一种分离富集山豆根中具异戊烯基黄酮部位的方法技术

本发明专利技术公开了一种分离富集山豆根中具异戊烯基黄酮部位的方法，所述方法包括如下步骤：使山豆根的乙醇提取液通过大孔吸附树脂进行柱色谱分离，所述大孔吸附树脂为大孔吸附树脂D101或大孔吸附树脂AB-8，依次用40%-50%乙醇、80%-95%乙醇洗脱，收集80%-95%乙醇洗脱液，浓缩至浸膏状，干燥得到山豆根中具异戊烯基黄酮部位。本发明专利技术所述的方法采用高浓度乙醇提取，大孔吸附树脂分离富集的工艺简单，高效，过程简便，目标明确，适合工业生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种中药有效成分分离
，特指一种利用大孔吸附树脂法富集纯化山豆根中具异戊烯基黄酮部位的方法。
技术介绍
山豆根为豆科(Leguminosae)槐属植物越南槐Sophora tonkinensis Gagnep.的干燥根及根茎，主产于广西、贵州、云南、广东、江西等地，其味苦、性寒，为清热解毒、消肿利咽之要药，主治火毒蕴结、咽喉肿痛、齿龈肿痛等症。现代药理研究表明山豆根具有抗病毒、抗肝损伤、抗肿瘤等作用，其含有的黄酮和生物碱两大类成分主要为这些药理活性的物质基础。经检索，现有专利中，CN1994364A的专利技术专利是通过调节溶液pH，使用二次大孔吸附树脂柱色谱法，收集40%-60%乙醇洗脱液作为山豆根提取物；CN101347497A的专利技术专利是通过有机溶剂提取，硅胶柱层析结合制备液相色谱分离得到山豆根中的一些有效成分；CN101278969A的专利技术专利是使用聚苯乙烯型阳离子交换树脂对山豆根水提物中非生物碱部位进行制备。而采用大孔吸附树脂分离富集山豆根的95%乙醇提取物，制备山豆根中具异戊烯基黄酮部位的研究尚未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种一步柱层析即可得到山豆根中具异戊烯基黄酮部位的分离富集方法，具有简单、快速、成本较低的特点。为实现上述专利技术目的，本专利技术采用如下技术方案:，包括如下步骤:使山豆根的乙醇提取液通过大孔吸附树脂进行柱色谱分离，所述大孔吸附树脂为大孔吸附树脂DlOl或大孔吸附树脂AB-8，依次用40%-50%乙醇、80%-95%乙醇洗脱，收集80%_95%乙醇洗脱液，浓缩至浸膏状，干燥得到山豆根中具异戊烯基黄酮部位。本专利技术所述的山豆根的乙醇提取液是以山豆根药材为原料，以乙醇为提取试剂，通过常规提取方法获得，其中控制山豆根的乙醇提取液中的乙醇浓度为20%_40%。本专利技术具体推荐所述的山豆根的乙醇提取液通过如下方法获得:将山豆根药材粉碎，加入8 20倍的70%-95%乙醇(优选为95%乙醇)，回流提取，提取液过滤，取滤液浓缩至乙醇浓度为20%-40%，即得山豆根的乙醇提取液。作为优选，将山豆根药材粉碎至4(Γ200目。作为优选，回流提取2 3次，每次6(Γ90分钟，以充分提取山豆根中的有效成分。作为优选，柱色谱分离过程中，用40%_50%乙醇或80%_95%乙醇洗脱时，每个浓度冲洗8 10个保留体积。作为优选，柱色谱分离过程中，先用50%乙醇洗脱，再用90%乙醇洗脱。 本专利技术具体推荐所述的分离富集山豆根中具异戊烯基黄酮部位的方法按照如下步骤进行:(I)将山豆根药材粉碎，加入8^20倍的70%_95%乙醇，回流提取，过滤，取滤液浓缩至乙醇浓度为20%-40%，得到山豆根的乙醇提取液；(2)将山豆根的乙醇提取液通过大孔吸附树脂，依序用40%_50%乙醇、80%_95%乙醇洗脱，每个浓度冲洗8 10个保留体积，收集80%-95%乙醇洗脱液；(3)将步骤(2)获得的80%_95%乙醇洗脱液减压浓缩至浸膏状，经真空干燥或冷冻干燥成干粉，即得山豆根中具异戊烯基黄酮部位。本专利技术进一步推荐所述的分离富集山豆根中具异戊烯基黄酮部位的方法按照如下步骤进行:(I)将山豆根药材粉碎，加入8^20倍的95%乙醇，回流提取2 3次，每次6(Γ90分钟，过滤，取滤液浓缩至乙醇浓度为20%-40%，得到山豆根的乙醇提取液；(2)将山豆根的乙醇提取液通过大孔吸附树脂，依序用50%乙醇、90%乙醇洗脱，每个浓度冲洗8 10个保留体积，收集90%乙醇洗脱液；(3)将步骤(2)获得的90%乙醇洗脱液减压浓缩至浸膏状，经真空干燥或冷冻干燥成干粉，即得山豆根中具异戊烯基黄酮部位。本专利技术中的乙醇浓度均为体积浓度。与现有技术相比，本专利技术的有益效果主要体现在:`(I)本专利技术所述的方法采用高浓度乙醇提取，大孔吸附树脂分离富集的工艺简单，高效，过程简便，目标明确，适合工业生产； ( 2 )本专利技术整个工艺过程中，除使用乙醇外，未带入其他外源物质，并且在减压浓缩过程中可除去；未使用其它任何毒性有机溶剂，安全、环保；(3)本专利技术所用树脂均可再生并重复使用，有利于降低工艺的成本。附图说明图1为山豆根中具异戊烯基黄酮对照品的HPLC图谱；图2为实施例1大孔吸附树脂50%乙醇洗脱液的HPLC图谱；图3是实施例1中大孔吸附树脂90%乙醇洗脱液的HPLC图谱；图4为实施例1中山豆根中具异戊烯基黄酮部位的HPLC图谱。具体实施例方式下面结合具体实施例对本专利技术进行进一步描述，但本专利技术的保护范围并不仅限于此:本专利技术制得的具异戊烯基黄酮部位的检测采用高效液相色谱-示差折光检测法和碘化铋钾显色剂进行检测，色谱分析条件如下:仪器:高效液相色谱仪(Agilentl260四元液相色谱，安捷伦科技有限公司)色谱柱:Eclipse父013-(]18色谱柱(250\4.6 mm, 5 Mm, Agilent) ;Zorbax SB C18保护柱(12.5X4.6 mm, 5 Mm, Agilent)；流动相:乙腈(A) -0.03%甲酸(B);流速:1.0mL.mirf1 ；检测波长:280nm；柱温:40°C;进样量:20yL;洗脱梯度表本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离富集山豆根中具异戊烯基黄酮部位的方法，其特征在于所述方法包括如下步骤：使山豆根的乙醇提取液通过大孔吸附树脂进行柱色谱分离，所述大孔吸附树脂为大孔吸附树脂D101或大孔吸附树脂AB?8，依次用40%?50%乙醇、80%?95%乙醇洗脱，收集80%?95%乙醇洗脱液，浓缩至浸膏状，干燥得到山豆根中具异戊烯基黄酮部位。

