一种用于牛基因组位点特异性重组的RNA干扰载体及其构建方法和应用技术

技术编号:8761162 阅读:237 留言:0更新日期:2013-06-06 22:56
本发明专利技术公开了一种用于牛基因组位点特异性重组的RNA干扰载体及其构建方法和应用,属于生物技术领域。本发明专利技术的干扰载体依次包括以下相连的各部分:HSV-TK表达元件、用于载体线性化的酶切位点、与牛的scaffold序列上游进行同源重组的同源重组臂1、人U6启动子序列、多克隆酶切位点、人U6终止子序列、含有PCMV启动子的新霉素抗性基因、与牛的scaffold基因下游进行同源重组的同源重组臂2、复制起始位点基因及氨苄青霉素抗性筛选基因。本发明专利技术的干扰载体实现了对牛源细胞基因组的精确打靶,并为筛选提供了方便,插入位点以及插入片段不影响染色体整体结构,不对基因组造成非研究性基因表达的影响,为研究提供了便利。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种用于牛基因组位点特异性重组的RNA干扰载体,其特征在于所述的干扰载体依次包括以下相连的各部分:HSV?TK表达元件、用于载体线性化的酶切位点、与牛的scaffold序列上游进行同源重组的同源重组臂1、人U6启动子序列、多克隆酶切位点、人U6终止子序列、含有PCMV启动子的新霉素抗性基因、与牛的scaffold序列下游进行同源重组的同源重组臂2、复制起始位点基因以及氨苄青霉素抗性筛选基因,所述的牛的scaffold序列位于牛ITGB6基因以及PLA2R1基因之间,scaffold的GeneBank登录号为NW_003103838REGION:6735248..6760428。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:常惠芸马延滨邵军军高闪电赵付荣丛国正林彤独军政
申请(专利权)人:中国农业科学院兰州兽医研究所
类型:发明
国别省市:

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