一种木糖葡萄球菌选择性培养基及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种木糖葡萄球菌选择性培养基及其制备方法。其特征在于，配制1000ml选择性培养基的配方中含有：麦芽浸粉15g；鸡蛋蛋白液150ml；氯化钠5g；枸橼酸镁0.5g；琼脂15g；假细锥甲素8~12mg；黄葵内酯0.4g；磷酸二氢钾0.2g；蒸馏水加至1000ml。最佳优化配方制备方法为：取麦芽浸粉；鸡蛋蛋白液；氯化钠；枸橼酸镁；琼脂；假细锥甲素；黄葵内酯；磷酸二氢钾；L-半胱氨酸及硫酸铜溶于山药水煮液中，混匀，定容，灭菌后分装。本发明专利技术与现有技术相比较，具有检出可靠、木糖葡萄球菌分离率高的特点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医学检验领域，具体涉及ー种木糖葡萄球菌选择性培养基及其制备方法。
技术介绍
木糖葡萄球菌(Staphylococcus aureus)为葡萄球菌家族中的一员，为低毒カ条件致病菌，但近年来检出率和多重耐药性呈逐年增高趋势，已成为医院感染的主要病原菌之一。木糖葡萄球菌感染后症状不典型，且呈现多重耐药现象，给临床诊断和治疗带来一定困难，高效可靠的检验方法已是必然需要。所谓微生物培养是ー种用人工方法使微生物生长繁殖的技木，而选择性选择性培养基是用来促进或抑制一定类型的生物体(如细胞或细菌等)而设计的选择性培养基，利用这种选择性培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。ー份2012年I月25日公开，公开号为102329747A名为《木糖葡萄球菌A2的高密度培养的培养基及培养方法》的专利技术专利(申请号为201110258768. 5)公开了ー种用于木糖葡萄球菌(Staphylococcus xylosus) A2菌种保藏号为CGMCC No. 5049的高密度培养的培养基，该配方包括0. 5重量份乳糖、2重量份示蛋白胨、0. 2重量份酵母膏、5重量份香菇汁、7.5重量份似(1。该种培养基用于在制备肉制品发酵剂。但是应用于医疗检验方面却达不到培养的效果，其原因在于，医疗检验用样本往往含有其他致病菌，尤其是金葡菌，该种培养基仅仅提供了木糖葡萄球菌的生长条件，但是不能有效的去除混入的杂菌，导致混入的杂菌，如金黄色葡萄球菌，比木糖葡萄球菌生长更快，很快覆盖了培养基，木糖葡萄球菌无法生长。
技术实现思路
本专利技术的技术任务是针对以上现有技术的不足，提供一种对木糖葡萄球菌分离率高的选择性培养基。本专利技术解决其技术问题的技术方案是一种木糖葡萄球菌选择性培养基，其特征在，配制1000ml选择性培养基的配方中含有 麦芽浸粉15g ； 鸡蛋蛋白液150ml ； 氯化钠5g ； 枸櫞酸镁0. 5g ； 琼脂15g ； 假细锥甲素8 12mg; 黄葵内酯0.4 g; 磷酸ニ氢钾0. 2g ； 蒸馏水加至1000ml。优化方案中，姆IOOOml选择性培养基还含有硫酸铜4mg。优化方案中，每IOOOml选择性培养基还含有L-半胱氨酸0. lg。优化方案中，每IOOOml选择性培养基还含有浓度200g/L的山药水煮液200 300ml。最优化方案中，姆IOOOml选择性培养基还含有硫酸铜4mg ；L-半胱氨酸0.1g ;浓度200g/L的山药水煮液20(T300ml。一种木糖葡萄球菌选择性培养基的制备方法，其特征在于包括以下步骤 (1)取山药加水煮沸I小时，过滤，取滤液，调整体积到浓度为200g/L，得山药水煮液； (2)取麦芽浸粉；鸡蛋蛋白液；氯化钠；枸櫞酸镁；琼脂；假细锥甲素；黄葵内酯；磷酸ニ氢钾山-半胱氨酸及硫酸铜溶于步骤I所得山药水煮液中，混匀过滤后，蒸馏水定容，低温灭菌2次，每次45 min,灭菌后分装。其中所述的麦芽浸粉、鸡蛋蛋白液提供碳氮源和能量；枸櫞酸镁和磷酸ニ氢钾为缓冲剂，并可以抑制杂菌生长；黄葵内酷、L-半胱氨酸属氨基酸类，为营养剂；且黄葵内酯为木糖葡萄球菌特异性营养剂，可以特异性的促进木糖葡萄球菌繁殖。琼脂是选择性培养基的凝固剂；假细锥甲素对于金葡菌具有特异的抑菌作用，对于木糖葡萄球菌无效；鸡蛋蛋白液含有各种多肽、脂肪、生长因子、激素等，这些物质对促进木糖葡萄球菌的繁殖和生长都是很重要的因素，此外鸡蛋蛋白液还具有維持选择性培养基PH值恒定的作用。铜离子属于重金属离子，在4mg/L这个浓度剂量下，沉积于金葡菌内部，导致胞壁消失或变薄，核糖体聚集成团块，最終导致细菌变形及破裂，呈现重金属源性损伤，而木糖葡萄球菌对重金属的运输能力和滲透能力低于金葡菌，也即重金属的抗性较高，故而加入硫酸铜可以有效地抑制金葡菌生长。