【技术特征摘要】
1.一种分离富集山豆根中具异戊烯基黄酮部位的方法，其特征在于所述方法包括如下步骤:使山豆根的乙醇提取液通过大孔吸附树脂进行柱色谱分离，所述大孔吸附树脂为大孔吸附树脂DlOl或大孔吸附树脂AB-8，依次用40%-50%乙醇、80%_95%乙醇洗脱，收集80%-95%乙醇洗脱液，浓缩至浸膏状，干燥得到山豆根中具异戊烯基黄酮部位。2.按权利要求1所述的分离富集山豆根中具异戊烯基黄酮部位的方法，其特征在于所述的山豆根的乙醇提取液通过如下方法获得:将山豆根药材粉碎,加入8^20倍的70%-95%乙醇，回流提取，提取液过滤，取滤液浓缩至乙醇浓度为20%-40%，即得山豆根的乙醇提取液。3.按权利要求2所述的分离富集山豆根中具异戊烯基黄酮部位的方法，其特征在于:回流提取2 3次，每次6(Γ90分钟。4.按权利要求3所述的分离富集山豆根中具异戊烯基黄酮部位的方法，其特征在于山豆根药材用95%乙醇提取。5.按权利要求f4之一所述的分离富集山豆根中具异戊烯基黄酮部位的方法，其特征在于:用40%-50%乙醇或80%-95%乙醇洗脱时，每个浓度冲洗8 10个保留体积。6.按权利要求f4之一所述的分离富集山豆根中具异戊烯基黄酮部位的方法，其特征在于:柱色谱分离过程中，先用50%乙醇洗...

【专利技术属性】
技术研发人员：颜继忠，李行诺，陈垚，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：