多核苷酸引物制造技术

含有以下引物序列之一或其互补序列的至少最后6个核苷酸的多核苷酸：SEQ.ID NO：3-16,18,20-33,35或37-39。

【技术实现步骤摘要】
多核苷酸引物[0001 ] 本申请是国际申请PCT/GB2008/003306，国际申请日2008年9月29日，中国国家阶段申请号200880110038.7的专利技术专利申请的分案申请。
本专利技术涉及多核苷酸、含有多核苷酸的试剂盒，以及在基因中检测突变存在与否的方法。
技术介绍
磷酯酰肌醇3-激酶(PI3K)是参与细胞信号传递的一大类脂质激酶。PI3K-AKT途径在许多类肿瘤中被激活，导致细胞生长、增殖和存活异常(补充的I篇近期综述)。近来，在人癌症中鉴定出了 IA型PI3K(PI3KCA)催化亚基中的突变[I]。这些突变在致癌作用中的确切作用仍然并没有被明确确定，但随着许多靶向PI3K抑制剂的开发，突变检测对于患者筛选来说变得日益重要。这些突变的检测中的技术难题来自于可能只包含少量突变序列的肿瘤活组织切片的限制。另外，从石蜡包埋组织提取的DNA常常已被降解且质量很差。测序检测所需要的突变DNA的最低水平是15-25%，因此对于开发能在异源样品中检测少量突变的等位基因的灵敏的检测法以及进行所述检测法所需的产品具有迫切的需求。本专利技术试图满足该需求。
技术实现思路
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【技术保护点】
一种检测PIK3CA基因中突变存在与否的方法，所述方法包括以下步骤：a)混合含有PIK3CA基因的至少一个片段的核酸样品和第一引物与第二引物，并对该混合物进行PCR；和b)检测所述第一引物与所述核酸样品的杂交，其中杂交表示突变的存在；所述第一引物能够与PIK3CA基因的H1047L突变序列杂交，但与野生型序列不互补，所述第一引物的3’末端最后6个核苷酸与SEQ ID NO.28的3’末端最后6个核苷酸相同；所述第二引物在PIK3CA序列片段内的对应区域位于第一序列互补区的下游。

【技术特征摘要】
2007.09.28 GB 0719034.11.一种检测PIK3CA基因中突变存在与否的方法，所述方法包括以下步骤: a)混合含有PIK3CA基因的至少一个片段的核酸样品和第一引物与第二引物，并对该混合物进行PCR ;和 b)检测所述第一引物与所述核酸样品的杂交，其中杂交表示突变的存在； 所述第一引物能够与PIK3CA基因的H1047L突变序列杂交，但与野生型序列不互补，所述第一引物的3’末端最后6个核苷酸与SEQ ID N0.28的3’末端最后6个核苷酸相同； 所述第二引物在PIK3CA序列片段内的对应区域位于第一序列互补区的下游。2.如权利要求1所述的方法，第二引物的序列如SEQID N0.35所示。3.一种正向引物，能够...

【专利技术属性】
技术研发人员：R·宝德，J·弗格逊，P·F·帕维托，N·J·德尔威尔，D·怀特科比，
申请(专利权)人：凯杰曼彻斯特有限公司，
类型：发明
国别省市：英国;GB