一种目的蛋白制备方法及其用途技术

技术编号:8761152 阅读:279 留言:0更新日期:2013-06-06 22:55
本发明专利技术涉及一种目的蛋白制备方法及其用途。其制备方法为,目的蛋白核苷酸序列片段的获得;目的蛋白重组表达载体的构建;目的蛋白的诱导表达;纯化;切割;目的蛋白核苷酸序列片段的前面插入单体切割的识别位点;优选可在目的蛋白的核苷酸序列片段上游引入kex2酶切位点,在下游引入盐酸羟胺切割位点;目的蛋白的核苷酸序列片段通过SOE技术获得,并通过引物引入单体切割的识别位点;目的蛋白可以是人神经生长因子,胸腺肽、虎纹克胰肽、虎纹镇痛肽等。制备得到的目的蛋白表达量高、易于纯化、基因表达产物即为目的蛋白单体,不带额外氨基酸残基,既保证了目的蛋白产物良好的生物学活性,也省去了多拷贝的切割成本,纯化简单,易于大量生产。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种目的蛋白的制备方法,其特征是:包括如下步骤,目的蛋白核苷酸序列片段的获得;目的蛋白重组表达载体的构建;目的蛋白的诱导表达;目的蛋白的纯化;纯化产物的切割;所述目的蛋白的核苷酸序列片段的前面插入单体切割的识别位点;优选地,在目的蛋白的核苷酸序列片段上游引入kex2酶切位点,在下游引入盐酸羟胺切割位点;所述目的蛋白的核苷酸序列片段通过SOE技术获得,通过引物引入单体切割的识别位点;优选的,目的蛋白是人神经生长因子,胸腺肽、虎纹克胰肽、虎纹镇痛肽。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:任宏伟凡复林昳章永垒梁洁
申请(专利权)人:厦门北大之路生物工程有限公司
类型:发明
国别省市:

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