一种重组蜈蚣抗昆虫毒素基因及其表达纯化方法和用途技术

本发明专利技术属于DNA重组技术，特别是涉及编码动物蛋白的基因，更为具体的说是涉及一种重组蜈蚣抗昆虫毒素基因、及其表达纯化方法和通途。根据少棘蜈蚣天然毒素序列，设计了适合在大肠肝菌中表达的DNA序列，并在大肠杆菌中重组表达，获得了具有明显抗昆虫活性的少棘蜈蚣抗昆虫毒素。利用本发明专利技术获得的重组蜈蚣抗昆虫毒素rScolotoxin-Ssm2a对昆虫具有强烈的神经毒性和致死作用。可用于制备神经生物学研究试剂和生物杀虫剂，也可用于蜈蚣神经毒素空间结构及药理学活性等研究。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于DNA重组技术，特别是涉及编码动物蛋白的基因，更为具体的说是涉及一种重组蜈蚣抗昆虫毒素基因、及其表达纯化方法和通途。
技术介绍
蜈蚁(centipede)是节肢动物门Arthropoda唇足纲Chilopoda动物的总称，全世界约有 3300 种(Edgecombe, G.D.，Giribet, G.，Ann.Rev.Entomo1.2007.52，151-170.)。蜈蚣科Scolopendridae蜈蚣(以下所称蜈蚣皆为此类)为其中最凶猛的捕食性动物，主要以昆虫和小型无脊椎动物为食；大型蜈蚣也能捕食蟾蜍、蛇、以至蝙蝠和大鼠等脊椎动物。蜈蚣通过向猎物注入毒液，直接杀死或麻痹猎物而捕食之。与蜘蛛、蝎等捕食性节肢动物一祥，在长期的进化过程中，蜈蚣毒液系统发展出了一系列结构独特、性能高效且特异的毒素。然而，与对蜘蛛和蝎各近百种抗昆虫毒素的深入研究相比，人们对蜈蚣抗昆虫毒素的石开究相当薄弱(E.F.Schwartz, C.B.F.Mourao, K.G.Moreira, T.S.Camargos, M.R.Mortari,Pept Sc1.2012.98(4):385-40本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种重组蜈蚣抗昆虫毒素Scolotoxin?Ssm2.1基因，其特征是：SEQ?ID?NO1的核苷酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种重组蜈蚣抗昆虫毒素Scolotoxin-Ssm2.1基因，其特征是:SEQ ID NOl的核苷酸序列。2.根据权利要求1所述的ー种重组蜈蚣抗昆虫毒素Scolotoxin-Ssm〗.1基因，其特征是:重组蜈蚣抗昆虫毒素Scolotoxin-Ssm2.1基因突变形成至少含有64%的与SEQ ID NOl中的密码子相同的突变体基因。3.一种重组蜈蚣抗昆虫毒素Scolotoxin-Ssm2.1基因的表达纯化方法，其特征是包括如下步骤: A，构建含有重组蜈蚣抗昆虫毒素Scolotoxin-Ssm2.1基因或含有重组蜈蚣抗昆虫毒素 Scolotoxin_Ssm2.1 突变体基因的重组质粒 pSUMO-M- Scolotoxin-Ssm2.1; B,将重组质粒pSUMO-M- Scolotoxin-Ssm2.1转化至宿主细胞中，得到含有重组质粒的工程菌株； C，上述工程菌株经IPTG诱导，获得含有重组蜈蚣抗昆虫毒素的菌体； D，将上述菌体清洗、离心、超声破碎，收集上清液； E，将上清液反复通过Ni2+-1DA亲和层析柱纯化，得到融合蛋白； F，上述融合蛋白经过SUMO蛋白酶酶切，得到重组蜈蚣抗昆虫毒素rbcolotoxin-Ss...

【专利技术属性】
技术研发人员：华卫建，
申请(专利权)人：江苏教育学院，
类型：发明
国别省市：