一种包载水溶性药物的脂质体制备方法技术

本发明专利技术涉及一种包载水溶性药物的脂质体制备方法，将水溶性药物溶于明胶、胶原或白蛋白等含氨基酸结构的高分子亲水胶体中，加入泊洛沙姆混匀后，形成W/W型胶体溶液，冷冻干燥，形成的冻干粉转入含有脂质材料的叔丁醇溶液中，分散均匀后再次冷冻干燥，形成高包封率的包载水溶性药物的脂质体。该脂质体制备方法利用W/W型胶体结合二次冻干的制剂技术解决已有包载水溶性药物的脂质体制备方法对于水溶性药物载药量小、包封率低和稳定性差的问题。该方法适用制备包载水溶性药物的脂质体，尤其适用于制备包载热稳定性差或大分子药物的脂质体，也可以用于掩盖药物的苦味或臭味、与其他组分相隔离。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药物制剂学领域，更具体地说，本专利技术涉及一种脂质体及其制备方法。
技术介绍
脂质体(liposomes)是一种由排列有序的脂质双分子层组成的单层或多层微囊。脂质体属于胶体系统，具有类似细胞的结构，与细胞膜亲和力强，可以增加被包封药物透过细胞膜的能力。脂质体生物相容性好，可实现药物体内靶向递送，具有延长药物作用时间、增加药物的体内外稳定性、降低药物毒性，增强药理作用等诸多优点。理想的脂质体需要达到以下要求(1)脂质体形态圆整且不聚集，可以通过制备方法有效控制粒径范围，实现药物的缓控释作用和靶向递送的目的；(2)脂质体稳定性高，可以长期放置；(3)脂质体具有较高的包封率和载药量，尤其对于热稳定性差药物或水溶性生物大分子药物；(4)脂质体容易实现灭菌或无菌操作。脂质体的制备方法有多种，如机械分散法、薄膜分散法、逆相蒸发法、复乳法、熔融法、注入法、冷冻干燥法、表面活性剂处理法、钙融合法、载体沉积法等。其中，逆相蒸发法、结合反复融冻法技术的冷冻干燥法是包载水溶性药物的较好方法。但是，已有的包载水溶性药物的脂质体制备方法尚存在不足，例如逆相蒸发法需要长时间的热处理过程，不适于热稳定性差的蛋白多肽类药物，并且制备过程中有机溶剂容易残留，潜在危害性大。结合反复融冻法技术冷冻干燥方法容易实现无菌化操作，得到的脂质体冻干粉稳定性好，但结合反复融冻法技术的冷冻干燥方法制备出来的脂质体冻干粉遇水形成脂质体溶液时，粒径通常增大数倍，形态不圆整且容易聚集，无法有效控制粒径范围，存在安全性问题。专利技术专利“一种制备脂质体的新方法”(申请号03111470. 9)公开了一种制备脂质体的新方法，其权利要求项I为“一种制备脂质体的新方法，其特征在于a.制备一单相溶液，其溶质为(I)用于形成脂质体的脂质、待包封的物质，或(2)用于形成脂质体的脂质、待包封的物质和水溶性载体，所述水溶性载体为蔗糖、乳糖或甘露醇；其溶剂由叔丁醇和水组成，叔丁醇和水的体积比大于1:3。b.冷冻单相溶液除去溶媒，得到冻干产物，将得到的冻干产物水化得到脂质体”。专利技术专利“一种制备脂质体的新方法”(申请号03111470. 9)虽然利用了叔丁醇为溶液的冷冻干燥工艺，但明确强调(I)水溶性载体为蔗糖、乳糖或甘露醇；(2)冷冻干燥前必须得到单相溶液体系。该专利技术专利制备得到的脂质体冻干粉溶解于水中形成的脂质体粒径虽然小，但结构依然是传统的单室脂质体，因为蔗糖、乳糖或甘露醇等小分子水溶性物质容易透过脂质膜溶解到溶出介质中。此外该专利技术制备的脂质体由于内部的小分子水溶性载体溶解后产生高渗透压，因此存在水溶性药物快速渗漏的问题，并且该专利技术药物包封率较低(实施例5为21%，实施例6为40%)，无法满足中国药典2010版对于脂质体包封率(大于85%)的要求。专利技术专利CN201210022488. 9公开一种胶核脂质体冻干粉和制备方法，该脂质体具有本专利技术类似的结构，但是制备方法是将I份高分子亲水胶体材料溶解在10-200份水中，加入O. 05-50份水溶性药物，混匀形成水相；将O. 5-50份脂质材料、2-100份乳化剂和10-1000份冻干支持剂溶解在50-4000份叔丁醇中，形成油相；将水相分散到油相中形成W/0型乳液，超声、高速搅拌或高压均质处理形成W/0型微乳溶液，采用超低温速冻工艺形成固体分散体，冷冻干燥除去叔丁醇，形成脂质体冻干粉。