【技术实现步骤摘要】
201610355056
【技术保护点】
一种重组质粒，其特征在于，包含如下基因片段：终止子ADH1t、β‑胡萝卜素羟化酶基因crtZ、启动子FBA1p、启动子TDH3p、β‑胡萝卜素酮化酶基因crtW、终止子TDH2t顺次拼接而成的基因片段1，或终止子ADH1t、β‑胡萝卜素羟化酶基因crtZ、启动子TEF1p、启动子TDH3p、β‑胡萝卜素酮化酶基因crtW、终止子TDH2t顺次拼接而成的基因片段2；所述β‑胡萝卜素羟化酶基因crtZ来源于：水生副球菌(Agrobacterium aurantiacum)、产碱杆菌(Alcaligenes sp.strain PC‑1)，欧文氏菌(Erwinia uredovora)、成团泛菌(Pantoea agglomerans)、玉米细菌性枯萎病菌(Pantoea stewartii)、硫化叶菌(Sulfolobus solfataricus P2)、短波单胞菌(Brevundimonas sp.SD212)、短波单胞菌(Brevundimonas vesicularis DC263)或雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)；所述β‑胡萝卜素酮化酶基因crtW来...
【技术特征摘要】
1.一种重组质粒，其特征在于，包含如下基因片段：终止子ADH1t、β-胡萝卜素羟化酶基因crtZ、启动子FBA1p、启动子TDH3p、β-胡萝卜素酮化酶基因crtW、终止子TDH2t顺次拼接而成的基因片段1，或终止子ADH1t、β-胡萝卜素羟化酶基因crtZ、启动子TEF1p、启动子TDH3p、β-胡萝卜素酮化酶基因crtW、终止子TDH2t顺次拼接而成的基因片段2；所述β-胡萝卜素羟化酶基因crtZ来源于：水生副球菌(Agrobacterium aurantiacum)、产碱杆菌(Alcaligenes sp.strain PC-1)，欧文氏菌(Erwinia uredovora)、成团泛菌(Pantoea agglomerans)、玉米细菌性枯萎病菌(Pantoea stewartii)、硫化叶菌(Sulfolobus solfataricus P2)、短波单胞菌(Brevundimonas sp.SD212)、短波单胞菌(Brevundimonas vesicularis DC263)或雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)；所述β-胡萝卜素酮化酶基因crtW来源于：将175位的亮氨酸突变为甲硫氨酸的水生副球菌(Agrobacterium aurantiacum)、产碱杆菌(Alcaligenes sp.strain PC-1)，莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)、无类囊体蓝藻(Gloeobacter violaceus PCC 7421)、点状念珠藻(Nostoc punctiforme PCC73102crtW148)、鱼腥藻(Nostoc sp.PCC 7120)、短波单胞菌(Brevundimonas sp.SD212)、短波单胞菌(Brevundimonas vesicularis DC263)、红平红球菌(Rhodococcuserythropolis crtO320SHU019)、鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas sp.DC18MM1)。2.根据权利要求1所述重组质粒，其特征在于，所述重组质粒以pRS425K为基础质粒，所述pRS425K质粒在pRS425商品质粒基础上由Kan基因替换掉Amp基因得到。3.根据权利要求1所述重组质粒，其特征在于，所述水生副球菌来源的crtZ序列如SEQID NO:1所示，产碱杆菌来源的crtZ序列如SEQ ID NO:2所示，欧文氏菌来源的crtZ序列如SEQ ID NO:3所示，成团泛菌来源的crtZ序列如SEQ ID NO:4所示，玉米细菌性枯萎病菌来源的crtZ序列如SEQ ID NO:5所示，硫化叶菌来源的crtZ序列如SEQ ID NO:6所示，短波单胞菌(Brevundimonas sp.SD212)来源的crtZ序列如SEQ ID NO:7所示，短波单胞菌(Brevundimonas vesicularis DC263)来源的crtZ序列如SEQ ID NO:8所示，雨生红球藻来源的crtZ序列如SEQ ID NO:9所示。4.根据权利要求1所述重组质粒，其特征在于，所述175位的亮氨酸突变为甲硫氨酸的水生副球菌来源的crtW序列如SEQ ID NO:10所示，产碱杆菌来源的crtW序列如SEQ ID NO:11所示，莱茵衣藻来源的crtW序列如SEQ ID NO:12所示，无类囊体蓝藻来源的crtW序列如SEQ ID NO:13所示，点状念珠藻来源的crtW序列如SEQ ID NO:14所示，鱼腥藻来源的crtW序列如SEQ ID NO:15所示，短波单胞菌(Brevundimonas sp.SD212)来源的crtW序列如SEQID NO:16所示，短波单胞菌(Brevundimonas vesicularis DC263)来源的crtW序列如SEQID NO:17所示，红平红球菌来源的crtW序列如SEQ ID NO:18所示、鞘氨醇单胞菌来源的crtW序列如SEQ ID NO:19所示。5.根据权利要求1所述重组质粒，其特征在于，所述β-胡萝卜素羟化酶基因crtZ和β-胡萝卜素酮化酶基因crtW选择如下之一：(1)水生副球菌来源的crtW，与水生副球菌、产碱杆菌、短波单胞菌(Brevundimonassp.SD212)、短波单胞菌(Brevundimonas vesicularis DC263)、雨生红球藻、欧文氏菌、成团泛菌、玉米细菌性枯萎病菌、硫化叶菌中任意一种来源的crtZ；(2)产碱杆菌来源的crtW，与短波单胞菌(Brevundimonas vesicularis DC263)、欧文氏菌、雨生红球藻、玉米细菌性枯萎病菌、产碱杆菌中任意一种来源的crtZ；(3)短波单胞菌(Brevundimonas sp.SD212)来源的crtW，与欧文氏菌、玉米细菌性枯萎病菌、短波单胞菌(Brevundimonas sp.SD2...
【专利技术属性】
技术研发人员：肖文海，王瑞钊，王颖，元英进，
申请(专利权)人：天津大学，
类型：发明
国别省市：天津;12
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