扣囊复膜孢酵母新菌株及其培养方法和用途技术

本发明专利技术属于微生物领域，具体涉及一种扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)新菌株及其培养方法和用途。本发明专利技术要解决的技术问题是提供能同时具有较好的脱除硫甙和棉酚能力的技术手段。本发明专利技术解决该技术问题的技术方案是提供一种新的扣囊复膜孢酵母菌株。该扣囊复膜孢酵母菌株的保藏号CGMCC No.12221，命名为扣囊复膜孢酵母WNY‑2号。该菌株对菜粕中硫葡萄糖甙以及棉粕中棉酚均有较强脱毒能力的扣囊复膜孢酵母，并且试验证明其口服安全无毒。本发明专利技术为杂粕类微生物技术处理提供了菌种资源，为大规模制备新型生物蛋白原料提供了可靠基础，在饲料养殖领域具有极大的应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物领域，具体涉及涉及一种扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)新菌株及其培养方法和用途。
技术介绍
：目前我国有大量农副产品及加工副产物或被废弃或未能有效利用，如菜粕和棉粕等杂粕类，我国每年菜粕年产量约900万吨，棉粕产量约600万吨，蛋白含量高，营养成分丰富，但由于含有较多毒性物质和抗营养因子，在饲料中利用率极低。菜粕中毒性物主要是硫葡萄糖甙(简称硫甙)，棉粕中毒性物主要是棉酚。未经处理的菜粕及棉粕，在畜禽饲料中添加量仅能达到3～5％(幼小畜禽不能添加)，过量使用会造成畜禽器官损害，生长和繁殖性能下降。目前，使用微生物技术处理杂粕类生物质已有所报道，使用微生物处理能使硫甙或棉酚含量降低，饲喂价值提高，可替代部分进口豆粕，降低养殖成本。另外，经发酵处理后的粕类含有大量益生菌，能提高动物非特异性抗病力，减少抗菌药物的使用，提高食品安全性。因此，筛选出有较强脱毒能力的菌株对杂粕类生物技术处理有重要意义。目前未见有同时具有较好的脱除硫甙和棉酚能力的菌种报道。
技术实现思路
：本专利技术中涉及一株Saccharomycopsis fibuligera扣囊复膜孢酵母WNY-2号，该菌株于2016年3月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏号为CGMCC No.12221，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮编100101。本专利技术要解决的技术问题是提供一种能同时具有较好的脱除硫甙和棉酚能力的新菌种。本专利技术解决该技术问题的技术方案是提供一种新的扣囊复膜孢酵母菌株。该扣囊复膜孢酵母菌株的保藏号CGMCC No.12221。其中，该扣囊复膜孢酵母的16S rDNA序列如SEQ ID No.1所示。本专利技术还提供了上述扣囊复膜孢酵母的培养方法。该方法包括以下步骤：将所述扣囊复膜孢酵母新菌株接种到配方为蔗糖10～20g︰土豆浸出液1000ml的培养基中，在28～32℃温度下培养72～96h。其中，上述方法中所述的土豆浸出液由以下步骤制得：将土豆削皮后切成块状，每200g土豆加入1000ml的自来水，煮沸20分钟，纱布过滤，弃土豆渣取上清液，用自来水定容到1000ml。本专利技术还提供了扣囊复膜孢酵母在菜粕生物发酵中的用途。扣囊复膜孢酵母在菜粕上进行发酵可降解硫甙。本专利技术还提供了扣囊复膜孢酵母在棉粕生物发酵中的用途。扣囊复膜孢酵母在棉粕上进行发酵可降解棉酚。本专利技术的有益效果在于：本专利技术发现一株对菜粕中硫葡萄糖甙以及棉粕中棉酚均有较强脱毒能力的扣囊复膜孢酵母。该菌株在48小时内，对硫葡萄糖甙的去除率可达到约80％，对棉酚的去除率可达60％以上，并且试验证明其口服安全无毒。本专利技术为杂粕类微生物技术处理提供了菌种资源，并为大规模制备新型生物蛋白原料提供了可靠基础，在饲料养殖领域具有极大的应用价值。本专利技术提供的扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)WNY-2号，于2016年3月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏号为CGMCC No.12221。保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮编100101。