霍乱弧菌rfb-O139基因的质粒克隆菌株以及制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种霍乱弧菌rfb-O139基因的质粒克隆菌株、其制备方法，及其在非疾病诊断目的方面的应用,其以大肠杆菌pCC1FOS为载体，转化了霍乱弧菌的rfb-O139基因的质粒克隆菌株，保藏编号为CGMCC?NO.6997。主要用于霍乱弧菌相应基因检测的阳性对照样品，进行质量控制，也可用来考核检验人员的技术水平，以保证检验工作质量；并且可以对不同的分析方法和不同的鉴定仪器进行检验和校准，使之具有准确性、统一性、可比性和规范性。具有广泛的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程
，具体涉及霍乱弧菌全基因组DNA提取和rfb-0139基因的质粒克隆菌株、其制备方法及应用。
技术介绍
霍乱是由霍乱弧菌(Vibrio cholerae)引起的烈性肠道传染病，能引起霍乱流行的霍乱弧菌主要有两种血清型，既01群和0139群，霍乱弧菌的强致病作用主要是由其分泌的霍乱肠毒素导致严重腹泻所致，因此准确、快速的检测霍乱弧菌，特别是产毒霍乱弧菌，对于预防霍乱弧菌感染具有重要意义。随着分子生物学研究的发展，人们对细菌的侵袭素和毒力岛等毒力基因认识的不断深入，细菌的检测方法已经从传统的一般表型特征鉴定深化为遗传特征基因的鉴定。霍乱弧菌hlyA基因编码具有溶血-溶细胞的蛋白，是弧菌属高度保守的管家基因；霍乱弧菌rfb-ΟΙ基因和rfb-0139基因分别是01群霍乱弧菌和0139群霍乱弧菌菌体抗原编码基因，ctxAB基因是分泌霍乱肠毒素的毒力标志，具有高度保守性。由于霍乱弧菌的相关毒力基因、管家基因和功能基因总是成簇的位于染色体上，一般都在几kb到几十kb之间，难以用一般的PCR方法扩增并克隆这些基因。基因组文库(genomic library)是上世纪本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种霍乱弧菌rfb?O139基因的质粒克隆菌株，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGM?CC?NO.6997。

【技术特征摘要】
1.一种霍乱弧菌rfb-0139基因的质粒克隆菌株，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGM CC N0.6997。2.一种霍乱弧菌rfb-0139基因检测试剂盒，其特征在于:包括权利要求1所述的保藏编号为CGMCC N0.6997的质粒克隆菌株，及上下游引物与探针:SEQ ID N0.7 ;SEQ ID N0.8 ；SEQ ID N0...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈晓东，于兵，麻丽丹，田卓，
申请(专利权)人：陈晓东，于兵，麻丽丹，田卓，
类型：发明
国别省市：