一种耐酸性淀粉酶突变体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公布了一种耐酸性淀粉酶突变体及其制备方法，属于遗传工程领域。本发明专利技术以枯草芽孢杆菌（Bacilus?ssubtilis）淀粉酶为母本，采用分子生物学技术对枯草芽孢杆菌淀粉酶序列进行定点突变，在此改造条件下，枯草芽孢杆菌淀粉酶最适反应pH由对照（突变前）例的7.0变为4.5；突变后，在pH4.5条件下，淀粉酶催化效率提高5倍。利用此策略可以大大提高淀粉酶的耐酸性，为其工业化生产提供了基础。此策略对其它酶的性质改造具有重要的指导意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种耐酸性淀粉酶突变体及其制备方法。
技术介绍
酸性淀粉酶是在酸性条件下能水解淀粉的酶类，可应用于酸性条件下淀粉原料的加工，显著的耐酸性使其具有很大的应用潜力和开发前景，广泛应用于青贮饲料、发酵饮料、废液的处理等多种领域。酸性淀粉酶生产菌株的获得主要通过筛选和突变获得。筛选的盲目性较大，不容易获得目的菌株。突变包括：自然突变和诱变，自然突变的几率相当小，诱变的工作量较大且不可控出现负突变的几率较大。
技术实现思路
本专利技术提供了一种耐酸性淀粉酶突变体，其特征在于，淀粉酶催化区域内组氨酸替换为天冬氨酸。所述淀粉酶突变体是以SEQ ID NO.1为出发序列，分别将第222位、第275位、第293位和第310位的组氨酸突变成天冬氨酸得到的突变体。所述SEQ ID NO.1已提交NCBI，序列号NO:JQ768415。本专利技术还提供一种制备所述淀粉酶突变的方法，是将催化区域内组氨酸突变成天冬氨酸。具体而言，是以SEQ ID NO.1为出发序列，分别将第222本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种耐酸性淀粉酶突变体，其特征在于，淀粉酶催化区域内组氨酸替换为天冬氨酸。

【技术特征摘要】
1.一种耐酸性淀粉酶突变体，其特征在于，淀粉酶催化区域内组氨酸替换为天冬氨
酸。
2.权利要求1所述突变体，其特征在于，以SEQ ID NO.1为出发序列，分别将第222
位、第275位、第293位和第310位的组氨酸突变成天冬氨酸得到的突变体。
3.权利要求1所述淀粉酶突变体的制备方法，其特征在于，将催化区域内组氨酸突
变成天冬氨酸。
4.权利要求3所述方法，其特征在于，以SEQ ID NO.1为出发序列，分别将第222
位、第275位、第293位和第310位的组氨酸突变成天冬氨酸。
5.权利要求3所述方法，其特征在于，步骤如...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈坚，堵国成，刘龙，李江华，杨海泉，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：