【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种抑制胰腺癌干细胞干性特征的方法。
技术介绍
现有的科学研究中，经常需要进行抑制胰腺癌干细胞干性特征，但现有的方法在操作方便性、成本、效果等方面存在不理想之处。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种操作方便，效果好的miR_200a抑制胰腺癌干细胞干性特征的方法。本专利技术的技术解决方案是:一种，其特征是:包括下列步骤:A)人胰腺癌细胞系PANC-1培养以含10%胎牛血清(FBS)的DMEM培养液为培养基，在37°C、5% CO2饱和湿度条件下培养人胰腺癌细胞系PANC-1，每2-3天传代一次，每传代一次用0.25%胰蛋白酶消化；B)流式细胞仪检测和分选胰腺癌干细胞( I)将PANC-1癌细胞消化成单细胞悬液细胞生长达对数生长期后，吸去培养液，PBS洗I遍，加入0.25%胰蛋白酶，37°C消化5min ;待细胞变圆，加入含血清的完全培养基(即含10%胎牛血清的DMEM培养液)，吸管吹打数次；移入无菌离心管，IOOOr / min离心5min，PBS液重悬细胞，血球计数板计数；(2)抗体孵育每IXlO6个细胞分别加入20 μ I PE标记的抗人...
【技术保护点】
一种miR?200a抑制胰腺癌干细胞干性特征的方法，其特征是：包括下列步骤：A）人胰腺癌细胞系PANC?l培养以含10?％胎牛血清的DMEM培养液为培养基，在37?℃、5％?CO2饱和湿度条件下培养人胰腺癌细胞系PANC?l，每2?3天传代一次，每传代一次用?0.25?％胰蛋白酶消化；B）流式细胞仪检测和分选胰腺癌干细胞（1）将PANC?1癌细胞消化成单细胞悬液细胞生长达对数生长期后，吸去培养液，PBS洗1遍，加入0.25?％胰蛋白酶，37℃?消化5?min；待细胞变圆，加入含血清的完全培养基，吸管吹打数次；移入无菌离心管，1000?r／min离心5?min，PBS液重悬细...
【技术特征摘要】
1.一种miR-200a抑制胰腺癌干细胞干性特征的方法，其特征是:包括下列步骤: A)人胰腺癌细胞系PANC-1培养 以含10 %胎牛血清的DMEM培养液为培养基，在37 °C>5% CO2饱和湿度条件下培养人胰腺癌细胞系PANC-1，每2-3天传代一次，每传代一次用0.25 %胰蛋白酶消化； B)流式细胞仪检测和分选胰腺癌干细胞 (1)将PANC-1癌细胞消化成单细胞悬液 细胞生长达对数生长期后，吸去培养液，PBS洗I遍，加入0.25 %胰蛋白酶，37°C消化·5 min ;待细胞变圆，加入含血清的完全培养基，吸管吹打数次；移入无菌离心管，1000 r /min离心5 min, PBS液重悬细胞,血球计数板计数； (2)抗体孵育 每I X IO6个细胞分别加入20 μ I PE标记的抗人⑶24、APC标记的抗人⑶44和FITC标记的抗人ESA，稀释度均为1:40，冰浴30 min, PB...
【专利技术属性】
技术研发人员：陆玉华，王志伟，朱铭岩，陆晶晶，李晓红，朱慧，范向军，朱沙俊，王雷，鞠少卿，吴信华，
申请(专利权)人：南通大学附属医院，
类型：发明
国别省市：
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