一种分离测定唾液中吡嗪类和吡啶类物质的方法技术

本发明专利技术涉及一种分离测定唾液中吡嗪类和吡啶类物质的方法，属于分析化学技术领域，具体涉及一种专用于分离测定唾液中吡嗪类和吡啶类物质的方法。本发明专利技术采用脱脂棉收集唾液样品，经溶剂萃取后采用气相色谱‑正化学源‑飞行时间质谱法测定唾液中吡嗪类和吡啶类物质。其步骤包括：a.用脱脂棉采集唾液样品，采集后脱脂棉置于注射器针筒中，利用注射器推杆推移挤压得到唾液样品；b.唾液样品经溶剂萃取，离心，浓缩；c.萃取液过微孔滤膜后，滤液采用气相色谱‑正化学源‑飞行时间质谱法测定，制作标准曲线，外标法定量。本发明专利技术可以有效的用于测定唾液中吡嗪类和吡啶类物质，方法可行，定性准确，检出限低，精密度好，准确可靠，具有推广应用价值。

Method for separating and determining pyrazine and pyridine substances in saliva

The invention relates to a method for the separation and determination of saliva of pyrazine and pyridine derivatives, which belongs to the technical field of analytical chemistry, in particular relates to a method for the separation and determination of saliva of pyrazine and pyridine compounds. The invention adopts cotton collected saliva samples, by solvent extraction by gas chromatography positive chemical ionization time-of-flight mass spectrometry method for the determination of in saliva of pyrazine and pyridine derivatives. The method comprises the following steps: A. with cotton collected saliva samples, collected cotton in the barrel of the syringe, the syringe push rod passes extrusion obtained saliva samples; B. saliva samples were extracted by solvent extraction, centrifugation, concentration; over microporous membrane C. extraction liquid chromatography, determination of positive chemical ionization time-of-flight mass spectrometry filtrate the gas, making the standard curve, using external standard method. The method can be effectively used for the determination of pyrazine and pyridine substances in saliva, the method is feasible, the quality is accurate, the detection limit is low, the precision is good, the accuracy is reliable, and the utility model has the value of popularization and application.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分析化学
，具体涉及一种专用于分离测定唾液中吡嗪类和吡啶类物质的方法。
技术介绍
吡嗪类物质是1、4位含两个杂氮原子的杂环类化合物，一般具有烤香、坚果香、爆米花香、咖啡香等香味特征。吡啶类物质是含有一个氮杂原子的六元杂环化合物，一般具有青香、木香、琥珀香等香味特征。吡嗪类和吡啶类物质是食品、烟草等中的重要香味成分。饮食过程中食品中化学成分被口腔唾液选择性溶解吸收，那些被吸收的成分才是刺激人体产生感官感受的物质，决定了食品的风格和风味。目前对食品香味的评价通常以口、鼻、舌、喉等的感知来评价，但很难排除人为主观性以及由此所产生的不确定性。研究测定唾液中吸收溶解的风味成分，则能直接、客观的得到决定食品风味的化学成分数据。进行饮食者唾液中吡嗪类、吡啶类香吃味成分的分析，可为食品、烟草等的香吃味评定提供数据支持，为改善食品风味提供理论依据。目前，关于香精香料、食品、白酒、烟气等样品中吡嗪类和吡啶类物质的测定已有大量的报道，然而唾液样品中吡嗪类和吡啶类物质的测定还未见报道。唾液样品基体复杂，主要成分是水（占99%），但含有多种有机物如黏蛋白、黏多糖、唾液淀粉酶、溶菌酶、免疫本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离测定唾液中吡嗪类和吡啶类物质的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤（1），样品采集：将脱脂棉置于口腔内，放置0.2‑5 min后，取出吸收了唾液的脱脂棉，置于注射器针筒中，利用注射器推杆推移挤压，挤出液收集于样品管中，得到唾液样品；步骤（2），萃取：移取唾液样品于离心管中，加入萃取溶剂、盐和除水剂，经涡旋振荡至混合均匀后离心，取萃取液层，得到萃取液，所述的萃取液中不含水；所述的萃取溶剂为二氯甲烷、三氯甲烷、甲苯、乙酸乙酯和乙腈中的一种或几种的组合物，萃取溶剂加入量与唾液样品的体积比为0.2‑2：1；所述的盐为氯化钠、柠檬酸钠和柠檬酸氢二钠中的一种或几种的组合物，盐的加入质量为唾液样品质...

【技术特征摘要】
1.一种分离测定唾液中吡嗪类和吡啶类物质的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤（1），样品采集：将脱脂棉置于口腔内，放置0.2-5 min后，取出吸收了唾液的脱脂棉，置于注射器针筒中，利用注射器推杆推移挤压，挤出液收集于样品管中，得到唾液样品；步骤（2），萃取：移取唾液样品于离心管中，加入萃取溶剂、盐和除水剂，经涡旋振荡至混合均匀后离心，取萃取液层，得到萃取液，所述的萃取液中不含水；所述的萃取溶剂为二氯甲烷、三氯甲烷、甲苯、乙酸乙酯和乙腈中的一种或几种的组合物，萃取溶剂加入量与唾液样品的体积比为0.2-2：1；所述的盐为氯化钠、柠檬酸钠和柠檬酸氢二钠中的一种或几种的组合物，盐的加入质量为唾液样品质量的10-40%；所述除水剂为无水硫酸镁、无水硫酸钠中的一种或两种的组合物，除水剂加入质量为唾液样品质量的0-70%；步骤（3），测定：将步骤（2）收集到的萃取液过0.22 μm微孔滤膜，滤液采用气相色谱-正化学源-飞行时间质谱法分析，外标法定量；其中，气相色谱条件如下：色谱柱为长度×内径×膜厚为30 m×0.25 mm × 0.25 μm，DB-35MS石英毛细管柱或相当者；载气氦气，纯度≥99. 999 %，恒流模式，流量1.0 mL/min；进样口温度：280℃；分流进样或不分流进样，分流比1-30；进样量：1-2 μL；程序升温：初始温度35℃，保持 2 min，然后以7.5℃/min升温到125℃，再以25 ℃/min 升温到280℃，保持5 min；飞行时间质谱条件如下：电离方式为正化学电离源，色谱质谱接口温度为280℃，离子源温度为160-220℃，电离能量为40-60 eV，溶剂延迟：4.0-6.0 min，反应气为甲烷，流量为40-60%，采集方式为总离子流色谱图。2.根据权利要求1所述的分离测定唾液中吡嗪类和吡啶类物质的方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：司晓喜，刘志华，张凤梅，朱瑞芝，申钦鹏，刘春波，苏美玲，尤俊衡，何沛，苏钟璧，
申请(专利权)人：云南中烟工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：云南;53