多核酸扩增反应用具制造技术

实施方式的多核酸扩增反应用具具备支持体和多个种类的引物组。支持体以支持液相的反应场的方式构成。多个种类的引物组，按每个种类能够游离地固定于在由所述液相形成所述反应场时与所述反应场相接的所述支持体的至少1个面的彼此独立的多个固定化区域。多个种类的引物组以扩增与其分别对应的目标序列的方式构成。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及多核酸扩增反应用具。
技术介绍
现在，随着基因检查技术的进展，在临床现场、犯罪搜查等各种场面实施基因检查。在这些基因检查中，大多要通过检出多个对象基因、将它们的结果综合才能有用。例如，在临床现场进行病原菌特定等。这时，判定基于患者的症状而怀疑感染的多个种类的微生物、或各微生物的类型。由此进行诊断。在犯罪搜查现场进行例如个人特定等。这时，对于所有人在其基因组上具有的多个基因座中的重复序列，特定重复的次数。由特定的多个基因座中的重复数综合地特定个人。由此可以以高准确率特定个人。这样，检出多个对象基因的技术变得非常重要。到目前为止，在检出多个对象基因时，首先在特定的反应容器内进行样品核酸的扩增。然后，进一步在检出用的反应装置内对于所得的扩增产物进行检出。扩增主要在接下来的多个或1个反应容器内进行。在多个反应容器内进行扩增时，分别准备用于扩增各个对象基因的反应容器。在1个反应容器内进行扩增时，用于检出全部对象基因的试剂被收纳于1个反应容器中而进行多核酸扩增反应。应被检出的核酸的检出一般通过将扩增产物供于DNA芯片、电泳等来进行。
技术实现思路
专利技术要解决的课题本专利技术要解决的课题是提供能够彼此独立地同时扩增多个种类的目标序列的多核酸扩增反应用具。用于解决课题的方法实施方式的多核酸扩增反应用具具备支持体和多个种类的引物组。支持体以支持液相的反应场的方式构成。多个种类的引物组，按每个种类能够游离地固定于在由所述液相形成所述反应场时与所述反应场相接的所述支持体的至少1个面的彼此独立的多个固定化区域。多个种类的引物组以扩增与其分别对应的目标序列的方式构成。附图说明图1是显示多核酸扩增反应用具的1例的图。图2是显示多核酸扩增反应用具的1例的图。图3是显示多核酸扩增反应用具的1例的图。图4是显示多核酸扩增反应用具的1例的图。图5是显示使用实施方式的检出方法的图解。图6是模拟地显示检出由实施方式所得的扩增产物时得到的结果的图。图7是显示多核酸扩增反应用具的1例的图。图8是显示多核酸扩增反应用具的1例的图。图9是显示多核酸扩增检出反应用具的1例的图。图10是显示多核酸扩增检出反应用具的1例的图。图11是显示芯片原料的1例的图。图12是显示多核酸扩增检出反应用具的1例的图。图13是显示多核酸扩增检出反应用具的1例的图。图14是显示多核酸扩增检出反应用具的1例的图。图15是显示多核酸反应用具的1例的图。图16是显示由多核酸反应用具所得的实验结果的图。图17是核酸检出用器件的概略图。图18是核酸检出用器件的概略图。图19是核酸检出用器件的概略图。图20是核酸检出用器件的概略图。图21是支持体的概略图。图22是核酸检出用器件的概略图。图23是核酸检出用器件的概略图。图24是显示核酸扩增反应的结果的图。图25是核酸检出用器件的概略图。图26是核酸检出用器件的概略图。图27是核酸检出用器件的概略图。图28是核酸检出用器件的概略图。图29是核酸检出用器件的概略图。图30是核酸检出用器件的概略图和显示核酸扩增反应的结果的图。图31是显示核酸检出用器件的制成步骤的图。图32是显示核酸检出用器件的概略构成的剖面图。图33是显示核酸检出用器件的概略构成的图。图34是核酸检出用器件的表面的反应区域附近的放大图。图35是显示核酸检出用器件内藏盒的概略构成的图。图36是显示核酸检出用器件与反应部规定用部件的对向配置的图。图37是核酸检出用器件的表面的反应区域附近的放大图。图38是核酸检出用器件的表面的反应区域附近的放大图。图39是核酸检出用器件的表面的反应区域附近的放大图。图40是显示核酸扩增反应的结果的图。图41是核酸检出用器件的表面的反应区域附近的放大图。图42是显示由各电极得到的结果的图。图43是核酸检出用器件的表面的反应区域附近的放大图。图44显示由各电极得到的结果的图。图45是显示核酸反应用具的平面图。图46是显示核酸反应用具的透视图。图47是显示核酸反应用具的透视图。图48是显示核酸反应用具的透视图。图49是显示核酸反应用具的透视图。图50是显示芯片原料的图。图51是显示阵列型引物探针芯片的图。图52是显示阵列型引物探针芯片的图。图53是显示阵列型引物探针芯片的图。图54是显示核酸检出盒的概略构成的分解立体图。图55是显示核酸检出盒的概略构成的立体图。图56是显示核酸检出装置的概略构成的立体图。具体实施方式以下，对于本专利技术的实施的方式进行详细说明。1.定义“多核酸扩增”是指将应被扩增的多个种类的目标序列同时扩增。“扩增”是指使用引物组将模板核酸连续地复制的工序。能够使用的扩增法只要是使用引物组扩增目标核酸的方法即可，不限于这些，例如，包含PCR扩增、LAMP扩增、RT-LAMP扩增、SMAP扩增和ICAN扩增等。“目标序列”是指要通过引物组进行扩增的序列，也包含使用的引物所结合的区域。“目标核酸”是至少包含目标序列的序列，是被使用的引物组作为模板使用的核酸，也称为“模板核酸”。“引物组”是为了扩增1种目标核酸而所需的引物的集合体。例如，在PCR扩增用的引物组的情况下，1种引物组包含用于扩增1种目标核酸的1种正向引物和1种反向引物即可。另外例如，在LAMP扩增用的引物组的情况下，1种引物组至少包含用于扩增1种目标核酸的FIP引物、BIP引物即可，根据需要还可以包含F3引物、B3引物、LP引物、即LF引物和/或LB引物。“目的序列”是指应被该阵列型引物探针芯片检出的序列。应被检出的目的核酸包含“目的序列”。将由目的序列组成的核酸称为“目的序列链”。目的序列链与包含其互补序列的探针核酸杂交，通过检出该杂交的有无或量，来检出或测定目的核酸的有无或量。“杂交信号”是通过探针核酸与其互补序列的杂交而产生的信号，根据该微阵列的检出方式不同，是作为例如电流值、荧光光度、发光光度等被检出的检出信号的总称。“样品”只要是包含应被核酸反应用具扩增和/或检出的核酸的物质即可。样品不限于这些，可以是例如，血液、血清、白血球、尿、便、精液、唾液、组织、活组织检查、口腔内粘膜、培养细胞、喀痰等，或通过任何其本身公知的手段从所述的任一或其混合物中本文档来自技高网...

