The invention discloses a method for gRNA gene knock, in addition to the CXCR4 gene knockout system and kit of the invention, screened by gRNA specific target gene with high cutting efficiency and the design target, system, through the CRISPR effective Cas9 CXCR4 gene knockout, and through the CRISPR nickase gene editing, deletion of HIV virus coreceptor CXCR4 cell surface, greatly reduce the Miss efficiency in the effective CXCR4 gene knockout of the premise, to improve the feasibility of clinical use, reduce security risks.
【技术实现步骤摘要】
一种用于敲除CXCR4基因的gRNA、表达载体、敲除系统、试剂盒
本专利技术涉及用于敲除CXCR4基因的gRNA、表达载体、基因编辑系统、试剂盒及它们的相关用途,属于基因工程领域。
技术介绍
获得性免疫缺陷综合征(acquiredimmunodeficiencysyndrome,AIDS)是由人类免疫缺陷病毒(HumanImmunodeficiencyVirus,HIV)感染所引起的免疫系统疾病,是一种危害性极大的全球化传染病。HIV以人体免疫系统中最重要的T淋巴细胞作为主要攻击对象,造成免疫功能丧失,从而易患各种疾病,死亡率高达99%-100%。HIV在人体内的潜伏期能长达8-10年,很多HIV感染者在发展成艾滋病患者之前可以无病症的生活,但病毒在人体内始终存在并不可治愈。虽然全世界众多医学研究人员专注于艾滋病的预防和治疗,但至今尚未研制出特效药物,由于HIV的变异极其迅速,因此也还没有可用于预防的有效疫苗。对于HIV感染的治疗,目前的主要策略是最大限度和持久的降低病毒载量、获得免疫功能重建和维持免疫功能、提高生活质量,以及降低HIV相关的发病率和死亡率。抗逆转录病毒治疗(anti-retroviraltherapy,ART)是近年来广泛使用的治疗手段,它有效抑制HIV在体内的复制,减少体内病毒载量,从而延长感染者的寿命。而以基因为基础的治疗方法可以持续的抑制病毒从而减少治疗干预措施,是一种非常有前景的治疗方式。全球首例HIV感染的治愈发生在“柏林病人”身上,他接受了一名CCR5-Δ32基因突变纯合体捐献者的骨髓移植,此后的五年都没有在其身上检测到HIV ...
【技术保护点】
一种用于敲除CXCR4基因的gRNA,其特征在于,所述gRNA的靶序列如SEQ ID NO:1‑SEQ ID NO:24中的一种所示。
【技术特征摘要】
2016.12.13 CN 201611148300X1.一种用于敲除CXCR4基因的gRNA,其特征在于,所述gRNA的靶序列如SEQIDNO:1-SEQIDNO:24中的一种所示。2.一种用于敲除CXCR4基因的表达载体,其特征在于,所述表达载体表达如权利要求1所述的gRNA。3.一种用于敲除CXCR4基因的CRISPR-Cas9系统,其特征在于,包括如权利要求1所述的gRNA和cas9蛋白。4.一种用于敲除CXCR4基因的试剂盒,其特征在于,包括表达cas9蛋白和如权利要求1所述的gRNA的载体。5.一种用于敲除CXCR4基因的gRNA组合物,所述gRNA组合物由靶序列如SEQIDNO:1所示的gRNA和靶序列如SEQIDNO:4所示的gRNA组成,或由靶序列如SEQIDNO:1所示的gRNA和靶序列如SEQIDNO:5所示的gRNA组成,或由靶序列如SEQIDNO:2所示的gRNA和靶序列如SEQIDNO:4所示的gRNA组成,或由靶序列如SEQIDNO:2所示的gRNA和靶序列如SEQIDNO:5所示的gRNA组成,或由靶序列如SEQIDNO:6所示的gRNA和靶序列如SEQIDNO:5所示的gRNA组成,或由靶序列如SEQIDNO:7所示的gRNA和靶序列如SEQIDNO:5所示的gRNA组成,或由靶序列如SEQIDNO:8所示的gRNA和靶序列如SEQIDNO:5所示的gRNA组成,或由靶序列如SEQIDNO:9所示的gRNA和靶序列如SEQIDNO:4所示的gRNA组成,或由靶序列如SEQIDNO:9所示的gRNA和靶序列如SEQIDNO:5所示的gRNA组成,或由靶序列如SEQIDNO:9所示的gRNA和靶序列如SEQID...
【专利技术属性】
技术研发人员:梁福才,祝海宝,罗思施,黄雨亭,陶米林,刘方方,唐忆琳,
申请(专利权)人:广东赤萌医疗科技有限公司,
类型:发明
国别省市:广东,44
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