一种检测牛白血病病毒前DNA的试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种检测牛白血病病毒（BLV）前DNA的试剂盒，所述试剂盒含有：a）荧光PCR反应液，b）荧光探针，c）热启动Taq酶，d）标准阳性模板，e）阴性对照，所述荧光PCR反应液中含有上、下游引物，其中上游引物的序列如SEQ?ID?NO：2所示，下游引物的序列如SEQ?ID?NO：3所示，所述荧光探针的序列如SEQ?ID?NO：4所示，所述探针的序列5’端设计有荧光物质，3’端设计有淬灭物质，所述标准阳性模板的核苷酸插入序列如SEQ?IDNO：5所示。本发明专利技术还提供一种该试剂盒在检测全血中牛白血病病毒前DNA中的应用。本发明专利技术的PCR检测试剂盒可以快速准确地检测牛白血病病毒，适用于BLV快速诊断、流行病学调查和风险评估。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物检测领域，具体涉及一种检测牛白血病病毒前DNA的试剂盒及其应用。
技术介绍
流行性牛白血病是由牛白血病病毒(Bovine leukemiavirus, BLV)引起的牛的一种慢性肿瘤性疾病。其特征为淋巴样细胞恶性增生,进行性恶病质和发病后的高死亡率。目前此病几乎遍及全世界各养牛国家，在我国于1976年首次发现于安徽合肥，继而在各省市相继发生。近年来，我国牛群该病血清阳性率逐年攀升，已从4%左右升高至30% 50%。无公害食品奶牛饲养兽医防疫准则(NY 5047 - 2001)和无公害食品肉牛饲养防疫准则(NY5126-2002)均明确规定，一旦牛场发生牛白血病，一定要及时施行淘汰净化措施。另据文献报道，虽然该病的公共卫生学意义还未有定论，但从统计学意义上讲，感染BLV病毒能增加人罹患乳腺癌的可能性，亟需开展对该病的深入研究和调查。虽然该病已在世界范围内传播,但目前还没有能有效控制或治疗该病的疫苗或方法，因而尽早诊断、及时淘汰病牛便显得尤为重要。现有的诊断方法对于群内BLV感染的普查通常是基于血清学试验如琼脂扩散试验、酶联免疫吸附试验等，血清学试验虽然可以估计BLV本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测牛白血病病毒前DNA的试剂盒，所述试剂盒含有：a）荧光PCR反应液，b）荧光探针，c）热启动Taq酶，d）标准阳性模板，e）阴性对照，其特征在于，所述荧光PCR反应液中含有上、下游引物，其中上游引物的序列如SEQ?ID?NO：2所示，下游引物的序列如SEQ?ID?NO：3所示，所述荧光探针的序列如SEQ?ID?NO：4所示，所述荧光探针的序列5’端设计有荧光物质，3’端设计有淬灭物质，所述标准阳性模板的核苷酸插入序列如SEQID?NO：5所示。

【技术特征摘要】
1.一种检测牛白血病病毒前DNA的试剂盒，所述试剂盒含有a)荧光PCR反应液，b) 荧光探针，c)热启动Taq酶，d)标准阳性模板，e)阴性对照，其特征在于，所述荧光PCR反应液中含有上、下游引物，其中上游引物的序列如SEQ ID NO :2所示，下游引物的序列如SEQ ID NO 3所示,所述突光探针的序列如SEQ ID NO 4所示,所述突光探针的序列5’端设计有荧光物质，3’端设计有淬灭物质，所述标准阳性模板的核苷酸插入序列如SEQID NO 5所/Jn ο2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，检测时所述上、下游引物单条的终浓度为 O. 05-1 μ Mo3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述荧光PCR反应液中还含有Mg2+，检测时所述Mg2+的终浓度为1. 5-5. OmM。4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述荧光PCR反应液中还含有四种 dNTPs，检测时所述各种dNTPs的终浓度为O. 1-lmM。5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，检测时所述荧光探针的...

【专利技术属性】
技术研发人员：李凯航，鞠厚斌，刘佩红，周锦萍，王建，陈冈，
申请(专利权)人：上海市动物疫病预防控制中心，
类型：发明
国别省市：