一种高纯度牛血清白蛋白的制备方法技术

本发明专利技术提供一种高纯度牛血清白蛋白的制备方法，包括如下步骤：A）分离血浆；B）制备血清；C）加热提取；D）置换溶液和浓缩；E）DEAE柱进一步纯化；F）BSA剂型处理。本发明专利技术用料少，可节约投入；工艺流程短，省时省力；操作简单，重复性好，适合大批量生产；目标产品得率高、纯度高、质量好，本方法制得的成品牛血清白蛋白经过质量检验，产品质量完全符合现行行业质量标准，使用效果良好，可满足生化试剂与生物制药行业对牛血清白蛋白的质量要求；成本低，经济效益显著。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种从牛血清中提取白蛋白的方法，尤其涉及。
技术介绍
牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin, BSA)是牛血清中的一种球蛋白，包含583个氨基酸残基，分子量为66. 43kDa，等电点为4. 7，含氮量为16%，含糖量为O. 08%,含脂量只有O. 2% ;白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合，BSA是生物学诸多学科及医、药学各领域广泛应用的生化试剂,例如在western blot中作为封闭试剂，血液中的白蛋白主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用；在动物细胞无血清培养中，添加白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用。 BSA的制备方法较多，但多数尚处于实验阶段，目前市场上的BSA主要采用以下三种方法制得(I)盐析法，用硫酸铵分级沉淀后，经辛酸处理精制而得；(2)有机溶剂沉淀法，以E. J. Cohn氏法最常用，最早用于人血液制品的生产，利用乙醇的低介电常数性质以及蛋白质在一定温度、pH、离子强度及浓度条件下在不同浓度乙醇中溶解度不同分离血浆蛋白质，可以生产出多种血浆蛋白；(3)热激法，取牛血用枸橼酸钠抗凝离心后得到血浆，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高纯度牛血清白蛋白的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：A）分离血浆：取新鲜牛血，加入血量体积的10%的抗凝剂，轻轻搅拌使抗凝剂分散均匀，4℃，1500rpm离心，分离收集血浆；B）制备血清：室温下，取所述血浆，边搅拌边加入无水氯化钙粉末，待所述无水氯化钙粉末完全溶解后静置0.8~1.2h，将凝结成果冻状的血浆块打碎，5000?rpm离心，上层澄清液体即为牛血清，下层乳黄色凝块为纤维蛋白，收集所述牛血清；C）加热提取：取所述牛血清用pH5.2~7.0?PBS缓冲液稀释2~10倍后放入带夹层的反应釜中，加入辛酸钠并搅拌使之完全溶解，再加入所述牛血清体积的5%~20%的乙醇，用1当量浓度的HC...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李攀，袁正明，谈宇清，
申请(专利权)人：深圳市美凯特科技有限公司，
类型：发明
国别省市：