一种免疫抑制剂体外诱导耐受性树突状细胞的方法技术

技术编号:8653076 阅读:246 留言:0更新日期:2013-05-01 19:19
本发明专利技术涉及一种免疫抑制剂体外诱导耐受性树突状细胞的方法。本发明专利技术还提供一种免疫抑制剂体外诱导制备得到的耐受性树突状细胞及其应用。本发明专利技术优点在于:本发明专利技术的一种免疫抑制剂体外诱导培养耐受性DC的方法,可以从外周血中获得高纯度免疫抑制功能强的耐受性DC,在液氮中长期保存,能够满足临床对耐受性DC细胞制品的需求,用于预防和治疗自身免疫性疾病、移植物抗宿主病、器官移植排斥。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种细胞体外诱导培养和保存方法,具体地说,是一种外周血来源的耐受性树突状细胞体外诱导培养和保存方法。
技术介绍
自身免疫病主要特征是缺乏对自身抗原的耐受从而诱导了损伤性的免疫反应导致组织损伤。自身免疫病主要的治疗方法是应用免疫抑制剂,采用免疫抑制剂会增加感染和肿瘤的风险。而细胞治疗是一种新颖的治疗手段。通过自体或异体的体细胞体外培养诱导,产生具有某种免疫耐受功能的细胞,输注到免疫病患者体内,抑制免疫系统对自身抗原的过度活化。细胞治疗安全性高,可以有针对地发挥作用,已经成为了一门新兴的热门学科。受体对MHC不匹配的移植物发生排斥反应是组织和细胞移植失败的主要原因。在目前临床实践中,传统免疫抑制药物的使用,虽能有效防止移植排斥,缓解由供者T细胞介导的急、慢性移植物抗宿主病,但常伴有受者整体免疫功能下降,感染机会增加和诱发肿瘤等副作用。因此,以诱导供受者之间移植免疫耐受为目的的细胞治疗方法日益受到重视。研究者发现,在体外IL-10、TGF-β条件下培养的树突状细胞与正常的未成熟树突状细胞(DC)相比表达更低的共刺激分子且不能被LPS等促成熟,在体外能诱导同种异体T细胞产生抗本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种免疫抑制剂体外诱导耐受性树突状细胞的方法,其特征在于,所述的免疫抑制剂为他克莫司。

【技术特征摘要】
1.一种免疫抑制剂体外诱导耐受性树突状细胞的方法,其特征在于,所述的免疫抑制剂为他克莫司。2.根据权利要求1所述的免疫抑制剂体外诱导耐受性树突状细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:a、用密度梯度离心法分离得到的人外周血单个核细胞用含ACD-A抗凝剂的PBS缓冲液洗涤细胞,培养皿中贴壁DC前体细胞,进一步在细胞因子作用下诱导DC细胞;b、在细胞因子诱导DC前体细胞向DC分化的过程中,培养皿中添加免疫抑制剂他克莫司诱导其分化为耐受性DC;C、将所述他克莫司诱导培养的耐受性DC做功能鉴定并保存于液氮中。3.根据权利要求2所述的免疫抑制剂体外诱导耐受性树突状细胞的方法,其特征在于,所述的步骤a中洗涤细胞的缓冲液为含体积百分数为1.6%的ACD-A抗凝剂的PBS。4.根据权利要求2所述的免疫抑制剂体外诱导耐受性树突状细胞的方法,其特征在于,所述的步骤a中得到的外周血单个核细胞用含自体灭活血浆的1640培养液培养,所述的自体灭活血浆为和培养诱导的细胞同源的 血浆。5.根据权利要求2所述的免疫抑制剂体外诱导耐受性树突状细胞的方法,其特征在于,所述的步骤a中采...

【专利技术属性】
技术研发人员:任亚娜范华骅谢如锋杨洁刘李栋杨懿铭
申请(专利权)人:上海市血液中心
类型:发明
国别省市:

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