利用微生物抗逆基因增加植物耐盐性的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用微生物抗逆基因增加植物耐盐性的方法，利用微生物携带的抗逆基因能够增加植物的耐盐性，微生物为嗜麦芽窄食单胞菌，其拉丁文命名为：Stenotrophomonas?mahophilia，SMA。通过嗜麦芽窄食单胞菌的一段抗逆基因能够增加转基因植物的耐盐性，使植物能够更加耐盐。可以从自然界中其它途径中获得这种微生物，应用简单、效果明显。

Method for increasing salt tolerance of plants by using microbial resistance gene

The invention discloses a method for using microbial resistance genes increased salt tolerance in plant, microorganism carrying resistance genes can increase the salt tolerance of plant, microorganism as Stenotrophomonas maltophilia, its Latin name: Stenotrophomonas mahophilia, SMA?. The ability of transgenic plants to increase the salt tolerance of transgenic plants can be increased by using a resistance gene from Stenotrophomonas maltophilia. This kind of microorganism can be obtained from other ways in nature.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种利用微生物增强植物耐盐性的研究技术，尤其涉及一种。
技术介绍
土壤盐溃化是当今全球性的生态问题和资源环境问题。如何利用大面积的盐碱地发展农林业，是生物科学技术迫切需要解决的重大课题。采用传统的遗传育种方法培育耐盐植物新品种虽然简便可行，但进展缓慢。随着分子生物学技术的发展，人们寄希望于利用基因工程育种技术培育耐盐能力显著提高的植物新品种，进而增加盐碱地的开发利用。当今，对于植物耐盐机理的研究已经有很多，但从总体上讲，国内外学者对植物耐盐机理的研究多局限于生理层面，植物耐盐的分子机制调控网络仍不清楚，严重限制了耐盐植物新品种培育。因此，深入了解植物在盐胁迫条件下的分子机制，筛选耐盐基因，对利用分子育种技术培育耐盐植物新品种具有重要的意义。
技术实现思路
本专利技术的目的是提 供了一种。本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的:本专利技术的，利用微生物携带的抗逆基因能够增加植物的耐盐性，所述微生物为嗜麦芽窄食单胞菌，其拉丁文命名为:Stenotrophomonas mahophilia，SM。由上述本专利技术提供的技术方案可以看出，本专利技术实施例提供的，由于证实了植物中存在一种内生菌嗜麦芽窄食单胞菌，通过将其一段抗逆基因转化到拟南芥植物中增加了拟南芥的耐盐性，说明其能够赋予植物耐盐的特性，应用简单、效果明显。附图说明图1为本专利技术实施例研究过程中的技术路线图。氨基酸或核苷酸序列说明所列序列为本专利技术中嗜麦芽窄食单胞菌携带抗逆基因的DNA序列。具体实施例方式下面将对本专利技术实施例作进一步地详细描述。本专利技术的，其较佳的具体实施方式是:利用微生物携带的抗逆基因能够增加植物的耐盐性，所述微生物为嗜麦芽窄食单胞菌，其拉丁文命名为:Stenotrophomonas mahophilia, SMA。所述嗜麦芽窄食单胞菌从自然界中获得，该嗜麦芽窄食单胞菌携带抗逆基因，所述抗逆基因的DNA序列在NCBI网站注册，其序列号为KC129717。包括步骤:首先，将所述抗逆基因的DNA序列与载体PCLD04541连接后，将携带所述抗逆基因的质粒通过电击转化到农杆菌GV3101中；然后，将所述农杆菌GV3101进行摇菌培养后，通过花浸染或者叶盘法的转化方法将所述抗逆基因的DNA转化到植物中，与植物基因组融合，使植物的基因组获得该抗逆基因并进行表达，能够增加植物的耐盐性。