间充质干细胞与肿瘤细胞的共培养体系建立及肿瘤微环境中间充质干细胞遗传稳定性变化特征制造技术

技术编号:8653077 阅读:266 留言:0更新日期:2013-05-01 19:19
本发明专利技术公开了间充质干细胞与肿瘤细胞的共培养体系,是采用具有PET膜的Transwell悬挂式培养小室结合6孔板进行非接触共培养,取对数生长期的细胞用0.25﹪胰蛋白酶消化制成单细胞悬液,计数、调整细胞密度后接种,并提供了该共培养体系的建立方法、应用及遗传稳定性的特征变化。本发明专利技术的有益效果为:本发明专利技术提供的间充质干细胞与肿瘤细胞的共培养体系,能够观察了肿瘤微环境对MSC遗传稳定性的影响,将为进一步深入探讨肿瘤微环境中MSCs生物学性状变化及其临床应用提供技术支撑及其研究依据。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及间充质干细胞与肿瘤细胞的共培养体系及其制备方法和应用;肿瘤微环境中间充质干细胞遗传稳定性变化特征。
技术介绍
由于间充质干细胞(marrow mesenchymalstem cell, MSC)尤其是骨髓间充质干细胞(MSC)易于体外分离、扩增,具有良好的多向分化潜能,能提高组织再生修复能力,导入外源基因,肿瘤趋向性和低免疫源性等优良特征而被认为是可用于临床细胞学治疗的最佳干细胞之一。在骨科、心脏病学、血管外科、肿瘤治疗等领域都取得了显著性进展,同时也已成为理想克隆载体转染治疗基因,靶向性治疗肿瘤等。但近期研究表明,干细胞生存的微环境成分及信号通路的改变可能会导致正常的干细胞(包括MSCs)向恶性肿瘤细胞转化,并且对多种肿瘤的发生发展具有促进作用。因而MSCs在临床应用中的安全性问题日渐突出。
技术实现思路
本专利技术的目的就是针对上述现有技术中的缺陷,提供了快速建立的间充质干细胞与肿瘤细胞的共培养体系。为了实现上述目的,本专利技术提供的技术方案为:间充质干细胞与肿瘤细胞的共培养体系,是采用具有PET膜的Transwell悬挂式培养小室结合6孔板进行非接触共培养,取对数生本文档来自技高网...

【技术保护点】
间充质干细胞与肿瘤细胞的共培养体系,其特征在于,是采用具有PET膜的Transwell悬挂式培养小室结合6孔板进行非接触共培养,取对数生长期的细胞用0.25﹪胰蛋白酶消化制成单细胞悬液,计数、调整细胞密度后接种,其中,3天:间充质干细胞5×104?/孔,A549?1×105?/孔;7天:间充质干细胞2×104?/孔,A549?4×104?/孔。

【技术特征摘要】
1.间充质干细胞与肿瘤细胞的共培养体系,其特征在于,是采用具有PET膜的Transwell悬挂式培养小室结合6孔板进行非接触共培养,取对数生长期的细胞用0.25%胰蛋白酶消化制成单细胞悬液,计数、调整细胞密度后接种,其中,3天:间充质干细胞5X104/孔,A549 1 X 105/孔;7 天:间充质干细胞 2X 104/孔,A549 4X 104 /孔。2.根据权利要求1所述的间充质干细胞与肿瘤细胞的共培养体系,其特征在于,所述间充质干细胞为骨髓间充质干细胞;所述肿瘤细胞为人体肺腺癌上皮细胞系A549细胞。3.间充质干细胞与肿瘤细胞的共培养体系的建立方法,其特征在于,是将人体肺腺癌上皮细胞系A549细胞接种于Transwell悬挂式培养小室的下室,将Transwell悬挂式培养小室的上室置于孔中,在Transwell悬挂式培养小室内接种间充质干细胞,然后将Transwell悬挂式培养 小室的上下室的培养液相互通融,得到间充质干细胞与肿瘤细胞的共培养体系。4.根据权利要求3所述的 间充质干细胞与肿瘤细胞的共培养体系的建立方法,其特征在于,所述共培养体系的培养时间为3天、7天,37°C、饱和湿度、5%C02孵箱培养。5.间充质干...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘永琦李金田张月梅舍雅莉张毅李屹秦洁王倩
申请(专利权)人:甘肃中医学院
类型:发明
国别省市:

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