一种具有神经保护作用的异戊烯基化黄酮类化合物的制备方法及应用技术

本发明专利技术涉及具有神经保护作用的异戊烯基化黄酮类化合物的制备方法及应用，有效解决制备具有神经保护作用的异戊烯基化黄酮类化合物，实现制备防治神经退行性疾病的药物问题，小叶莲用乙醇加热回流提取，减压回收乙醇，混悬于蒸馏水中，用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，将乙酸乙酯萃取部位经硅胶柱色谱分离，用石油醚-丙酮梯度洗脱，收集260个流份，合并成16个组份；将组份Fr.2经凝胶柱色谱，甲醇洗脱，收集35个流份，合并得到的亚组份Fr.2-1经开放ODS柱色谱，用甲醇-水洗脱，收集洗脱液得桃儿七酮F、桃儿七酮C、桃儿七酮D、桃儿七酮G，本发明专利技术制备的桃儿七酮C、桃儿七酮D、桃儿七酮F、桃儿七酮G具有保护神经的作用。

【技术实现步骤摘要】
一种具有神经保护作用的异戊烯基化黄酮类化合物的制备方法及应用
本专利技术涉及医药，特别是一种具有神经保护作用的异戊烯基化黄酮类化合物的制备方法及应用。
技术介绍
神经退行性疾病是神经系统的严重疾病，是一种大脑或脊髓的细胞神经元丧失的疾病状态。主要包括阿尔茨海默病、亨廷顿式病、帕金森式病、肌萎缩性侧索硬化症、多发性硬化症、糖尿病性视网膜病、多发性脑梗塞性痴呆、黄斑变性等。伴随着人类老龄化时代的到来，神经退行性疾病尤其是阿尔茨海默病的发病率呈逐年上升的趋势，75岁以上的患病率为11.5％，85岁以上高于30％，对整个社会和家庭将造成沉重的负担。目前临床上使用的药物仅是减轻或改善神经退行性疾病的症状，目前尚未找到有效的方法对其进行彻底的治疗。中草药应用历史悠久，从中草药中寻找高效低毒的具有神经保护作用的活性物质，研制选择性强、毒副作用低的新型防治神经退行性疾病的药物是药学科研工作者迫切解决的首要问题。小叶莲是小檗科桃儿七属植物鬼臼Sinopodophyllumemodi(Wall.)Ying.的干燥成熟果实。鬼臼是一种具有悠久历史的药用植物，古代《神农本草经》中就有记载：杀大毒，疗咳嗽喉疾，风邪烦感，失魄妄见。不入汤。以后的历代本草亦多有记载，主要用于活血散结、祛风除湿、虫蛇咬伤、跌打、心胃痛、风寒咳嗽、月经不调、铁棒锤中毒、风湿筋骨痛及气管炎等症。鬼臼分布比较广泛，我国主要分布在四川、青海、西藏、甘肃、陕西。小叶莲作为传统藏药始载于《月王药诊》，具有悠久的药用历史。化学成分研究表明主要含有木脂素和黄酮类化合物，其中异戊烯基化黄酮是小叶莲中代表性的活性成分，具有重要而广泛的生物活性如抗氧化、抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗骨质疏松、预防老年痴呆、抗糖尿病、心脑血管保护、雌激素样等。本专利技术所涉及的异戊烯基化黄酮类化合物及其生物活性，迄今为止未见有专利或文献报道。
技术实现思路
针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本专利技术之目的就是提供一种具有神经保护作用的异戊烯基化黄酮类化合物的制备方法及应用，可有效解决制备具有神经保护作用的异戊烯基化黄酮类化合物，实现制备防治神经退行性疾病的药物问题。本专利技术解决的技术方案是，该类化合物是从小叶莲药材中分离得到的桃儿七酮C(SinoflavonoidC)、桃儿七酮D(SinoflavonoidD)、桃儿七酮F(SinoflavonoidF)、桃儿七酮G(SinoflavonoidG)，分子结构式分别为：其制备方法是，以小叶莲6–9kg为原料，以2–5倍原料重量、体积比为75％–95％的乙醇加热回流提取3次，提取温度为90–95℃，每次提取时间为1.5–2小时，减压回收乙醇，得浸膏状乙醇提取物，混悬于2–3.2L的蒸馏水中，依次以石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，每次2–3.2L，时间为1.5–2小时；将乙酸乙酯萃取部位经硅胶柱色谱分离，依次用体积比为100:0、100:5、100:7、100:10、100:30、100:50、100:70、100:100、100:200、0:100的石油醚-丙酮混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用9.1–13L洗脱液，流速为10–15mLmin-1，每350–500mL为一流份，收集260个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别以体积比1︰1的石油醚-丙酮和体积比5︰1的二氯甲烷-甲醇作为展开剂，以体积比10︰90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3–5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1–35、流份36–85、流份86–104、流份105–115、流份116–132、流份133–144、流份145–157、流份158–163、流份164–170、流份171–182、流份183–188、流份189–195、流份196–204、流份205–208、流份209–234、流份235–260，得到Fr.1-Fr.16个组份；将组份Fr.2经SephadexLH-20凝胶柱色谱，甲醇洗脱，每5–10mL为一流份，收集35个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，以体积比8︰1的二氯甲烷-丙酮作为展开剂，以体积比10︰90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3–5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份5–18、流份19–32、流份33–35，得到3个亚组份Fr.2-1，Fr.2-2，Fr.2-3；将亚组份Fr.2-1经开放ODS柱色谱，用体积比60︰40、体积比65︰35、体积比70︰30、体积比75︰25的甲醇-水作洗脱液进行梯度洗脱，收集体积比60︰40甲醇-水洗脱液得桃儿七酮F、收集体积比65︰35甲醇-水洗脱液得桃儿七酮C、收集体积比70︰30甲醇-水洗脱液得桃儿七酮D、收集体积比75︰25甲醇-水洗脱液得桃儿七酮G。