一种冠心舒的生物酶解提取方法技术

本发明专利技术公开了一种冠心舒的生物酶解提取方法，该方法以猪十二指肠为主要原料，通过生物酶解从中提取冠心舒。所述冠心舒的提取须经过：猪十二指肠→绞碎→配水→提取→酶解→灭酶→粗滤→脱脂→纳滤→沉淀→干燥。本发明专利技术方法生产周期短、成本低、不产生任何有毒有害物质，而且所得产品安全性高，是制备冠心舒药品的必须原料。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及冠心舒的提取方法，具体涉及生物酶解提取冠心舒的方法。
技术介绍
冠心舒是存在于猪十二指肠中的一种酸性粘多糖类药物，它分子量较低，属于类肝素物质。它的化学成分含有氨基葡萄糖、葡萄糖醛酸、N-乙酰氨基半乳糖和葡萄糖等。临床观察表明，冠心舒可治疗冠心病，可改善病人的心绞痛、胸闷、心悸、气急等症状，并使心电图有所改善，对血脂、血压无明显影响，无毒性，副作用小。药物作用平缓，疗效随着疗程的增加而提高，宜长期服用。现有提取冠心舒的方法包括专提取液制备、减压浓缩、除去蛋白质、脱脂、乙醇沉淀、脱水、干燥等步骤，其中脱脂为汽油脱脂，过滤采用纱布过滤，除去蛋白质采用苯酚和氢氧化钠，如专利技术专利号CN99111448.5专利技术方法由水解、收集滤液进行减压浓缩、除去蛋白质、脱脂、乙醇沉淀、脱水、干燥等步骤组成。其采用汽油脱脂、简单用纱布过滤的原始方法，生产周期长，达到130个小时。上述方法资源浪费大，生产周期长，环境污染和安全隐患大。本专利技术是提供一种无需汽油等危险材料脱脂来提取，直接利用生物酶解和机械脱脂提取冠心舒的一种方法。采用机械脱脂，代替了汽油，方便快捷，节省了能源，同时，生物酶解代替自然沉淀，缩短生产周期。本专利技术的目的是提供一种冠心舒的提取方法。为了实现上述专利技术目的，本专利技术所提供的冠心舒的生物酶解提取方法包括以下步骤: (1)将猪的十二指肠去掉脂肪，洗净后绞碎，制得肠浆； (2)向肠浆中加入3-4倍于十二指肠重量的纯水，调PH值至2.4-3.0，搅拌提取9_11小时，静置后将上层的提取液和下层的沉淀分离； (3)调提取液的PH值至7.8-8.5，将提取液升温至50-55°C，然后加入十二指肠重量的1%-2%的复合蛋白酶，在该温度和搅拌条件下酶解6-8小时，制得酶解液； (4)加热酶解液至温度90-95°C进行灭酶，然后过滤得到滤液； (5)脱除滤液中的脂肪，得到去脂液； (6)浓缩去脂液，制得浓缩液； (7)向浓缩液中加入乙醇，使含醇量达到65-70%，搅拌均匀后静置，分离出沉淀物并用丙酮对其脱水，干燥脱水后的产物即得冠心舒。为了提高原料的利用率，肠浆经步骤(2)进行一次提取制得提取液后，再向步骤(2)产生的沉淀中加入3-4倍于十二指肠重量的纯水，按步骤(2)所述方法再提取一遍；合并2次提取液用于步骤(3)。为了过滤效率的提高和使杂质去除的彻底，所述将步骤(4)中的过滤通过孔径为 0.2-0.5um的微孔过滤机实现。为了节约能源，所述步骤(5)中脂肪的脱除通过机械方式进行，为提高脂肪的脱除率和脱除速度，脂肪的脱除通过分离筒转速为16000-16300r/min的管式离心机实现。所述步骤(6)中的浓缩通过孔径为Inm的纳滤机实现。所述步骤(7)中的干燥为在温度60_90°C条件下进行的真空干燥。本专利技术步骤(2 )中所述PH值的调节，采用盐酸进行调节；步骤(3 )中所述PH值的调节采用浓度为40%的氢氧化钠溶液进行。本专利技术所用设备均为市售产品，其结构和使用方式皆为公知技术。本专利技术所述的复合蛋白酶选用丹麦诺维信公司生产的诺维信复合蛋白酶。本专利技术有以下优点:环境污染小和安全隐患少；采用机械脱脂，代替了原始的汽油脱脂，节省了能源；通过酶解工艺把蛋白质酶解成氨基酸，使去除杂蛋白更方便，代替了原始工艺的自然沉淀方法，大大节省了生产时间，提高了生产效率。具体实施例方式实施例1 (I)称取猪的十二指肠lKg，剪去脂肪，洗净后，用绞肉机绞碎，制得肠浆；(2)向肠浆中加入4Kg纯水，用盐酸调PH值至2.4，搅拌提取9小时，静置后将上层的提取液和下层的沉淀分离；向下层的沉淀中加入4Kg纯水，用盐酸调PH值至2.4，搅拌提取10小时，静置后将上层的提取液和下层的沉淀分离，再次得到提取液，合并两次提取的提取液；(3)用浓度为40%的氢氧化钠溶液调节步骤(2)制得的提取液的PH值至7.8，将提取液升温至50°C，然后加入IOg复合蛋白酶，在该温度和搅拌条件下酶解8小时，制得酶解液；(4)加热酶解液至温度90°C，并保持该温度条件15min进行灭酶，灭酶后用孔径为0.2um的微孔过滤机过滤，除去杂质得到滤液；(5)用管式离心机脱除滤液中的脂肪，脱脂过程中分离筒转速保持为16000r/min，脱脂后得到去脂液；(6)用孔径为Inm的纳滤机对去脂液进行浓缩，制得浓缩液；(7)向浓缩液中加入浓度为95%的工业乙醇，使浓缩液的含醇量达到65%，搅拌均匀后静置12小时，将上层的液体和下层的沉淀物分离，上层的液体供回收酒精用，向沉淀物中加入5倍于其重量的丙酮，对沉淀物进行脱水8小时，过滤后得到滤饼即脱水后的产物，将滤饼在温度60°C条件下真空干燥后，即得产品冠心舒。