附图说明：图1本菌株扣囊复膜孢酵母的细胞形态，放大倍数10×10图2本菌株扣囊复膜孢酵母的细胞形态，放大倍数40×10图3本菌株扣囊复膜孢酵母的菌落形态具体实施方式：本专利技术创造性地提供了扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)的一种新菌株，该菌株对硫葡萄糖甙和棉酚都具有较高的降解能力，能同时用在棉粕和菜粕的处理中，命名为扣囊复膜孢酵母WNY-2，于2016年3月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏号为CGMCC No.12221。该菌株的16S rDNA序列如SEQ ID No.1所示。该菌株的形态学特征如下：镜下特征：细胞呈椭圆形，细胞大小长5～7.5μm(平均6.2μm)；宽3.8～5μm(平均4.5μm)。可见细胞出芽，呈单边出芽繁殖。早期生长形成菌丝，并产生芽孢子。(参见图1和图2)菌落特征：菌落白色，扁平；直径约5～10mm；表面粗糙，呈颗粒感；菌落边缘不齐，似放射丝状，在放大镜下，可见菌丝。(参见图3)进一步的，该菌株的生理生化特征如下：糖发酵实验：麦芽糖、蔗糖、果糖、海藻糖、半乳糖、木糖和赤癣糖阳性；乳糖、阿拉伯糖、棉籽糖和水苏糖阴性；碳源同化实验：乳酸钠、柠檬酸钠、乙酸钠、丙酸钠、甘油、乙醇、乳糖、阿拉伯糖、棉籽糖和水苏糖阳性。氮源利用实验：能利用硝酸盐、硫酸铵和尿素。本专利技术菌株可由以下具体的培养方法进行培养：1、斜面保存菌种及培养从扣囊复膜孢酵母斜面菌种中，用接种环挑取1环接种到土豆蔗糖培养基的斜面中，其成分为蔗糖10～20g，土豆浸出液1000ml，20g琼脂粉，自然pH。置于28～32℃温度下，培养72～96h。进一步的，所述培养基成分中土豆浸出液的制备方法是，将新鲜土豆削皮后切成大指姆大小的块状，称取200g，加入1000ml的自来水，煮沸20分钟，纱布过滤，弃渣取上清液，用自来水定容到1000ml；2、扩大培养(1)用于菜粕发酵取菜粕粉150g，加水1000ml，小火煮沸20min，取上清液，加入蔗糖10g、KH2PO4 1g、MgSO4 0.5g、溶化后水定容1000ml，蒸汽灭菌120℃维持30分钟，待冷后备用；(2)用于棉粕发酵取棉粕粉150g，加水1000ml，小火煮沸20min，取上清液，加入棉籽糖10g、KH2PO41g、MgSO4 0.5g，溶化后水定容1000ml，蒸汽灭菌120℃维持30分钟，待冷后备用；从斜面菌株中挑取培养物，接入以上培养液中，接种量按1环/200ml。于28～32℃温度下，摇瓶培养48～60h，振摇速度120～150rpm，得到扣囊复膜孢酵母培养液。以下通过实施例对本专利技术进行更进一步的说明。实施例1菌株的筛选在研究传统白酒酿造的过程中，本专利技术从酒厂丢糟中筛选得到一些菌株。经过进一步的研究，一些菌株培养中的生物量较高，因而将其在各种农副产物(包括丢糟等各类加工糟渣)为基质上培养，均生长良好。进一步发现有一株菌在饼粕类原料上，有降低毒性物质含量的作用。将其命名为WNY-2，并进行进一步的研究。实施例2菌株的鉴定——16S rDNA序列分析(1)总DNA提取用土豆蔗糖培养液培养后，离心收集细胞，并用无菌蒸馏水洗涤3次，溶于提取缓冲液(100mMTris·Cl，100mM EDTA-Na2，200mM NaCl，2％CTAB，pH8.0)中，37℃振荡45min，加入20％SDS，65℃水浴1h。12,000rpm，离心10min，收集上清液。上清液用等体积的酚：氯仿：异戊醇(25：24：1)抽提2次，加入终浓度0.3M的NaAC(pH5.2)及2倍体积的无水乙醇，室温沉淀1h。4℃下离心(12,000rpm)20min。沉淀用70％乙醇洗涤2次，挥干后溶于50μL TE(10mmTris-Hcl，1mmNa2EDTA)中。(2)16S rDNA扩增和测序以总DNA为模板，用试剂盒扩增得到16S rD本文档来自技高网...

【技术保护点】
扣囊复膜孢酵母新菌株，其特征在于：其保藏号为CGMCC No.12221。

【技术特征摘要】
1.扣囊复膜孢酵母新菌株，其特征在于：其保藏号为CGMCC No.12221。2.根据权利要求1的扣囊复膜孢酵母新菌株，其特征在于：其16S rDNA序列为SEQ ID No.1所示。3.权利要求1或2所述的扣囊复膜孢酵母新菌株的菌种保藏培养方法，其特征在于包括以下步骤：将所述扣囊复膜孢酵母新菌株接种到配方为蔗糖10～20g︰土豆浸出液1000ml的培养基中，在28～32...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓小晨，吴谦，
申请(专利权)人：四川伯禹生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51