本专利技术制备的具有神经保护作用的异戊烯基化黄酮类化合物桃儿七酮C、桃儿七酮D、桃儿七酮F、桃儿七酮G具有保护神经的作用，有效用于制备防治神经退行性疾病的药物，具有实际的临床意义，经济和社会效益显著。具体实施方式以下结合实施例对本专利技术的具体实施方式作详细说明。本专利技术在具体实施中可由以下实施例给出。实施例1本专利技术在具体实施中，具有神经保护作用的异戊烯基化黄酮类化合物可由小叶莲9kg为原料，以18L、体积比为95％的乙醇加热回流提取3次，提取温度为95℃，每次提取时间为1.5小时，减压回收乙醇，得浸膏状乙醇提取物，混悬于3.2L的蒸馏水中，依次以石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，每次3.2L，时间为1.5小时；将乙酸乙酯萃取部位经硅胶柱色谱分离，依次用体积比为100:0、100:5、100:7、100:10、100:30、100:50、100:70、100:100、100:200、0:100的石油醚-丙酮混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用13L洗脱液，流速为15mLmin-1，每500mL为一流份，收集260个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别以体积比1︰1的石油醚-丙酮和体积比5︰1的二氯甲烷-甲醇作为展开剂，以体积比10︰90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3–5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1–35、流份36–85、流份86–104、流份105–115、流份116–132、流份133–144、流份145–157、流份158–163、流份164–170、流份171–182、流份183–188、流份189–195、流份196–204、流份205–208、流份209–234、流份235–260，得到Fr.1-Fr.16个组份；将组份Fr.2经SephadexLH-20凝胶柱色谱，甲醇洗脱，每10mL为一流份，收集35个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，以体积比8︰1的二氯甲烷-丙酮作为展开剂，以体积比10︰90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3–5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份5–18、流份19–32、流份33–35，得到3个亚组份Fr.2-1，Fr.2-2，Fr.2-3；将亚组份Fr.2-1经开放ODS柱色谱，用体积比60︰40、体积比65︰35、体积比70︰30、体积比75︰本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种具有神经保护作用的异戊烯基化黄酮类化合物，其特征在于，该类化合物是从小叶莲药材中分离得到的桃儿七酮C、桃儿七酮D、桃儿七酮F、桃儿七酮G，分子结构式分别为：

【技术特征摘要】
1.一种具有神经保护作用的异戊烯基化黄酮类化合物，其特征在于，该类化合物是从小叶莲药材中分离得到的桃儿七酮C、桃儿七酮D、桃儿七酮F、桃儿七酮G，分子结构式分别为：。2.权利要求1所述的具有神经保护作用的异戊烯基化黄酮类化合物的制备方法，其特征在于，以小叶莲6–9kg为原料，以2–5L/kg原料重量、体积比为75％–95％的乙醇加热回流提取3次，提取温度为90–95℃，每次提取时间为1.5–2小时，减压回收乙醇，得浸膏状乙醇提取物，混悬于2–3.2L的蒸馏水中，依次以石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，每次2–3.2L，时间为1.5–2小时；将乙酸乙酯萃取部位经硅胶柱色谱分离，依次用体积比为100:0、100:5、100:7、100:10、100:30、100:50、100:70、100:100、100:200、0:100的石油醚-丙酮混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用9.1–13L洗脱液，流速为10–15mLmin-1，每350–500mL为一流份，收集260个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别以体积比1︰1的石油醚-丙酮和体积比5︰1的二氯甲烷-甲醇作为展开剂，以体积比10︰90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3–5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1–35、流份36–85、流份86–104、流份105–115、流份116–132、流份133–144、流份145–157、流份158–163、流份164–170、流份171–182、