实施例2 (I)称取猪的十二指肠2Kg，剪去脂肪，洗净后，用绞肉机绞碎，制得肠浆；(2)向肠浆中加入7Kg纯水，用盐酸调PH值至2.8，搅拌提取10小时，静置后将上层的提取液和下层的沉淀分离；向下层的沉淀中加入7Kg纯水，用盐酸调PH值至2.8，搅拌提取11小时，静置后将上层的提取液和下层的沉淀分离，再次得到提取液，合并两次提取的提取液；(3)用浓度为40%的氢氧化钠溶液调节步骤(2)制得的提取液的PH值至8.0，将提取液升温至52°C，然后加入30g复合蛋白酶，在该温度和搅拌条件下酶解6小时，制得酶解液；(4)加热酶解液至温度92°C，并保持该温度条件13min进行灭酶，灭酶后用孔径为0.3um的微孔过滤机过滤，除去杂质得到滤液；(5)用管式离心机脱除滤液中的脂肪，脱脂过程中分离筒转速保持为16100r/min，脱脂后得到去脂液；(6)用孔径为Inm的纳滤机对去脂液进行浓缩，制得浓缩液；(7)向浓缩液中加入浓度为95%的工业乙醇，使浓缩液的含醇量达到68%，搅拌均匀后静置12小时，将上层的液体和下层的沉淀物分离，上层的液体供回收酒精用，向沉淀物中加入5倍于其重量的丙酮，对沉淀物进行脱水8小时，过滤后得到滤饼即脱水后的产物，将滤饼在温度70°C条件下真空干燥后，即得产品冠心舒。实施例3 (I)称取猪的十二指肠10Kg，剪去脂肪，洗净后，用绞肉机绞碎，制得肠浆；(2)向肠浆中加入30Kg纯水，用盐酸调PH值至3.0，搅拌提取11小时，静置后将上层的提取液和下层的沉淀分离；向下层的沉淀中加入30Kg纯水，用盐酸调PH值至3.0，搅拌提取9小时，静置后将上层的提取液和下层的沉淀分离，再次得到提取液，合并两次提取的提取液；(3)用浓度为40%的氢氧化钠溶液调节步骤(2)制得的提取液的PH值至8.5，将提取液升温至55 °C，然后加入200g复合蛋白酶，在该温度和搅拌条件下酶解7小时，制得酶解液；(4)加热酶解液至温度95°C，并保持该温度条件IOmin进行灭酶，灭酶后用孔径为0.4um的微孔过滤机过滤，除去杂质得到滤液；(5)用管式离心机脱除滤液中的脂肪，脱脂过程中分离筒转速保持为16300r/min，脱脂后得 到去脂液；(6)用孔径为Inm的纳滤机对去脂液进行浓缩，制得浓缩液；(7)向浓缩液中加入浓度为95%的工业乙醇，使浓缩液的含醇量达到65%，搅拌均匀后静置12小时，将上层的液体和下层的沉淀物分离，上层的液体供回收酒精用，向沉淀物中加入5倍于其重量的丙酮本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种冠心舒的生物酶解提取方法，其特征在于包括以下步骤：（1）将猪的十二指肠去掉脂肪，洗净后绞碎，制得肠浆；（2）向肠浆中加入3?4倍于十二指肠重量的纯水，调PH值至2.4?3.0，搅拌提取9?11小时，静置后将上层的提取液和下层的沉淀分离；（3）调提取液的PH值至7.8?8.5，将提取液升温至50?55℃，然后加入十二指肠重量的1%?2%的复合蛋白酶，在该温度和搅拌条件下酶解?6?8小时，制得酶解液；（4）加热酶解液至温度90?95℃进行灭酶，然后过滤得到滤液；（5）脱除滤液中的脂肪，得到去脂液；（6）浓缩去脂液，制得浓缩液；（7）向浓缩液中加入乙醇，使含醇量达到65?70%，搅拌均匀后静置，分离出沉淀物并用丙酮对其脱水，干燥脱水后的产物即得冠心舒。

【技术特征摘要】
1.一种冠心舒的生物酶解提取方法，其特征在于包括以下步骤: (1)将猪的十二指肠去掉脂肪，洗净后绞碎，制得肠浆； (2)向肠浆中加入3-4倍于十二指肠重量的纯水，调PH值至2.4-3.0，搅拌提取小时，静置后将上层的提取液和下层的沉淀分离； (3)调提取液的PH值至7.8-8.5，将提取液升温至50-55°C，然后加入十二指肠重量的1%-2%的复合蛋白酶，在该温度和搅拌条件下酶解_^小时，制得酶解液； (4)加热酶解液至温度90-95°C进行灭酶，然后过滤得到滤液； (5)脱除滤液中的脂肪，得到去脂液； (6)浓缩去脂液，制得浓缩液； (7)向浓缩液中加入乙醇，使含醇量达到65-70%，搅拌均匀后静置，分离出沉淀物并用丙酮对其脱水，干燥脱水后的产物即得冠心...

【专利技术属性】
技术研发人员：张晓东，
申请(专利权)人：得利斯集团有限公司，
类型：发明
国别省市：