(GlcA)硫酸根(S042_) 为 2. 5 : 0. 47 : 0. 53 : I. 73。Paulo Mourao(J Biol Chem 1996，271，(39)，23973-84)课题组提纯了 L.grisea中的SC-CHS，糖组成分析表明其含有Fuc GalNAc GlcA S042—约为 I : I : I : 2. 7。硫酸岩藻糖分支结构与SC-CHS的多种生物学活性相关，其特异性的空间排列是SC-CHS抗凝活性的基础，SC-CHS延长激活的部分凝血活酶时间(APTT)的作用明显强于具有相同硫酸化程度的线性岩藻糖同源性多聚体(Thromb Haemost 2008,100, (3), 420-8)。脱岩藻糖和脱硫酸酯后，SC-CHS丧失抗凝作用。Mourao (Thromb Res 2001，102，(2)，167-76 ;Thromb Res 1999,93, (3)，129-35)等在兔静脉血栓形成模型中进一步验证了硫酸岩藻糖支链对SC-CHS抗血栓活性的重要性。用人活化血清激活内源性凝血途径和纯化的FVIII激活外源性凝血途径后，静脉注射SC-CHS可减少血栓形成，而去除硫酸岩藻糖分支后，SC-CHS 作用消失(Blood 2006，107，(10) ,3876 ；Br J Haematol 1998， 101，(4) ,647-52) 硫酸岩藻糖支链还与 SC-CHS 降血脂(Atherosclerosis 1996，126，(2)，185-195)、促进脐静脉内皮细胞增殖和移位、促进血管再生作用相关(Mol Cancer Res 2002，I，(2)，96-102)。Lubor BorsigQ Biol Chem 2007，282，(20)，14984-91)等人发现支链岩藻糖还与其抑癌活性密切相关。因此制备富含岩藻糖支链的低分子量海参硫酸软骨素具有重要的意义。目前海参硫酸软骨素(SC-CHS)的降解方法常见的有用稀酸法和氧化降解法。而先前Yutaka Kariya(JBiochem 2002，132，(2)，335-43)和Paulo Mourao(J Biol Chem 1996，271，(39)， 23973-84)等课题组均采用了稀酸法制备寡糖方法，容易导致硫酸基和支链硫酸岩藻糖的脱落，影响相关的活性。而氧化分解法操作繁琐，过程难以控制，重现性差。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种工艺简洁、效率高的海参多糖的电离辐射降解法。为了解决上述技术问题，本专利技术提供一种海参多糖的电离辐射降解法，依次包括以下步骤I)、将海参多糖完全溶于蒸馏水中，得到海参多糖的水溶液；2)、于常温下采用6tlCo进行电离辐射降解海参多糖水溶液，吸收剂量为2kGy 200kGy ；3)、将步骤2)的所得物经静置沉降或离心除去非降解沉淀(蛋白质和残渣等)得到清液；将所述清液干燥，得到低分子量的寡糖。作为本专利技术的海参多糖的电离辐射降解法的改进海参多糖的水溶液中海参多糖的质量浓度为O. I % 10%。作为本专利技术的海参多糖的电离辐射降解法的进一步改进海参多糖为海参硫酸软骨素或海参岩藻聚糖硫酸酯。作为本专利技术的海参多糖的电离辐射降解法的进一步改进辐射剂量率为45kGy/ min0作为本专利技术的海参多糖的电离辐射降解法的进一步改进海参多糖的水溶液中海参多糖的质量浓度为1% 2 %，吸收剂量为20kGy IOOkGy。本专利技术的海参多糖的辐照降解法，其实质在于利用一定条件的电离辐射使海参多糖的糖苷键发生断裂，进而实现多糖降解。本专利技术的海参多糖的辐照降解法，适合于所有海参多糖。经本专利技术的方法处理后， 即，海参多糖水溶液辐照后所得低分子量寡糖的分子量分布指数范围I. 20 I. 40。本专利技术的海参多糖的电离辐射降解法具有如下优点I、不引入无机盐，降解后无需脱盐即可经干燥得到最终产品；2、不导致活性链的断裂或活性基团的脱落；可实现多糖分子量的连续均匀下降， 通过控制辐照剂量及多糖浓度即可获得不同分子量的降解产物，且降解产物分子量分布指数接近于I ;3、不使用任何添加剂；方法稳定，重现性好；工艺简单，容易控制；节约能源、加工效率高；无环境污染。综上所述，与传统的多糖降解方法如酸降解法、氧化降解法等相比，本法无需酸碱，故无后续中和、脱盐步骤，简化操作的同时减少了后续处理对产物的损耗，且不会导致多糖活性链的断裂或活性基团的脱落，极大有利于降解产物尤其是寡糖的制备；对降解产物分子量的控制可通过调节辐照剂量及多糖浓度实现，能够满足各分子量降解产物制备的需求，且产物分子量均匀、集中，分子量分布指数接近于1，产品的均一性较好。该法还同时具有重现性好、操作简便、成本低的优点。具体实施例方式以下实施例中所用的菲律宾海参硫酸软骨素可根据2010年8月公开的陈士国《高温1HNMR鉴别8种海参硫酸软骨素》中海参多糖的提取方法制备而得。实施例I :海参多糖的电离辐射降解法称取四份菲律宾海参硫酸软骨素(每份均为50mg)，分别配制成水溶液，质量百分比浓度分别为均用电离辐射处理，吸收剂量为50kGy，辐射剂量率为45kGy/min ;辐照后静置I. 5小时，非降解物沉降到容器底部，取上清液。将上述4份上清液分别真空冷冻干燥(_40°C )，从而分别得低分子的硫酸软骨素 (即，低分子量的寡糖)42mg、39mg、40mg、35mg。采用HPLC高效凝胶渗透色谱(TSK3000，4000)测定不同浓度硫酸软骨素同一辐照剂量降解后的相对分子量及数均分子量、重均分子量、分子量分布指数。具体如表I所示。表I权利要求1.海参多糖的电离辐射降解法，其特征是依次包括以下步骤1)、将海参多糖完全溶于蒸馏水中，得到海参多糖的水溶液；2)、于常温下采用6tlCo进行电离辐射降解海参多糖水溶液，吸收剂量为2kGy 200kGy ；3)、将步骤2)的所得物经静置沉降或离心除去非降解沉淀得到清液；将所述清液干燥，得到低分子量的寡糖。2.根据权利要求I所述的海参多糖的电离辐射降解法，其特征是所述海参多糖的水溶液中海参多糖的质量浓度为O. I % 10%。3.根据权利要求本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：陈士国，吴念，刘东红，胡亚芹，陈建初，孙玉敬，吴丹，叶兴乾，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：
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