流份183–188、流份189–195、流份196–204、流份205–208、流份209–234、流份235–260，得到Fr.1-Fr.16个组份；将组份Fr.2经SephadexLH-20凝胶柱色谱，甲醇洗脱，每5–10mL为一流份，收集35个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，以体积比8︰1的二氯甲烷-丙酮作为展开剂，以体积比10︰90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3–5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份5–18、流份19–32、流份33–35，得到3个亚组份Fr.2-1，Fr.2-2，Fr.2-3；将亚组份Fr.2-1经开放ODS柱色谱，用体积比60︰40、体积比65︰35、体积比70︰30、体积比75︰25的甲醇-水作洗脱液进行梯度洗脱，收集体积比60︰40甲醇-水洗脱液得桃儿七酮F、收集体积比65︰35甲醇-水洗脱液得桃儿七酮C、收集体积比70︰30甲醇-水洗脱液得桃儿七酮D、收集体积比75︰25甲醇-水洗脱液得桃儿七酮G。3.根据权利要求2所述的具有神经保护作用的异戊烯基化黄酮类化合物的制备方法，其特征在于，小叶莲9kg为原料，以18L、体积比为95％的乙醇加热回流提取3次，提取温度为95℃，每次提取时间为1.5小时，减压回收乙醇，得浸膏状乙醇提取物，混悬于3.2L的蒸馏水中，依次以石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，每次3.2L，时间为1.5小时；将乙酸乙酯萃取部位经硅胶柱色谱分离，依次用体积比为100:0、100:5、100:7、100:10、100:30、100:50、100:70、100:100、100:200、0:100的石油醚-丙酮混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用13L洗脱液，流速为15mLmin-1，每500mL为一流份，收集260个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别以体积比1︰1的石油醚-丙酮和体积比5︰1的二氯甲烷-甲醇作为展开剂，以体积比10︰90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3–5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1–35、流份36–85、流份86–104、流份105–115、流份116–132、流份133–144、流份145–157、流份158–163、流份164–170、流份171–182、流份183–188、流份189–195、流份196–204、流份205–208、流份209–234、流份235–260，得到Fr.1-Fr.16个组份；将组份Fr.2经SephadexLH-20凝胶柱色谱，甲醇洗脱，每10mL为一流份，收集35个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，以体积比8︰1的二氯甲烷-丙酮作为展开剂，以体积比10︰90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3–5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份5–18、流份19–32、流份33–35，得到3个亚组份Fr.2-1，Fr.2-2，Fr.2-3；将亚组份Fr.2-1经开放ODS柱色谱，用体积比60︰40、体积比65︰35、体积比70︰30、体积比75︰25的甲醇-水作洗脱液进行梯度洗脱，收集体积比60︰40甲醇-水洗脱液得桃儿七酮F、收集体积比65︰35甲醇-水洗脱液得桃儿七酮C、收集体积比70︰30甲醇-水洗脱液得桃儿七酮D、收集体积比75︰25甲醇-水洗脱液得桃儿七酮G。4.根据权利要求2所述的具有神经保护作用的异戊烯基化黄酮类化合物的制备方法，其特征在于，以小叶莲6kg为原料，以18L、体积比为95％的乙醇加热回流提取3次，提取温度为95℃，每次提取时间为1.5小时，减压回收乙醇，得浸膏状乙醇提取物，混悬于3.2L的蒸馏水中，依次以石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，每次3.2L，时间为1.5小时；将乙酸乙酯萃取部位经硅胶柱色谱分离，依次用体积比为100:0、100:5、100:7、100:10、100:30、100:50、100:70、100:100、100:200、0:100的石油醚-丙酮混合溶剂进行梯度洗脱，每一梯度用9.1L洗脱液，流速为10mLmin-1，每350mL为一流份，收集260个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别以体积比1︰1的石油醚-丙酮和体积比5︰1的二氯甲烷-甲醇作为展开剂，以体积比10︰90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3–5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1–35、流份36–85、流份86–104...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙彦君，裴莉昕，张艳丽，徐学琴，王俊敏，高美玲，郝志友，纪宝玉，陈辉，
申请(专利权)人：河南中医学院，
类型：发明
国别省市：河南;41