一种从蜂花粉中提取核酸及纯化的方法技术

本发明专利技术属于生物化学技术领域，是一种从蜂花粉中提取核酸及纯化的方法。本发明专利技术的具体提取方法是：将经过筛选、去杂、干燥后的蜂花粉冷冻进行超细微粉碎，粒度达到20-60目，加入重量比1∶8-10的0.14mol/L氯化钠溶液，匀浆，通过差速离心法使细胞器分离，并在20-30千赫兹超声30-40分钟，使之裂解得到DNA-蛋白，然后加入重量比1∶6-8的1mol/L氯化钠溶液，匀浆，并在20-30千赫兹超声30-40分钟，使之裂解得到RNA-核蛋白，加入适量十二烷基磺酸钠使蛋白质和核酸分开，加入浓醋酸钾，使十二烷基磺酸钠-蛋白质复合物沉淀，并使多余的十二烷基磺酸钠转化为溶解度小的钾盐而同时沉淀，反复提取，采用超离心或是离子交换层析的方法得到核酸纯溶液，采用真空冷冻干燥得到核酸纯物质。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物化学
，具体是。本产品所用原料蜂花粉来自大兴安岭的原始森林之中。这里地处北纬50度一 53度之间，是一块天然净土，昼夜温差大，适合山野花的生长。这里植被繁茂，物种丰富。在8.4万平方公里的土地上，有上千种野生植物，其中:蜜、粉、胶源植物有5.985万亩，蜂产品年储量可达84万吨。本产品原料都符合欧盟有机食品认证组织有机食品生产、加工标准，是安全的功能性营养食品。
技术介绍
蜂花粉是由许许多多椭圆形的蜂花粉团组成，其主要组成物质是蜂花粉粒。蜂花粉粒是植物精华之所在， 它包含着孕育一个新生命的全部营养物质，所以被人们誉为“浓缩的营养库” “浓缩的微型天然药剂” “完全营养食品”等，蜂花粉的营养成分主要集中在蜂花粉粒的内含物中，目前已知含有200多种营养成分。蛋白质、氨基酸类:蜂花粉中含有8% 40%的蛋白质和氨基酸。蜂花粉中的蛋白质平均含量大约为20%，它是生命的基本物质。蜂花粉中含有20多种氨基酸，在某种意义上说是氨基酸的浓缩物质，其中所含人体必需氨基酸约为牛肉、鸡蛋的5 7倍。糖类:蜂花粉中的糖类物质占25% 48%，主要包括葡萄糖、果糖和淀粉，还有纤维素和半纤维互等碳水化合物。其中最有开发前景的是蜂花粉多糖，它具有很强的免疫功能，具有明显的防癌功效。脂类:蜂花粉中含脂类物质5%左右，其中60% 91%为不饱和和脂肪酸，它为人体内不能合成而又不可缺乏的营养成分，对大脑及神经系统的发育具有极为重要的作用。酶类:蜂花粉中有上百种酶和辅酶，是影响细胞代谢的重要物质，参与人体中的一切生化过程，对营养成分的分解、合成、消化吸收起到催化作用，如超氧化物歧化酶(SOD)即有抗衰老作用。维生素类:蜂花粉中含有多种维生素，不仅种类十分齐全，而且含量很高，是天然维生素的浓缩物。主要有维生素A、B1' B2、B3、B4、B5、B6、B” C、D、E、P等。常量和微量元素:蜂花粉含有丰富的钙、磷、氯、钾、钠、镁、硫、硅等常量元素和铁、碘、铜、锶、锌、锰、钻、钥、铬、镍、锡、硒、钒、铝、钡、钛等多种微量元素。这些元素对维护和保持人体的生命活动起着重要作用。核酸:蜂花粉中含有约2%的核酸，是人们公认的富含核酸食物鸡肝、虾米的5 10倍。核酸的存在，大大提高了蜂花粉的医疗保健价值，可用于免疫功能低下和肿瘤病人的治疗，因为核酸有促进细胞再生和延缓衰老的功能。黄酮类化合物:每100克蜂花粉中黄酮类化合物含量高达2549.9毫克，能起到抗动脉硬化、降低胆固醇、解疼和抗辐射的作用。其它有效成分:蜂花粉中还含有一些激素，如促性腺激素、吲哚乙酸(生长素)、赤霉素、乙烯、色素、多种有机酸和一些尚未弄清的成分，有待进一步分析研究。总之，蜂花粉被营养学家誉为当代世界的营养之冠，是人类的一个重要营养源。但是目前还没有有效的开发和利用，直接食用或冲服，有效成分溶出量很少，人体吸收利用率很低，且部分人群还会产生过敏现象。因此开发蜂花粉高营养型产品是亟待解决的问题。
技术实现思路
本专利技术的目的就是提供使人体更多地吸收蜂花粉营养成分，解决核酸提取率不高，有害物质残留量大，应用范围不广，日常膳食不能满足人体需求的一种方法。本专利技术是以大兴安岭纯天然有机苕条蜂花粉为原料，采用超细微粉碎、超声萃取、离心分离、离子交换层析及真空冷冻干燥的技术相结合从蜂花粉中提取核酸及纯化的一种方法。本专利技术的提取方法是:将经过筛选、去杂、干燥后的蜂花粉冷冻进行超细微粉碎，粒度达到20-60目，加入重量比1: 8-10的0.14mol/L氯化钠溶液，匀浆，通过差速离心法使细胞器分离，并在20-30千赫兹超声30-40分钟，使之裂解得到DNA-蛋白，然后加入重量比1: 6-8的lmol/L氯化钠溶液，匀浆，并在20-30千赫兹超声30-40分钟，使之裂解得到RNA-核蛋白，加入适量十二烷基磺酸钠使蛋白质和核酸分开，加入浓醋酸钾，使十二烷基磺酸钠-蛋白质复合物沉淀，并使多余的十二烷基磺酸钠转化为溶解度小的钾盐而同时沉淀，反复提取，采用超离心或是离子交换层析的方法得到核酸纯溶液，采用真空冷冻干燥得到核酸纯物质。