一种从疾病动物模型外周血中快速提取循环的非血缘性有核细胞的组合物和试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种从疾病动物模型外周血中快速提取循环的非血缘性有核细胞的组合物和试剂盒及其应用。本发明专利技术用于从疾病动物模型(包括肿瘤动物模型，心血管疾病动物模型等)的哺乳类动物血液中快速获取循环的非血缘性有核稀有细胞的组合物，由下述成份组成：缓冲液，包被了抗血缘性有核细胞表面标识物抗体的磁性或非磁性免疫微球，以及一定密度的细胞分离介质。相对目前市场上通用的商品化离心介质，本发明专利技术的新的组合物的使用可极大地缩短离心时间，并将细胞回收率从原有的60±20％稳定地提高到95％以上。该方法不需裂解融破红细胞，从而高效快速地从疾病动物模型中富集提取外周血中的非血缘性循环稀有细胞。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术主要涉及一种从疾病动物模型外周血中快速提取循环的非血缘性有核细胞的组合物及试剂盒，以及该组合物或试剂盒在用于新药研发、寻找新的生物标示物如肿瘤标示物等基于疾病动物模型的生物医学实验、手动或借助于自动化检测仪器设备的操作中的应用。
技术介绍
提取并检测外周血中的循环的非血缘性有核细胞(如血管内皮细胞,肿瘤上皮细胞)的巨大临床意义早已被人们所证实。目前常用的提取循环的非血缘性有核细胞的方法是利用抗体与这些细胞表面的特殊标识物相结合从而达到直接捕获的目的。然而这种直接 捕获的技术手段敏感性低，重复性差，且因表面标识物对于不同种类的细胞表达量差异极大，从而不能作为一种提取血液样品中的非血缘性有核细胞的通用手段。近来大量的科研与临床实验已证明通过去除血中的血缘性有核细胞(如白细胞等)从而达到富集提取血中的非血缘性有核细胞是最为有效的手段。虽然此手段过程中涉及的某些单一方法已经有所报道，如免疫磁性颗粒法去除白细胞，血型糖蛋白-A(glycophorinA)交联法去除红细胞，以及必须借助特殊细胞分离器械的免疫磁性颗粒与密度离心结合的初步尝试等，但这些方法耗时长，白细胞去除率低，靶细胞回本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于从疾病动物模型的哺乳类动物血液中快速获取循环的非血缘性有核稀有细胞的组合物，由下述成份组成：缓冲液，包被了抗血缘性有核细胞表面标识物抗体的磁性或非磁性免疫微球或免疫颗粒，以及细胞分离介质，其中，所述缓冲液的渗透压介于260～320mOsm/kg?H2O、pH为6.8～7.8，所述细胞分离介质在20℃下的比重为1.072～1.076克/毫升，所述细胞分离介质包含选自下列试剂中的任意一种或任意两种以上的成份：聚乙烯吡咯烷酮包被的胶质二氧化硅，多聚糖和泛影酸钠或其衍生物，一种含糖的溶液，由蔗糖和表氯醇聚合而成的非离子聚合物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：卢焕梅，
申请(专利权)人：卢焕梅，
类型：发明
国别省市：