所述植物包括以下任一种:草本植物、木本植物。本专利技术通过转基因技术，将一段含有微生物抗逆基因(或基因簇)的DNA片段，这段基因在NCBI申请的序列号为KC129717，转化到拟南芥中，增加了拟南芥的耐盐性，从而说明该方法微生物抗逆基因能够增加植物的耐盐性。具体实施例中，通过研究证实了植物中存在一种内生菌嗜麦芽窄食单胞菌， 其上的一段携带抗逆基因的DNA能够赋予植物耐盐的特性，使植物能够更加耐盐的一条新的途径，具体研究的过程是:利用DNA内切酶Bam HI分别切割pCLD04541质粒载体和DNA，通过质粒载体和DNA 连接，转化DHlOB菌株而构建BIBAC文库，并通过农杆菌GV3101介导的拟南芥花序浸染方法获得转化拟南芥的转基因植株。结合可转化人工染色体文库技术和测序技术，检测到一种植物内生菌一嗜麦芽窄食单胞菌中的一个大片段DNA能够赋予植物耐盐的特性。转化了内生菌嗜麦芽窄食单胞菌中的一个DNA大片段的转基因拟南芥比较与没有转基因的野生型拟南芥展现出了耐盐的特性。具体的技术路线如图1所示:1、构建了 BIBAC 文库；2、提取BIBAC文库质粒；3、将质粒通过电击转化到农杆菌GV3101中；4、将农杆菌进行摇菌培养后，通过花浸染方法浸染到拟南芥中；5、筛选转化植株，收集转化后的植物种子。在含有150mM NaCl的平板上面筛选耐盐的转基因拟南芥；6、将筛选到的耐盐转基因拟南芥所对应的BIBAC文库质粒进行测序和生物信息学分析；7、发现该BIBAC文库中BIBAC2A1F6这个质粒是内生菌嗜麦芽窄食单胞菌的一段 DNA。分析该DNA片段显示，这段DNA中含有相关的抗逆基因导致了转基因拟南芥耐盐性显著提高。 本专利技术发现了一条使植物耐盐的新途径:植物中存在一种内生菌一嗜麦芽窄食单胞菌，其上的一段抗逆基因赋予了植物更强的耐盐性。可以从自然界其它途径中获得这种内生菌。以上所述，仅为本专利技术较佳的具体实施方式，但本专利技术的保护范围并不局限于此， 任何熟悉本
的技术人员在本专利技术披露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换， 都应涵盖在本专利技术的保护范围之内。因此，本专利技术的保护范围应该以权利要求书的保护范围为准。权利要求1.一种，其特征在于，利用微生物携带的抗逆基因能够增加植物的耐盐性，所述微生物为嗜麦芽窄食单胞菌，其拉丁文命名为: Stenotrophomonas mahophilia，SM。2.根据权利要求1所述的增加植物耐盐性的方法，其特征在于，所述嗜麦芽窄食单胞菌从自然界中获得，该嗜麦芽窄食单胞菌携带抗逆基因，所述抗逆基因的DNA序列在NCBI 网站注册，其序列号为KC129717。3.根据权利要求2所述的增加植物耐盐性的方法，其特征在于，包括步骤:首先，将所述抗逆基因的DNA序列与载体连接后，将携带所述抗逆基因的质粒通过电击转化到农杆菌GV3101中；然后，将所述农杆菌GV3101进行摇菌培养后，通过花浸染或者叶盘法的转化方法将所述抗逆基因的DNA转化到植物中，与植物基因组融合，使植物的基因组获得该抗逆基因并进行表达，能够增加植物的耐盐性。4.根据权利 要求1、2或3所述的增加植物耐盐性的方法，其特征在于，所述植物包括以下任一种:草本植物、木本植物。全文摘要本专利技术公开了一种，利用微生物携带的抗逆基因能够增加植物的耐盐性，微生物为嗜麦芽窄食单胞菌，其拉丁文命名为Stenotrophomonas mahophilia，SMA。通过嗜麦芽窄食单胞菌的一段抗逆基因能够增加转基因植物的耐盐性，使植物能够更加耐盐。可以从自然界中其它途径中获得这种微生物，应用简单、效果明显。文档编号C12N15/31GK103205457SQ20131008656公开日2013年7月17日 申请日期2013年3月18日 优先权日2013年3月18日专利技术者卢孟柱, 周婧, 赵树堂, 唐芳 申请人:中国林业科学研究院林业研究所本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用微生物抗逆基因增加植物耐盐性的方法，其特征在于，利用微生物携带的抗逆基因能够增加植物的耐盐性，所述微生物为嗜麦芽窄食单胞菌，其拉丁文命名为：Stenotrophomonas?mahophilia，SMA。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：卢孟柱，周婧，赵树堂，唐芳，
申请(专利权)人：中国林业科学研究院林业研究所，
类型：发明
国别省市：