【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于代谢工程领域，具体涉及一种酿酒酵母内乙酰辅酶A综合利用的双调控策略。
技术介绍
酿酒酵母是第一个进行全基因组测序的真核微生物，由于其遗传操作简便、基因其遗传操作简便、基因表达调控机理清楚且高密度发酵技术成熟，被视为理想的细胞工厂，广泛应用于生物基产品生产和技术研究。乙酰辅酶A的是酿酒酵母中的关键代谢产物，可作为前体物进行类异戊二烯、聚酮化合物、脂类、聚羟基脂肪酸酯、丁醇等重要天然代谢产物的生物合成。在酿酒酵母中，乙酰辅酶A主要分布于细胞质和线粒体中。由于MVA和脂肪酸等途径存在于细胞质中，为方便操作，目前研究主要集中于细胞质中的调控。当前酿酒酵母中提高类异戊二烯产量的最常用策略主要集中于MVA途径的代谢工程调控：1)提高前体物IPP和DMAPP的供应量，如过表达MVA途径中的限速酶tHMG1；2)过表达固醇生物合成的全局转录因子upc2-1；3)抑制竞争性代谢支路，例如，在类胡萝卜素合成途径中，通过添加麦角固醇生物合成抑制剂或将角鲨烯合成酶基因的启动子换成甲硫氨酸启动子，对竞争路径进行下调。由于肉毒碱穿梭系统和合成机制的缺乏，故很难实现亚细胞结构间...
【技术保护点】
酿酒酵母内线粒体内乙酰辅酶A利用的调控策略，其特征在于，将MVA途径的7个基因定位到线粒体中实现线粒体内乙酰辅酶A的利用。
【技术特征摘要】
1.酿酒酵母内线粒体内乙酰辅酶A利用的调控策略，其特征在于，将MVA途径的7个基因定位到线粒体中实现线粒体内乙酰辅酶A的利用。2.根据权利要求1所述的酿酒酵母内线粒体内乙酰辅酶A利用的调控策略，其特征在于，其中所述基因在线粒体内定位的方法为：在基因的前端引入氨基酸序列SEQ ID NO:1，其中SEQ ID NO:1的前25个氨基酸为细胞色素c氧化酶IV亚基的前导肽序列，第25和26位氨基酸为蛋白酶识别位点LQ。3.根据权利要求2所述的酿酒酵母内线粒体内乙酰辅酶A利用的调控策略，其特征在于，在前导肽的作用下，基因可以定位到线粒体中，之后在螯合剂感应的蛋白酶作用下，蛋白序列LQ之间的肽键会发生断裂，生成成熟蛋白多肽。4.根据权利要求2所述的酿酒酵母内线粒体内乙酰辅酶A利用的调控策略，其特征在于，编码氨基酸序列SEQ ID NO:1的碱基序列为SEQ ID NO:2。5.酿酒酵母内细胞质和线粒体内乙酰辅酶A利...
【专利技术属性】
技术研发人员：于洪巍，王凡，吕小妹，谢文平，叶丽丹，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33
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