经过密码子优化的点突变丙酰辅酶A转移酶基因及其应用制造技术

技术编号:8858826 阅读:452 留言:0更新日期:2013-06-27 02:25
本发明专利技术公开了一种经过密码子优化的点突变丙酰辅酶A转移酶基因及其应用。本发明专利技术所提供经过密码子优化的点突变丙酰辅酶A转移酶基因为如下a)-c)中任一DNA分子:a)编码序列为序列表中序列1所示的DNA分子;b)序列表中序列1所示的DNA分子;c)与序列表中序列1至少具有98%的同一性,且编码序列2所示蛋白质的DNA分子。实验证明,在大肠杆菌中,本发明专利技术所提供的经过密码子优化的丙酰辅酶A转移酶基因与优化前相比,可表达更高量的丙酰辅酶A转移酶,且其酶活并未因密码子优化而受到任何影响。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种经过密码子优化的点突变丙酰辅酶A转移酶基因及其应用,特别涉及一种根据大肠杆菌密码子偏好性进行优化后的点突变丙酰辅酶A转移酶基因及其应用。
技术介绍
辅酶A转移酶可逆催化辅酶A转移反应,其将酯酰辅酶A的辅酶A部分转移到体系中的游离酸上。现阶段研究的辅酶A根据不同的反应机制分为三个家族,但都是辅酶A供体和游离的受体之间通过酶的转化过程。辅酶A转移酶可以催化乳酸转化为乳酰辅酶A,乳酰辅酶A是进一步生物合成聚 乳酸(PLA)和丙烯酸等重要中间产物,因此,辅酶A转移酶在工业上具有应用价值。乳酰辅酶A被发现是丙氨酸发酵通路中重要的中间产物,此通路在极少数的生物体中存在,其中包括丙酸梭菌(Clostridium propionicum),栖瘤胃拟杆菌(Bacteroidesruminicola)和同型丙酸梭菌(Clostridium homopropionicum)。丙酸辅酶A转移酶(propionyl-CoA transferase,Pct)可以催化丙酰辅酶A或者乙酰辅酶A作为辅酶A供体将D-乳酸转化为D-乳酰辅酶A。其结构是一个同源四聚体,每个亚基分子量约为67kDa,其对本文档来自技高网...

【技术保护点】
DNA分子,为如下a)?c)中任一:a)编码序列为序列表中序列1所示的DNA分子;b)序列表中序列1所示的DNA分子;c)与序列表中序列1至少具有98%的同一性,且编码序列2所示蛋白质的DNA分子。

【技术特征摘要】
1.DNA分子,为如下a) -c)中任一: a)编码序列为序列表中序列I所示的DNA分子; b)序列表中序列I所不的DNA分子; c)与序列表中序列I至少具有98%的同一性,且编码序列2所示蛋白质的DNA分子。2.含有权利要求1所述DNA分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。3.根据权利要求2所述的重组载体,其特征在于:所述重组载体为重组表达载体或重组克隆载体。4.根据权利要求3所述的重组载体,其特征在于:所述重组表达载体中启动所述DNA分子转录的启动子为T7启动子。5.根据权利要求4所述的重组载体,其特征在于:所述重组表达载体为将所述DNA分子插入到质粒pET22b的多克隆位点处得到的重组质...

【专利技术属性】
技术研发人员:管祥辰于波马延和
申请(专利权)人:中国科学院微生物研究所
类型:发明
国别省市:

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