据《中华本草》记载:蜂花粉含有丰富的营养物质，是全面营养食品。食用蜂花粉对于快速消除疲劳、便秘、营养肌肤、美容养颜，调节内分泌具有明显的保健作用。特别是对糖尿病、心脑血管疾病、肿瘤、前列腺炎还具有辅助治疗作用。本专利技术是一种从蜂花粉中提取核酸的方法，其优点在于:1、提取率高，可以达到40-50% ;2、生产周期短，成本相对较低，不添加有害的化学试剂，不会污染环境；3、应用范围广，可以在食品、医药中添`加，补充人体日常膳食达不到每天约1500毫克的核酸量。具体实施例方式实施例1:本专利技术的提取方法是:将经过筛选、去杂、干燥后的蜂花粉冷冻进行超细微粉碎，粒度达到40-60目，加入重量比1: 8-10的0.14mol/L氯化钠溶液，匀浆，通过差速离心法使细胞器分离，并在20-30千赫兹超声30-40分钟，使之裂解得到DNA-蛋白，然后加入重量比1: 6-8的lmol/L氯化钠溶液，匀浆，并在20-30千赫兹超声30-40分钟，使之裂解得到RNA-核蛋白，加入适量十二烷基磺酸钠使蛋白质和核酸分开，加入浓醋酸钾，使十二烷基磺酸钠-蛋白质复合物沉淀，并使多余的十二烷基磺酸钠转化为溶解度小的钾盐而同时沉淀，反复提取，采用超离心或是离子交换层析的方法得到核酸纯溶液，采用真空冷冻干燥得到核酸纯物质。实施例2:本专利技术的提取方法是:将经过筛选、去杂、干燥后的蜂花粉冷冻进行超细微粉碎，粒度达到20-40目，加入重量比1: 8-10的0.14mol/L氯化钠溶液，匀浆，通过差速离心法使细胞器分离，并在20-30千赫兹超声30-40分钟，使之裂解得到DNA-蛋白，然后加入重量比1: 6-8的lmol/L氯化钠溶液，匀浆，并在20-30千赫兹超声30-40分钟，使之裂解得到RNA-核蛋白，加入适量十二烷基磺酸钠使蛋白质和核酸分开，加入浓醋酸钾，使十二烷基磺酸钠-蛋白质复合物沉淀，并使多余的十二烷基磺酸钠转化为溶解度小的钾盐而同时沉淀，反复提取，采用超离心或是离子交换层析的方法得到核酸纯溶液，采用真空冷冻干燥得到核酸纯物质。实施例3:本专利技术的提取方法是:将经过筛选、去杂、干燥后的蜂花粉冷冻进行超细微粉碎，粒度达到20-60目，加入重量比1: 10-12的0.14mol/L氯化钠溶液，匀浆，通过差速离心法使细胞器分离，并在20-30千赫兹超声30-40分钟，使之裂解得到DNA-蛋白，然后加入重量比1: 6-8的lmol/L氯化钠溶液，匀浆，并在20-30千赫兹超声30-40分钟，使之裂解得到RNA-核蛋白，加入适量十二烷基磺酸钠使蛋白质和核酸分开，加入浓醋酸钾，使十二烷基磺酸钠-蛋白质复合物沉淀，并使多余的十二烷基磺酸钠转化为溶解度小的钾盐而同时沉淀，反复提取，采用超离心或是离子交换层析的方法得到核酸纯溶液，采用真空冷冻干燥得到核酸纯物质 。实施例4:本专利技术的提取方法是:将经过筛选、去杂、干燥后的蜂花粉冷冻进行超细微粉碎，粒度达到20-60目，加入重量比1: 6-8的0.14mol/L氯化钠溶液，匀浆，通过差速离心法使细胞器分离，并在20-30千赫兹超声30-40分钟，使之裂解得到DNA-蛋白本文档来自技高网...

【技术保护点】
本专利技术属于生物化学技术领域，其特征是一种采用超细微粉碎、超声萃取、离心分离、离子交换层析及真空冷冻干燥的技术相结合从蜂花粉中提取核酸及纯化的方法，提取率达到40‑50％。具体是：将经过筛选、去杂、干燥后的蜂花粉冷冻进行超细微粉碎，粒度达到20‑60目，加入重量比1∶8‑10的0.14mol/L氯化钠溶液，匀浆，通过差速离心法使细胞器分离，并在20‑30千赫兹超声30‑40分钟，使之裂解得到DNA‑蛋白，然后加入重量比1∶6‑8的1mol/L氯化钠溶液，匀浆，并在20‑30千赫兹超声30‑40分钟，使之裂解得到RNA‑核蛋白，加入适量十二烷基磺酸钠使蛋白质和核酸分开，加入浓醋酸钾，使十二烷基磺酸钠‑蛋白质复合物沉淀，并使多余的十二烷基磺酸钠转化为溶解度小的钾盐而同时沉淀，反复提取，采用超离心或是离子交换层析的方法得到核酸纯溶液，采用真空冷冻干燥得到核酸纯物质。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：徐春华，孟庆生，
申请(专利权)人：大兴安岭绿源蜂业有限公司，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23