山药为薯菌科植物薯菌Dioscorea opposita Thunb.的干燥根莖,含有蛋白质、脂肪、淀粉、还元糖、氨基酸等多种成分，可以提供能量代谢、细胞发育、新陈代谢因子，尤其是山药块茎含薯蓣皂甙元(diosgenin)和多酚氧化酶，有助于促进路邓葡萄球菌生长，尤其是重金属环境下菌落的生长。本专利技术与现有技术相比较，具有检出可靠、木糖葡萄球菌分离率高的特点。具体实施方式以下结合实际情况，对本专利技术的具体实施方式作详细说明。实施例1，配制IOOOml选择性培养基的配方中含有麦芽浸粉15g ;鸡蛋蛋白液150ml ;氯化钠5g ;枸櫞酸镁0. 5g ;琼脂15g ;假细锥甲素8mg ;黄葵内酯0.4 g ;磷酸ニ氢钟0. 2g ;蒸懼水加至1000ml。制备方法取麦牙浸粉；鸡蛋蛋白液；氣化纳；构橡Ife续；琼脂；假细锥甲素；黄葵内酯；磷酸ニ氢钾溶于蒸馏水中，混匀过滤后，蒸馏水定容，低温灭菌2次，每次45 min，灭菌后分装。实施例2，配制IOOOml选择性培养基的配方中含有麦芽浸粉15g ;鸡蛋蛋白液150ml ;氯化钠5g ;枸橼酸镁0. 5g ;琼脂15g ;假细锥甲素12mg ;黄葵内酯0. 4 g ;磷酸ニ氢钟0. 2g ;硫酸铜4mg ;蒸懼水加至1000ml。制备方法取麦牙浸粉；鸡蛋蛋白液；氣化纳；构橼酸镁；琼脂；假细锥甲素；黄葵内酯；磷酸ニ氢钾；硫酸铜溶于蒸馏水中，混匀过滤后，蒸馏水定容，低温灭菌2次，每次45 min,灭菌后分装。实施例3，配制IOOOml选择性培养基的配方中含有麦芽浸粉15g ;鸡蛋蛋白液150ml ;氯化钠5g ;枸橼酸镁0. 5g ;琼脂15g ;假细锥甲素IOmg ;黄葵内酯0. 4 g ;磷酸ニ氢钾0. 2g ;L-半胱氨酸0.1g ;蒸懼水加至1000ml。制备方法取麦芽浸粉；鸡蛋蛋白液；氯化钠；枸橼酸镁；琼脂；假细锥甲素；黄葵内酯；磷酸ニ氢钾山-半胱氨酸溶于蒸馏水中，混匀过滤后，蒸馏水定容，低温灭菌2次，毎次45 min,灭菌后分装。实施例4，配制IOOOml选择性培养基的配方中含有麦芽浸粉15g ;鸡蛋蛋白液150ml ;氯化钠5g ;枸櫞酸镁0. 5g ;琼脂15g ;假细锥甲素9mg ;黄葵内酯0. 4 g ;磷酸ニ氢钾0. 2g ;浓度200g/L的山药水煮液200ml ;蒸懼水加至1000ml。制备方法 (1)取山药加水煮沸I小时，过滤，取滤液，调整体积到浓度为200g/L，得山药水煮液； (2)取麦芽浸粉；鸡蛋蛋白液；氯化钠；枸櫞酸镁；琼脂；假细锥甲素；黄葵内酯；磷酸ニ氢钾；溶于步骤I所得山药水煮液中，混匀过滤后，蒸馏水定容，低温灭菌2次，毎次45min,灭菌后分装。实施例5，配制IOOOml选择性培养基的配方中含有麦芽浸粉15g ;鸡蛋蛋白液150ml ;氯化钠5g ;枸櫞酸镁0. 5g ;琼脂15g ;假细锥甲素Ilmg ;黄葵内酯0.4 g ;磷酸ニ氢钾0. 2g ;硫酸铜4mg ；L-半胱氨酸0.1g ;浓度200g/L的山药水煮液300ml ;蒸懼水加至1000ml。制备方法为 (1)取山药加水煮沸I小时，过滤，取滤液，调整体积到浓度为200g/L，得山药水煮液； (2)取麦芽浸粉；鸡蛋蛋白液；氯化钠；枸櫞酸镁；琼脂；假细锥甲素；黄葵内酯；磷酸ニ氢钾山-半胱氨酸及硫酸铜溶于步骤I所得山药本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种木糖葡萄球菌选择性培养基，其特征在，配制1000ml选择性培养基的配方中含有：麦芽浸粉15g；鸡蛋蛋白液150ml；氯化钠5g；枸橼酸镁0.5g；琼脂15g；假细锥甲素8~12mg；黄葵内酯?0.4?g；磷酸二氢钾0.2g；蒸馏水加至1000ml。

【技术特征摘要】
1.一种木糖葡萄球菌选择性培养基，其特征在，配制IOOOml选择性培养基的配方中含有 麦芽浸粉15g ； 鸡蛋蛋白液150ml ； 氯化钠5g ； 枸橼酸镁O. 5g ； 琼脂15g ； 假细锥甲素8 12mg; 黄葵内酯0.4 g; 磷酸二氢钾O. 2g ； 蒸馏水加至1000ml。2.根据权利要求1所述的一种木糖葡萄球菌选择性培养基，其特征在每IOOOml选择性培养基还含有硫酸铜4mg。3.根据权利要求1所述的一种木糖葡萄球菌选择性培养基，其特征在每IOOOml选择性培养基还含有L-半胱氨酸O. lg。4.根据权利要求1所述的一种木糖葡萄球菌选择性培养基，其特征在每IOOO...

【专利技术属性】
技术研发人员：候素君，
申请(专利权)人：候素君，
类型：发明
国别省市：