用于检测感染性眼病致病微生物的试剂盒及检测方法技术

一种感染性眼病常见致病微生物的检测试剂盒及检测方法。试剂盒由DNA扩增试剂、通用引物组合、阳性对照核酸和灭菌蒸馏水组成；其中DNA扩增试剂是一种无需提取样本的DNA而直接进行扩增的预混试剂及相应DNA聚合酶混合液；通用引物组合是针对感染性眼病几种常见致病微生物细菌、真菌、I型单纯疱疹病毒和棘阿米巴原虫各自的保守序列设计并合成的通用正向及反向引物等量混合液。本发明专利技术所采用的引物在各致病原种类内是通用的，针对其他病原又是特异的，直接的PCR反应体系和程序也很高效；本发明专利技术省去了模板DNA提取步骤，保证了有限临床样本的最大利用度；同时也使得检测的时间大大缩短，对临床病变的早期诊断可以起到很好的辅助作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于感染性眼病致病微生物的快速检测
，具体涉及一种，即通过直接PCR方法检测感染性眼病常见致病细菌、真菌、I型单纯疱疹病毒和棘阿米巴原虫的特异性DNA的试剂盒及检测方法。
技术介绍
感染性眼病是眼部最常见的多发病，包括角膜炎、结膜炎和眼内炎等，引起眼部病变微生物主要有细菌、真菌、病毒和棘阿米巴原虫。角膜炎和眼内炎患者一旦诊治不及时就有致盲的危险，只有早期及时确诊是由哪种病原微生物感染所致，才能更好的指导后续治疗中的合理用药以及选择合适的手术时机。因此感染性眼病致病微生物的早期诊断对防盲、治盲意义重大。由细菌感染引起的眼部炎症是最广泛的，其致病菌主要有葡萄球菌(表葡萄、金葡萄)、肺炎球菌和铜绿假单胞菌。真菌引起的眼部感染是目前我国最常见的致盲性眼病之一，调查发现镰刀菌属、曲霉菌属和链格孢菌属为最常见的真菌性角膜炎致病菌。引起角膜感染的常见病毒主要是I型单纯疱疹病毒。棘阿米巴原虫也主要引起角膜感染，随着角膜接触镜的佩戴，其发病率也在上升。目前临床上对以上病原微生物引起的眼部感染尚无快速有效的早期诊断方法。病毒性感染主要依赖于观察病症特点及询问有无反复发作史或免疫印记来进本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于检测感染性眼病致病微生物的试剂盒，所述的试剂盒包括如下的组分：1）DNA扩增试剂：为2ХPCR预混试剂及DNA聚合酶混合液；2）引物混合液：包括有用于细菌、真菌、I型单疱病毒和棘阿米巴原虫检测的引物对，其信息如下：细菌正向引物的核苷酸序列为?SEQ?ID?NO:1、细菌反向引物的核苷酸序列为?SEQ?ID?NO:2、真菌正向引物的核苷酸序列为?SEQ?ID?NO:3、真菌反向引物的核苷酸序列为?SEQ?ID?NO:4、I型单疱病毒正向引物的核苷酸序列为??SEQ?ID?NO:5、I型单疱病毒反向引物的核苷酸序列为?SEQ?ID?NO:6、棘阿米巴正向引物的核苷酸序列为?SEQ?ID?NO:...

【技术特征摘要】
1.用于检测感染性眼病致病微生物的试剂盒，所述的试剂盒包括如下的组分 1)DNA扩增试剂 为2XPCR预混试剂及DNA聚合酶混合液； 2)引物混合液: 包括有用于细菌、真菌、I型单疱病毒和棘阿米巴原虫检测的引物对，其信息如下 细菌正向引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:1、 细菌反向引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:2、 真菌正向引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:3、 真菌反向引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:4, I型单疱病毒正向引物的核苷酸序列为SEQ ID N0:5、 I型单疱病毒反向引物的核苷酸序列为SEQ ID N0:6、 棘阿米巴正向引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:7、 棘阿米巴反向引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:8 ； 3)灭菌蒸馏水。2.如权利要求1所述的试剂盒，还包括有阳性对照核酸 阳性对照核酸分别为含有细菌、真菌、I型单纯疱疹病毒和棘阿米巴正反向引物扩增的目的片段的质粒，其中细菌扩增的目的片段的序列为SEQ ID N0:9 ;真菌扩增的目的片段的序列为SEQ ID NO: 10 ;1型单纯疱疹病毒扩增的目的片段的序列为SEQ ID NO: 11;棘阿米巴扩增的目的片段的序列为SEQ ID NO: 12。3.权利要求1或2所述的试剂盒的使用方法，包括如下步骤 (1)临床样本的...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵格，孙士营，翟华蕾，袁青，谢立信，
申请(专利权)人：山东省眼科研究所，
类型：发明
国别省市：