【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及氨基残余物的定量检测，尤其适应新固相多肽合成中，经茚三酮试剂处置，测得吸光值，制得标准曲线，用于判定未知树脂肽中的残余氨基含量的方法。
技术介绍
在固相法合成多肽的过程中，游离的氨基数量是合成完成度的一种直接体现，但是现在没有一个准确的方法可以得到残余氨基的具体数量，以验证其结果的可信度与准确性；因此制作标准样品与标准曲线用于对未知树脂肽中游离的氨基进行定量分析，有着重要的实践价值。 常规茚三酮检测法用于固相多肽合成中的-NH2残基定量的检测，一般均采用将反应后树脂的吸光值代入公式，通过计算来确定合成率，此结果易受反应时间、加热温度、加热时间等因素影响，而且由于存在试剂配制的批次差异，从而使结果会有较大的浮动，而且由于合成的不断进行，氨基酸的增加，也会使得树脂肽重量发生变化，使得结果判定上的准确度大打折扣，为了避免上述情况的出现，该项目对茚三酮反应试剂进行了改进，可以在短时间内得出一个稳定的结果，并使用脱去保护基后的合成用树脂作为标准品，建立一条标准曲线，使所有的反应均在同一条件下进行，从而保证了结果的可信度，可以更可靠的对游离氨基进行定量。文献检...
【技术保护点】
茚三酮检测法对固相多肽合成中的游离氨基定量方法改进，其特征在于：用与合成反应相同的Rink_Amide_MBHA树脂作为标准样品，制作标准曲线，对未知的样品进行残余氨基定量检测，其步骤如下：其1样品处理：称取Rink_Amide_MBHA树脂2g,计算树脂摩尔数A；用带Fmoc保护基的氨基酸，每种氨基酸取2A摩尔；将1A摩尔的Rink_Amide_MBHA树脂与2A摩尔的带Fmoc保护基的氨基酸，依次置于含8%碳化二亚胺的氮甲基吡咯烷酮溶液的容器中，反应2小时，得到树脂肽；再经25%哌啶溶液26ml，处理30分钟，得到去除保护基后的树脂肽，备用；其中25%哌啶溶液的配制：2...
【技术特征摘要】
2012.07.18 CN 201210250876.21.茚三酮检测法对固相多肽合成中的游离氨基定量方法改进，其特征在于用与合成反应相同的Rink_Amide_MBHA树脂作为标准样品，制作标准曲线,对未知的样品进行残余氨基定量检测，其步骤如下 其I样品处理 称取Rink_Amide_MBHA树脂2g,计算树脂摩尔数A ;用带Fmoc保护基的氨基酸,每种氨基酸取2A摩尔；将IA摩尔的Rink_Amide_MBHA树脂与2A摩尔的带Fmoc保护基的氨基酸，依次置于含8%碳化二亚胺的氮甲基吡咯烷酮溶液的容器中，反应2小时，得到树脂肽；再经25...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵毅，郑先强，谢仁军，肖璐恒，李延涛，黄炯，唐磊，
申请(专利权)人：新疆天康畜牧生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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