针对食品中的金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的多重PCR检测用引物组、试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术适用于食品微生物安全检测领域，提供了一种针对食品中的金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的多重PCR检测用引物组、试剂盒及检测方法。本发明专利技术的多重PCR检测用引物组、试剂盒及检测方法通过组合利用金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的种属特异性鉴别基因和耐药性相关基因，可实现检测覆盖范围广、特异性强且灵敏度高的技术效果，并且检测耗时短、操作较简单、设备要求低、通量高，可以节省大量的人力、物力和财力，适合快速检测的要求，易于在实际生产中推广应用。

【技术实现步骤摘要】
针对食品中的金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的多重PCR检测用引物组、试剂盒及检测方法
本专利技术属于食品微生物安全检测领域，涉及利用多重PCR技术对食品中的致病菌进行快速检测鉴定的引物组、试剂盒及方法。具体而言，本专利技术涉及针对食品中的金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)和沙门氏菌(Salmonellasp.)的多重PCR检测用引物组、试剂盒及检测方法。
技术介绍
近几年，食品安全事件频频出现，食品安全问题也越来越被社会公众所关注和重视。许多食源性致病菌通过水和食物传播而引发食源性疾病，其发病率和死亡率都呈现逐渐增加的趋势。在世界范围内，每年有超过30％的人口感染食源性疾病，造成数十亿美元的花销。预防和控制食源性疾病的发生和传播，已成为解决社会食品安全问题的重要举措之一。能否及时有效地控制与预防食源性疾病的发生和传播，关键在于能否快速准确地检测与鉴定食源性致病菌。金黄色葡萄球菌和沙门氏菌是引起食源性疾病的最主要的两类致病菌，国内外由这两类致病菌引发的食物中毒事件频频发生。这两类致病菌在食品中分布比较普遍，其污染食品后，不仅致使食品腐败变质，还产生多种毒素，导致严重的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于检测食品中的金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的多重PCR检测用引物组，所述引物组包括如下引物对：金黄色葡萄球菌检测用引物对：耐甲氧西林关键因子A基因(femA基因)扩增用引物对：femA‑F：AAGCACACAACAAGCGAGATAAC；femA‑R：TTGATAAAGAAGAAACCAGCAGAG，和/或耐热核酸酶基因(nuc基因)扩增用引物对：nuc‑F：TACATGTTCAAAGAGTTGTGGATG；nuc‑R：ATAAACATCTTGATTTGTTAATGTCTTCTTAC，以及沙门氏菌检测用引物对：侵袭蛋白A基因(invA基因)扩增用引物对：invA‑F：TTGACGAGCTTT...

【技术特征摘要】
1.一种对食品中的金黄色葡萄球菌和沙门氏菌进行检测的方法，所述方法包括以下步骤：a)从所述食品中获取模板DNA的前处理步骤；b)使用多重PCR检测用引物组或包含所述多重PCR检测用引物组的多重PCR检测用试剂盒对所述模板DNA进行多重PCR扩增的步骤；c)对扩增产物进行检测的步骤，从而对所述食品中金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的存在及含量进行分析，其中，所述引物组包括如下引物对：金黄色葡萄球菌检测用引物对以及沙门氏菌检测用引物对，所述金黄色葡萄球菌检测用引物对为：femA基因扩增用引物对：femA-F：AAGCACACAACAAGCGAGATAAC；femA-R：TTGATAAAGAAGAAACCAGCAGAG，和/或nuc基因扩增用引物对：nuc-F：TACATGTTCAAAGAGTTGTGGATG；nuc-R：ATAAACATCTTGATTTGTTAATGTCTTCTTAC，所述沙门氏菌检测用引物对为：invA基因扩增用引物对：invA-F：TTGACGAGCTTTATCATTGTCTG；invA-R：ACGTCTTTTTCTCTTGGTGCC，和/或hilA基因扩增用引物对：hilA-F：TGAATTACGCTCACAACACCTG；hilA-R：TGCTAAGCAACCAGATTACGATG，并且其中，在步骤b)中，所述多重PCR扩增的反应体系为：以总体积为25μL计，加入浓度为1pg/μL～100ng/μL的模板DNA1μL；所述多重PCR扩增的反应条件为：95℃预变性2min；94℃变性15s，55℃退火20s，72℃延伸30s，共进行35个循环；72℃延伸7min。2.根据权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡军，李慧，刘洋，欧竞堃，石嵩，杨凯，
申请(专利权)人：中粮营养健康研究院有限公司，中粮集团有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11