【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医学检验
，尤其涉及一种用于检测耐药金黄色葡萄球菌定植的方法及其试剂。
技术介绍
金黄色葡萄球菌是临床分离的重要致病菌和定植菌之一，其中根据耐药性将其分为甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)。近年该类细菌临床耐药发展迅速，尤其以MRSA耐药趋势更为严重，美国每年MRSA感染导致死患者数相当于AIDS、结核病和病毒性肝炎总和，我国MRSA感染率和MRSA分离率及多重耐菌均有增加趋势。2008-2015年Mohnarin资料显示，综合医院MRSA分离株占金黄色葡萄球菌67.6％、ICU中高达84.8％。金黄色葡萄球菌居肺部感染G+球菌第一位，其中MRSA分离率26.3％；我国MRSA分离株对庆大霉素、克林霉素、大环内酯类和左氧氟沙星等抗菌药物耐药率基本上都在80％左右，对复方磺胺和利福平的耐药率低于50％。利奈唑胺(Linezoid，LZD)、糖肽类抗生素(万古霉素和替考拉宁)和替加环素是金黄色葡萄球菌治疗的“最后防线”和“王牌抗生素”，近年利奈唑胺耐药或中介分离金黄色葡萄球菌株报道逐渐增多，对替考拉宁和万...
【技术保护点】
一种用于检测耐药金黄色葡萄球菌定植的方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤S1：将甘露醇高盐琼脂溶解于蒸馏水中，并进行灭菌，冷却至 45‑50℃时，加入利奈唑胺、万古霉素或替加环素，得到含有利奈唑胺、万古霉素或替加环素的甘露醇高盐琼脂溶液，然后将所述含有利奈唑胺、万古霉素或替加环素的甘露醇高盐琼脂溶液倒入无菌平皿中，调整pH值，得到利奈唑胺、利奈唑胺、万古霉素或替加环素的耐药金黄色葡萄球菌定植检测平皿；其中，所述含有利奈唑胺的甘露醇高盐琼脂溶液中，所述利奈唑胺的浓度为2~3ug/ml，所述利奈唑胺的耐药金黄色葡萄球菌定植检测平皿的pH值为7.3‑7.6；所述含有万古霉素的甘露...
【技术特征摘要】
1.一种用于检测耐药金黄色葡萄球菌定植的方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤S1：将甘露醇高盐琼脂溶解于蒸馏水中，并进行灭菌，冷却至 45-50℃时，加入利奈唑胺、万古霉素或替加环素，得到含有利奈唑胺、万古霉素或替加环素的甘露醇高盐琼脂溶液，然后将所述含有利奈唑胺、万古霉素或替加环素的甘露醇高盐琼脂溶液倒入无菌平皿中，调整pH值，得到利奈唑胺、利奈唑胺、万古霉素或替加环素的耐药金黄色葡萄球菌定植检测平皿；其中，所述含有利奈唑胺的甘露醇高盐琼脂溶液中，所述利奈唑胺的浓度为2~3ug/ml，所述利奈唑胺的耐药金黄色葡萄球菌定植检测平皿的pH值为7.3-7.6；所述含有万古霉素的甘露醇高盐琼脂溶液中，所述万古霉素的浓度为2.5~3.5ug/ml，所述万古霉素的耐药金黄色葡萄球菌定植检测平皿的pH值为7.2-7.4；所述含有替加环素的甘露醇高盐琼脂溶液中，所述替加环素的浓度为0.2-0.5ug/ml，所述替加环素的耐药金黄色葡萄球菌定植检测平皿的pH值为7.3-7.4；步骤S2：取粪便标本或体液标本，涂于步骤S1中所述利奈唑胺、利奈唑胺、万古霉素或替加环素的耐药金黄色葡萄球菌定植检测平皿的平板上，并同时涂于无抗平皿中作为对照，培养2天后计数无抗平皿中的总菌落数和各抗生素平皿中的耐药金黄色葡萄球菌的总菌落数。2.根据权利要求1所述的用于检测耐药金黄色葡萄球菌定植的方法，其特征在于：步骤S1中，所述含有利奈唑胺的甘露醇高盐琼脂溶液中，所述利奈唑胺的浓度为2.5ug/ml；所述含有万古霉素的甘露醇高盐琼脂溶液中，所述万古霉素的浓度为3ug/ml；所述含有替加环素的甘露醇高盐琼脂溶液中，所述替加环素的浓度为0.3ug/ml。3.根据权利要求1所述的用于检测耐药金黄色葡萄球菌定植的方法，其特征在于：步骤S1中，所述利奈唑胺的耐药金黄色葡萄球菌定植检测平皿的pH值为7.3；所述万古霉素的耐药金黄色葡萄球菌定植检测平皿的pH值为7.2；所述替加环素的耐药金黄色葡萄球菌定植检测平皿的pH值为7.3。4.根据权利要求1所述的用于检测耐药金黄色葡萄球菌定植的方法，其特征在于：还包括步骤S3：从步骤S2的平板上随机挑取金黄色葡萄球菌克隆，进行革兰染色＋凝集酶检测，然后采用E-test方法测定菌株各抗生素MIC值；其中，所述耐药菌株在确定其MIC值之前，应在无抗生素培...
【专利技术属性】
技术研发人员：余治健，邓启文，程航，郑金鑫，陈重，
申请(专利权)人：深圳市南山区人民医院，
类型：发明
国别省市：广东;44
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