改性蛋白-阳离子载体-基因三元复合物及制备方法技术

本发明专利技术公开了改性蛋白-阳离子载体-基因三元复合物及制备方法，改性蛋白-阳离子载体-基因三元复合物，是在阳离子载体-基因复合物上结合有改性蛋白。本发明专利技术所制备的改性蛋白等电点约在5.5-6.5，具有内涵体环境下电荷反转能力。其能在pH大于7的情况下带负电荷，能与阳离子载体-基因二元复合物结合，屏蔽其正电荷从而降低毒性；在pH小于5的情况下带正电荷，改性蛋白从阳离子载体-基因二元复合物上脱落，与阳离子基因载体共同发挥“质子海绵效应”，使阳离子复合物基因载体从内涵体内逃离。改性蛋白和改性蛋白-阳离子载体-基因三元复合物的制备方法简单。改性蛋白-阳离子载体-基因三元复合物的基因转染效率高，生物毒性低。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物材料
，涉及一种。
技术介绍
基因治疗是一种将外源基因导入目的细胞并有效表达，从而达到治病目的的治疗方法。裸露的外源基因带负电，难以渗入同样带负电的细胞膜且容易被机体或细胞降解，因而难以表达。所以基因治疗的关键是选择合适的基因载体及基因导入方法，使目的基因能够在靶细胞中获得安全、高效、可控且稳定的表达。基因载体主要有病毒载体和非病毒载体两类。1.病毒载体转染效率高，但也有能诱导宿主免疫反应、潜在的致瘤性、装载容量有限、代价高等缺点，限制了它们的应用。2.非病毒载体是目前公认可替代病毒载体的基因载体系统，它可避免诸如免疫原性、毒性等病毒载体的缺陷。具有低毒、低免疫反应，外源基因随机整合率低且携带基因大小类型不受限制等优点。虽然非病毒载体安全性好，但存在转染、整合效率低等缺点。因此，如何研制出安全有效的、生物相容性好的基因药物载体，如何提高非病毒性基因载体的靶向特异性和体内外转染效率，已经是迫在眉睫的关键问题。阳离子脂质体和阳离子聚合物载体属于非病毒性基因载体。它们是利用结构上带正电的氨基静电复合基因，再通过静电作用结合细胞膜或通过携带的靶向配体与细胞膜上的带负本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种改性蛋白，其特征是用式（I）或（II）表示：其中：P为牛血清白蛋白、人血清白蛋白或胶原蛋白。FDA00002785511800011.jpg

【技术特征摘要】
1.一种改性蛋白，其特征是用式(I)或(II)表示:2.权利要求1改性蛋白的制备方法，其特征包括如下步骤: (1)取400mg蛋白溶于40-80mL双蒸水中溶解； (2)将80-100mL乙胺或80_100mL浓度为2_4mg/mL的巯基乙胺水溶液滴加到步骤(I)制备的蛋白溶液中，调节PH至4.7-4.8 ； (3)取80-100mg的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐溶于8_12mL双蒸水中溶解，加入步骤(2)获得的溶液中，在20-30°C水浴中反应l_4h ； (4)将步骤(3)获得的溶液用截止分子量3500 10000的透析袋在纯水中透析2 14天; (5)将步骤(4)获得的透析产物冷冻干燥后得到改性蛋白。3.根据权利要求2所述的一种改性蛋白的制备方法，其特征是所述蛋白为牛血清白蛋白、人血清白蛋白或胶原蛋白。4.性蛋白-阳离子载...

【专利技术属性】
技术研发人员：邢金峰，张宁，王重夕，
申请(专利权)人：天津大学，
类型：发明
国别省市：