专利技术专利CN201010131339. 7公开了一种包载药物脂质体的制备方法将水溶性药物与两亲性高分子材料溶解于水相体系中，进行第一次冷冻干燥处理，然后将包含水溶性药物的冻干粉与脂质体成膜材料均匀分散于有机相体系中，进行第二次冷冻干燥方法，制成包载水溶性药物的脂质体。专利技术专利CN201010131244. 5公开了一种包载药物脂质体的制备方法将药物分散于溶解或熔融状态的两亲性高分子材料体系中，急速降温处理得到药物固体分散体，然后将药物固体分散体与脂质体成膜材料均匀分散于有机相体系中，按照脂质体制备方法，制成包载药物的脂质体。以上三个专利技术专利，部分解决了脂质体包载药物的制备工艺中存在的稳定性差或操作复杂等问题，但是操作时间控制要求较高、或需要加热熔融处理等，增加了对大分子药物的破坏，同时增加了批量制备的操作控制难度。总之，已有包载水溶性药物的脂质体制备方法大多采用乳剂体系或复乳剂体系，并需要经过长时间的热处理过程，由于大分子水溶性药物耐热性差、油水界面的易聚集等特点，应用的这类方法制备的包载水溶性药物的脂质体不能保证药物的活性，特别是大分子药物的活性。此外，这类方法制备的包载水溶性药物的脂质体存在微粒易聚集、药物载药量低、包封率低，突释效应明显等问题，采用主动载药技术可以适度提高药物的包封率，但是主动载药技术需要透析除盐等步骤，操作时间长且重现性差，也不适于水溶性药物的脂质体的大规模制备。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是针对现有的脂质体制备方法的不足之处，提供一种适于包载水溶性药物的脂质体制备技术，将水溶性药物溶于明胶、胶原或白蛋白等含氨基酸结构的高分子亲水胶体中，加入泊洛沙姆(Poloxamer )混勻后形成W/W型胶体溶液，冷冻干燥，形成的冻干粉转入含有脂质材料的叔丁醇溶液中，分散均匀后再次冷冻干燥，形成高包封率的包载水溶性药物的脂质体。该脂质体制备方法利用二次冻干技术解决已有包载水溶性药物的脂质体制备方法对于水溶性药物载药量小、包封率低和稳定性差的问题，制备得到的载药脂质体粒径处于纳米级、分散均匀、载药量大、药物包封率高、药物释放缓慢。该方法适用制备包载水溶性药物的脂质体，尤其适用于制备包载热稳定性差的药物和蛋白、多肽、多糖等大分子药物的脂质体，达到缓控释给药或靶向递送给药的目的，也可以用于掩盖苦味或臭味、与其他组分隔离、减少药物刺激作用、液体药物转换为固体形式等制剂目的，可应用于注射、口服、黏膜、皮肤、创面、腔道的局部或全身治疗的多种剂型。专利技术人在长期试验中发现①明胶、胶原或白蛋白等含氨基酸结构的高分子亲水胶体溶液对于水溶性药物具有较好的吸纳能力，但很难长期保存，当含氨基酸结构的高分子亲水胶体与泊洛沙姆(Poloxamer)混匀后可以形成W/W型胶体溶液，大分子药物容易分散于含氨基酸结构的高分子亲水胶体溶液组成的内水相；②利用冷冻干燥将W/W型胶体溶液制成的冻干粉有利于药物的稳定；③泊洛沙姆(Poloxamer)是很好的冷冻干燥支持剂，冻干工艺得到的脂质体稳定性高W/W型胶体溶液制成的冻干粉再次分散于磷脂溶液中形成的脂质体粒径小且稳定性高。专利技术人经过大量实验，创新性地将“W/W型胶体溶液技术”和“二次冷冻干燥工艺”有机融合成一体，集成了胶体的高载药量、冷冻干燥工艺的高稳定性等特点，探索出一种适于包载水溶性药物的脂质体制备技术，克服传统脂质体包载水溶性药物存在的载药量低、药物包封率低、突释效应明显等问题。