【技术保护点】
多核酸扩增反应用具，具备：以支持液相的反应场的方式构成的支持体；彼此独立地配置于在由所述液相形成所述反应场时与所述反应场相接的所述支持体的至少1个面的多个引物固定化区域；和按每个种类能够游离地固定于所述多个引物固定化区域的、以分别扩增多个种类的目标序列的方式构成的多个种类的引物组。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.08.05 JP 2011-172396;2012.03.21 JP 2012-064451.多核酸扩增反应用具，具备：以支持液相的反应场的方式构成的支
持体；彼此独立地配置于在由所述液相形成所述反应场时与所述反应场相
接的所述支持体的至少1个面的多个引物固定化区域；和按每个种类能够
游离地固定于所述多个引物固定化区域的、以分别扩增多个种类的目标序
列的方式构成的多个种类的引物组。
2.根据权利要求1所述的多核酸扩增反应用具，所述支持体具有容器
形态或流路形态。
3.根据权利要求1所述的多核酸扩增反应用具，进一步具备能够游离
地固定于所述引物固定化区域的增稠剂。
4.根据权利要求1所述的多核酸扩增反应用具，进一步具备安装于所
述支持体的、与支持体一起构成维持反应液的室的覆盖体。
5.根据权利要求1所述的多核酸扩增反应用具，所述支持体由基板形
成。
6.根据权利要求5所述的多核酸扩增反应用具，是核酸检出用器件，
其中，
所述支持体在其第1面具备沟部，
所述沟部具备用于核酸样品进行反应的流路型室，
所述流路型室的剖面积，大于所述沟部中除了所述流路型室以外部分
的剖面积。
7.根据权利要求5所述的多核酸扩增反应用具，进一步具备：
在所述支持体上形成的核酸检出用的传感器部；在所述支持体上形成
的、与所述传感器连接的配线；和在所述支持体上形成的保护膜，
所述多核酸扩增反应用具是在用于所述传感器部与核酸样品反应的室
内进行核酸扩增反应，然后通过所述传感器部进行核酸扩增产物的检出的
核酸检出器件，
所述保护膜具备在所述基板上的所述核酸样品的接液区域使包含一部

\t分所述基板的下层部露出的1个以上的开口。
8.根据权利要求7所述的多核酸扩增反应用具，所述传感器部是电极。
9.根据权利要求8所述的多核酸扩增反应用具，所述保护膜在所述接
液区域覆盖所述配线。
10.根据权利要求7所述的多核酸扩增反应用具，所述保护膜是选自
聚乙烯、乙烯、聚丙烯、聚异丁烯、聚...

【专利技术属性】
技术研发人员：高桥匡庆，桥本幸二，二阶堂胜，源间信弘，冈田纯，广泽大二，山本惠一，桑原彻也，高濑圆，下条明子，中村明义，
申请(专利权)人：株式会社东芝，
类型：发明
国别省市：日本;JP