环状鞘脂激活蛋白原肽及其用途制造技术

本文提供了环状鞘脂激活蛋白原肽及其组合物和用途。示例性用途包括在治疗癌症或在治疗炎性疾病或病症中的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】环状鞘脂激活蛋白原肽及其用途相关申请本申请根据35U.S.C.§119(e)要求于2014年3月26日提交的美国临时申请编号61/970,853的权益，其通过引用整体并入本文。政府资助本专利技术是在由美国国立卫生研究院授予的R01CA135417的政府支持下完成的。政府对本专利技术享有某些权利。
技术介绍
癌症仍然是主要的公共健康问题。例如，在2008年估计有760万由癌症导致的死亡发生。许多癌症仍然是无法治疗的或治疗不理想，仅部分有效或者具有如毒性的不期望的副作用。炎性疾病和病症也是主要的公共健康问题并且也具有与癌症相似的治疗问题。
技术实现思路
本公开内容的一些方面部分地基于这样的发现，环状鞘脂激活蛋白原(prosaposin)肽(如具有序列DWLPK(SEQIDNO：1)的环肽)对于治疗癌症的动物模型比线性鞘脂激活蛋白原肽更稳定也更有效。出人意料的是，相比于在3位具有甘氨酸替换的环肽(即DWGPK，SEQIDNO：2)，发现环状DWLPK(SEQIDNO：1)肽在体外更有效地刺激血小板反应蛋白-1(thrombospondin-1，Tsp-1)。该数据是预料不到的，因为用线性鞘脂激活蛋白原肽获得了相反的结果，其中发现线性DWGPK(SEQIDNO：2)具有比线性DWLPK(SEQIDNO：1)更好的活性。另外，发现环状DWLPK(SEQIDNO：1)肽不会引起对用所述肽处理的小鼠之肝或脾的毒性。本公开内容的另一些方面部分地基于这样的发现，环状DWLPK(SEQIDNO：1)对于治疗克罗恩病的小鼠模型是有效的。因此，本公开内容的一些方面涉及环状鞘脂激活蛋白原肽(例如DWLPK(SEQIDNO：1))，以及组合物和利用该肽的方法。本公开内容的一些方面涉及用于治疗患有癌症的对象的方法，所述方法包括对患有癌症的对象施用有效量的环肽以治疗所述癌症，其中所述环肽的氨基酸序列为DWLPK(SEQIDNO：1)。在一些实施方案中，所述癌症是卵巢癌或黑素瘤。另一些方面涉及用于治疗癌症的组合物，所述组合物包含环肽，其中所述环肽的氨基酸序列为DWLPK(SEQIDNO：1)。在一些实施方案中，所述癌症是卵巢癌或黑素瘤。本公开内容的另一些方面涉及用于治疗患有炎性疾病或病症的对象的方法，所述方法包括对患有炎性疾病或病症的对象施用有效量的环肽以治疗所述炎性疾病或病症，其中所述环肽的氨基酸序列为DWLPK(SEQIDNO：1)。在一些实施方案中，所述炎性疾病或病症是类风湿性关节炎、年龄相关的黄斑变性(age-relatedmaculardegeneration，AMD)、克罗恩病、银屑病或动脉粥样硬化。在一些实施方案中，所述炎性疾病或病症是克罗恩病。本公开内容的另一些方面涉及用于治疗炎性疾病或病症的组合物，所述组合物包含环肽，其中所述环肽的氨基酸序列为DWLPK(SEQIDNO：1)。在一些实施方案中，所述炎性疾病或病症是类风湿性关节炎、年龄相关的黄斑变性(AMD)、克罗恩病、银屑病或动脉粥样硬化。在一些实施方案中，所述炎性疾病或病症是克罗恩病。本公开内容的另一些方面涉及用于刺激血小板反应蛋白-1(Tsp-1)表达的方法，所述方法包括：对有此需要的对象施用有效量的环肽以刺激Tsp-1表达，其中所述环肽的氨基酸序列为DWLPK(SEQIDNO：1)。本公开内容的另一些方面涉及环状Psap肽。在一些实施方案中，所述环状Psap肽包含氨基酸序列DWLPK(SEQIDNO：1)、dWLPK(SEQIDNO：3，小写的d表示D-氨基酸)、DWGPK(SEQIDNO：2)或dWGPK(SEQIDNO：4，小写的d表示D-氨基酸)。在一些实施方案中，所述环状Psap肽的氨基酸序列为DWLPK(SEQIDNO：1)、dWLPK(SEQIDNO：3，小写的d表示D-氨基酸)、DWGPK(SEQIDNO：2)或dWGPK(SEQIDNO：4，小写的d表示D-氨基酸)。在一些实施方案中，所述环状Psap肽包含氨基酸序列DWLPK(SEQIDNO：1)。在一些实施方案中，所述环状Psap肽的氨基酸序列为DWLPK(SEQIDNO：1)。