【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种油藏微生物基因组DNA提取方法,其特征在于以下包括步骤:(1)有机溶剂萃取除去原油,释放油水界面微生物在液相样品中加入石油醚,其与液相样品的体积比为1:4~6,充分震荡混合均匀后静置1h~2h,使有机相和水相分层,取下层水相。(2)收集菌体将上述所得的水相,利用蠕动泵,控制压力为0.5MPa,在0.22μm的中空纤维素膜过滤器进行过滤,收集菌体。(3)裂解微生物细胞首先,将上述过滤器的中空纤维素膜,剪碎与石英砂相混合,放入含有800μl~1000μl提取缓冲液的离心管中,加入450μl1xTE和50μl10mg/mL溶菌酶和10μl100mg/mL蜗牛酶,吹吸混匀,37℃孵育1h,每隔15min颠倒混匀一次,其次,加入600μl裂解液,吹吸混匀,涡旋震荡10min后,再加入30μl20mg/mL蛋白酶K,吹吸混匀,55℃孵育1h,每隔15min颠倒混匀一次,最后,4℃12000rpm离心10min,转移上清至另一个干净的1.5mL离心管。(4)DNA提纯首先,按照体积比为25:24:1的比例加入酚、氯仿和异戊醇,充分混匀,‑20℃静置2min,4℃12000rpm离心5min,其次 ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:郝滨,李彩风,曹功泽,王静,宋欣,袁长忠,徐闯,徐鹏,王刚,曹嫣镔,宋永亭,
申请(专利权)人:中国石油化工股份有限公司,中国石油化工股份有限公司胜利油田分公司采油工艺研究院,
类型:发明
国别省市:北京;11
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