获得定向突变基因的方法和基于其发现的酸性β-1,3-1,4-葡聚糖酶技术

本发明专利技术公开了一种获得定向突变基因的方法和基于其发现的β-1，3-1，4-葡聚糖酶。本发明专利技术提供的蛋白质，是如下(a)或(b)：(a)将序列1自N末端第19至314位氨基酸残基组成的蛋白质进行定点突变得到的蛋白质；(b)将序列1所示的蛋白质进行定点突变得到的蛋白质；所述(a)或(b)中，所述定点突变为如下三个突变中的至少一个：(I)将序列表的序列1自N末端第74位氨基酸残基由D突变为G；(II)将序列表的序列1自N末端第239位氨基酸残基由D突变为G；(III)将序列表的序列1自N末端第281位氨基酸残基由C突变为S。本发明专利技术为β-葡聚糖酶的蛋白质工程改造提供了重要方法，也为酸性β-葡聚糖酶的工业应用提供了重要基因资源。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种获得定向突变基因的方法和基于其发现的酸性￠-1,3-1,4-葡聚糖酶。
技术介绍
^ -葡聚糖是由葡萄糖通过P -糖苷键聚合在一起形成的高分子聚合多糖，是自然界中含量最丰富的聚糖。￠-1,3-1,4-葡聚糖是自然合成的多聚糖，与阿拉伯木聚糖、戊聚糖、纤维素、果胶等均属高等植物(尤其是禾本植物)细胞壁中的结构性非淀粉多糖。从结构上看，它主要由葡萄糖残基通过￠-1,3和(或)￠-1,4糖苷键连接而成。￠-1,3-1，4_葡聚糖是由葡萄糖以P构型通过￠-1,3-和￠-1,4-混合键形成的直链聚糖。葡聚糖酶是一类能降解谷物中￠-葡聚糖的水解酶类的总称。包括内切和外切￠-1,3 葡聚糖酶(EC 3. 2.1. 39 ；EC 3.2.1.58)、P _1，3 (4)-葡聚糖酶(EC 3. 2.1. 6)、内切和外切 3-1，4_ 葡聚糖酶(EC 3. 2.1. 4 ；EC 3. 2.1. 74) (Boyce et al. Applied Microbiologyand Biotechnology，2007，76 :835-841 ;McCarthy et al.1ntern本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蛋白质，是如下(a)或(b)：(a)将序列表中序列1自N末端第19至314位氨基酸残基组成的蛋白质进行定点突变得到的蛋白质；(b)将序列表中序列1所示的蛋白质进行定点突变得到的蛋白质；所述(a)或(b)中，所述定点突变为如下三个突变中的至少一个：(I)将序列表的序列1自N末端第74位氨基酸残基由D突变为G；(II)将序列表的序列1自N末端第239位氨基酸残基由D突变为G；(III)将序列表的序列1自N末端第281位氨基酸残基由C突变为S。

【技术特征摘要】
1.一种蛋白质，是如下(a)或(b)(a)将序列表中序列I自N末端第19至314位氣基酸残基组成的蛋白质进行定点突变得到的蛋白质；(b)将序列表中序列I所示的蛋白质进行定点突变得到的蛋白质；所述(a)或(b)中，所述定点突变为如下三个突变中的至少一个(I)将序列表的序列I自N末端第74位氨基酸残基由D突变为G；(II)将序列表的序列I自N末端第239位氨基酸残基由D突变为G；(III)将序列表的序列I自N末端第281位氨基酸残基由C突变为S。2.如权利要求1所述的蛋白质，其特征在于所述蛋白质为如下(I)至(8)中任一所述的蛋白质(I)序列表中序列3自N末端第19至314位氨基酸残基组成的蛋白质；(2)序列表中序列3(3)序列表中序列5(4)序列表中序列5(5)序列表中序列9(6)序列表中序列9(7)序列表中序列7(8)序列表中序列7所不的蛋白质；自N末端第19至所不的蛋白质；自N末端第19至所不的蛋白质；自N末端第19至所示的蛋白质。314位氨基酸残基组成的蛋白质； 314位氨基酸残基组成的蛋白质； 314位氨基酸残基组成的蛋白质；3.编码权利要求1或2所述蛋白的基因。4.如权利要求3所述的基因，其特征在于所述基因是如下①至⑧中任一所述的DNA 分子①序列表的序列4自5’末端第55至942位核苷酸所示的DNA分子；②序列表中序列4所示的DNA分子；③序列表的序列6自5’末端第55至942位核苷酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：江正强，贾会勇，闫巧娟，李一男，陈洲，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：