本公开内容的另一些方面涉及包含如本文中所描述的环状Psap肽的组合物。在一些实施方案中，所述组合物为药物组合物。在一些实施方案中，所述组合物包含如本文中所描述的环状Psap肽和可药用载体。本公开内容的一个或更多个实施方案的细节在下文的描述中示出。本公开内容的其他特征或优势将通过下文的附图和若干实施方案的详细描述并且还通过附加的权利要求而变得明显。附图说明下文的附图构成本说明书的一部分并且将其包括以另外证明本公开内容的某些方面，可通过组合本文所示的具体实施方案的详细描述参照一个或更多个这些附图对其更好地理解。图1为环状DWLPK(SEQIDNO：1)的示意图。图2为Western印迹的照片，其示出了在细胞中响应于不同环状或线性肽(SEQIDNO：1、3、2和4，分别为从上至下)的血小板反应蛋白-1(Tsp-1)活化的水平。图3为示出了在人血浆中孵育后环状DWLPK(SEQIDNO：1)或线性dWlP(SEQIDNO：5)活化Tsp-1的能力的图。图4为示出了用环肽或线性肽处理的小鼠中的肿瘤体积的图。图5为示出了用环肽或线性肽处理的小鼠中的肿瘤体积的图。图6为示出了在用环肽或对照处理之后注射入小鼠的表达萤光素酶之肿瘤细胞的总通量的图。图7为一系列照片，其示出了Tsp-1在表达F4/80的巨噬细胞中表达。图8为一系列照片，其示出了用对照或环状DWLPK(SEQIDNO：1)注射的小鼠中肝和脾样品的组织学。图9为示出了在用对照处理、无处理或用环状DWLPK(SEQIDNO：1)处理的葡聚糖硫酸钠(DextranSodiumSulfate，DSS)诱导的克罗恩病小鼠模型中的MPO酶促活性(嗜中性粒细胞浸润到结肠粘膜中的指标)的图。图10为示出了在用对照处理、无处理或用环状DWLPK(SEQIDNO：1)处理的克罗恩病小鼠模型中的百分比体重的图。图11为一系列照片，其示出了在用对照处理、无处理或用环状DWLPK(SEQIDNO：1)处理的克罗恩病小鼠模型中肠的组织学和巨噬细胞定位。图12A-12E示出了Tsp-1的刺激及其对卵巢癌细胞生长和存活的作用。图12A为在WI-38肺成纤维细胞中的Tsp-1和β-肌动蛋白的western印迹，对WI-38肺成纤维细胞无处理(-)或用天然DWLP(SEQIDNO：6)、L-氨基酸、鞘脂激活蛋白原肽(WT)、dWlP(SEQIDNO：5，小写d和l表示D-氨基酸)鞘脂激活蛋白原肽(d1，3)或DwLp(SEQIDNO：7，小写w和p表示D-氨基酸)鞘脂激活蛋白原肽(d2，4)处理；图12B为从如下处理的小鼠收获的小鼠肺组织中的Tsp-1和β-肌动蛋白的western印迹：用转移性前列腺癌细胞条件化培养基单独处理(-)或将其与10和30mg/kg/天剂量的DWLP(SEQIDNO：6)鞘脂激活蛋白原肽(WT)或dWlP(SEQIDNO：5，小写d和l表示D-氨基酸)鞘脂激活蛋白原肽(d1，3肽)组合地处理3天；图12C为8个来源于患者的卵巢癌细胞系中CD36和β-肌动蛋白的western印迹；图1本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于治疗患有癌症的对象的方法，所述方法包括：对患有癌症的对象施用有效量的环肽以治疗所述癌症，其中所述环肽的氨基酸序列为DWLPK(SEQ ID NO：1)。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.03.26 US 61/970,8531.用于治疗患有癌症的对象的方法，所述方法包括：对患有癌症的对象施用有效量的环肽以治疗所述癌症，其中所述环肽的氨基酸序列为DWLPK(SEQIDNO：1)。2.权利要求1所述的方法，其中所述癌症是卵巢癌或黑素瘤。3.用于治疗癌症的组合物，所述组合物包含环肽，其中所述环肽的氨基酸序列为DWLPK(SEQIDNO：1)。4.权利要求3所述的组合物，其中所述癌症是卵巢癌或黑素瘤。5.用于治疗患有炎性疾病或病症的对象的方法，所述方法包括：对患有炎性疾病或病症的对象施用有效量的环肽以治疗所述炎性疾病或病症，其中所述环肽的氨基酸序列为DWLPK(SEQIDNO：1)。6.权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：伦道夫·S·瓦特尼克，
申请(专利权)人：儿童医学中心公司，
类型：发明
国别省市：美国,US