本专利技术的脂质体制备方法的关键技术组合为①制备含氨基酸结构的高分子亲水胶体与泊洛沙姆(Poloxamer)混勻后形成W/W型胶体溶液,大分子药物容易分散于含氨基酸结构的高分子亲水胶体溶液的内水相；②采用冷冻干燥工艺将内相容纳大分子药物的W/W型高分子胶体溶液制成冻干粉，有利于保持药物的高度分散状态并维持稳定性；③容纳水溶本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种包载水溶性药物的脂质体制备方法，其特征在于：其制备过程包含以下过程：a.以质量配比计算，将1份含氨基酸结构的高分子亲水胶材料加入500？5000份水形成溶液，加入0.5？50份水溶性药物和20？500份泊洛沙姆溶解，形成含有药物的W/W型亲水胶体溶液，冷冻干燥，形成冻干粉I；b.以质量配比计算，将1？50份脂质材料，5？500份聚氧乙烯氢化蓖麻油，溶解在500？10000份叔丁醇中，采用超声或水浴加热的处理方法加速溶解，形成叔丁醇溶液I；c.将冻干粉I加入到叔丁醇溶液I中，分散均匀，形成叔丁醇溶液II，液氮或冰箱中冻结形成固体，冷冻干燥形成包载水溶性药物的脂质体冻干粉II，灌装于西林瓶中密封保存，临用前注入1000？50000份药学公知的注射用溶媒，形成包载水溶性药物的脂质体溶液。

【技术特征摘要】
1.一种包载水溶性药物的脂质体制备方法，其特征在于其制备过程包含以下过程a.以质量配比计算，将I份含氨基酸结构的高分子亲水胶材料加入500-5000份水形成溶液，加入O. 5-50份水溶性药物和20-500份泊洛沙姆溶解，形成含有药物的W/W型亲水胶体溶液，冷冻干燥，形成冻干粉I ;b.以质量配比计算，将1-50份脂质材料，5-500份聚氧乙烯氢化蓖麻油，溶解在500-10000份叔丁醇中，采用超声或水浴加热的处理方法加速溶解，形成叔丁醇溶液I ;c.将冻干粉I加入到叔丁醇溶液I中，分散均匀，形成叔丁醇溶液II，液氮或冰箱中冻结形成固体，冷冻干燥形成包载水溶性药物的脂质体冻干粉II，灌装于西林瓶中密封保存，临用前注入1000-50000份药学公知的注射用溶媒，形成包载水溶性药物的脂质体溶液。2.如权利要求I所述的一种包载水溶性药物的脂质体制备方法，其特征在于所述的含氨基酸结构的高分子亲水胶材料包括明胶、胶原和人血白蛋白。3.如权利要求I所述的一种包载水溶性药物的脂质体制备方法，其特征在于所述的水溶性药物是指单独应用、配合增溶剂应用或在特定PH值范围内药物溶解度大于O. Olmg/ml的生物大分子药物、化学药物、中药有效提取物、医学或生物学领域应用的诊断试剂。4.如权利要求3所述的一种包载水溶性药物的脂质体制备方法，其特征在于所述的生物大分子药物是指蛋白质、多肽、多糖、酶、辅酶、核酸结构的药物及它们的生物降解或衍生产物，包括生长因子、激素、刺激因子、抗体、疫苗、干扰素、白介素、动植物来源的多糖。5.如权利要求I所述的一种包载水溶性药物的脂质体制备方法，其特征在于所述的水溶性药物包括胰岛素、水蛭素、血管内皮生长抑制因子、神经营养因子、细胞生长因子、成骨生长因子、乳铁转运蛋白、干扰素、荧光蛋白、奥沙利钼，卡钼，奈达钼、阿柔比星、多柔比星、表柔比星、米托蒽醌、博莱霉素、平阳霉素、丝裂霉素、厄洛替尼、吉非替尼、伊马替尼、达沙替尼、阿立必利、阿扎司琼、昂丹司琼、氯磷酸、美司钠、利妥昔单抗、替伊莫单抗、西妥昔单抗、贝伐单抗、阿那曲唑，氨鲁米特，福美坦，依西美坦、替尼泊苷、依托泊苷，喷司他丁、伊立替康、白消安、氮芥、卡莫斯丁、罗莫司丁、高三尖杉酯碱、门冬酰胺酶、培门冬酶、阿糖胞苷、氟脲苷、吉西他滨、西地尼布、阿伦膦酸钠、瑞舒伐他汀、抗凝血酶、卡莫氟、多西他赛、长春地辛、长春新碱、紫杉醇、索拉菲尼、地西他滨、丙卡巴肼、尼莫地平、硝苯地平、尼群地平、非洛地平、双氯灭痛、萘普生、...

【专利技术属性】
技术研发人员：白骅，鲁翠涛，曹金全，苏正兴，周志彩，詹新安，
申请(专利权)人：浙江海正药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：