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一种热稳定性提高的淀粉酶突变体及其应用制造技术

技术编号:8484788 阅读:302 留言:0更新日期:2013-03-28 04:06
本发明专利技术公布了一种热稳定性提高的淀粉酶突变体及其应用,属于遗传工程领域。本发明专利技术以嗜碱芽孢杆菌(Bacillus?alcalophilus)JN21(CCTCC?NO:M?2011231)淀粉酶为母本,采用分子生物学技术对嗜碱芽孢杆菌淀粉酶序列进行定点突变。在此改造条件下,嗜碱芽孢杆菌淀粉酶在50°C的半衰期由对照(突变前)例的15.3min提高到43.8min。利用此策略可以显著提高淀粉酶的热稳定性,为其工业化生产提供了基础。此策略对其它酶的性质改造具有重要的指导意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种热稳定性提高的淀粉酶突变体及其方法,具体涉及一种热稳定性提高的碱性淀粉酶突变体及其制备方法。
技术介绍
淀粉酶是最早用于工业生产的酶制剂,是迄今用途最广、产量最大的酶制剂产品之一。碱性淀粉酶在高PH环境下具有稳定性和活性,因而在工业生产中有较高的应用价值,现已用于纺织、洗涤剂、制革、造纸、医药、食品等行业。但来源于野生菌株未经改造的碱性淀粉酶在热稳定性等方面存在一定局限性,限制了其应用范围。因此基于已得到的碱性淀粉酶在大肠中的表达平台,利用定点突变,对碱性淀粉酶进行分子改造,以期得到酶学性质更适合工业应用的碱性淀粉酶。·
技术实现思路
本专利技术提供了一种热稳定性提高的淀粉酶突变体,其特征在于,对淀粉酶结构域A、B、C内的一个或多个氨基酸进行替换,提高了淀粉酶的热稳定性。所述淀粉酶突变体是以SEQ ID NO.1为出发序列,将第58位脯氨酸替换成丙氨酸、第199位组氨酸替换成亮氨酸、第216位谷氨酰胺替换成缬氨酸、第292位天冬酰胺替换成色氨酸、第467位脯氨酸替换成缬氨酸或其任意组合得到的突变体。能表达生产权利要求1所述淀粉酶突变体的载体也属于本专利要求保护的范围。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种热稳定提高的淀粉酶突变体,其特征在于以SEQ?ID?NO.1所示序列为出发序列,将第58位脯氨酸替换成丙氨酸、第199位组氨酸替换成亮氨酸、第216位谷氨酰胺替换成缬氨酸、第292位天冬酰胺替换成色氨酸、第467位脯氨酸替换成缬氨酸或其任意组合得到的突变体。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:陈坚堵国成刘龙李江华杨海泉邓壮梅
申请(专利权)人:江南大学
类型:发明
国别省市:

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