本发明专利技术提供了一种固相多肽合成生长抑素的方法，包括如下步骤：以2-氯三苯基醇树脂为起始原料，按照固相合成的方法依次连接具有保护基团的氨基酸，其间依次脱去Fmoc-保护基团，用TBTU及HOBT为缩合剂进行接肽反应，得保护的还原型十四肽树脂后，同步进行脱侧链保护基团及切肽，获得还原型生长抑素，并在pH为7～9的条件下用双氧水氧化，获得生长抑素粗品，再经C18高效液相柱进行分离纯化，再经冷冻干燥后，制得生长抑素精品。本发明专利技术具备规模化生产能力，工艺稳定，生产成本低，三废减少，副产物少，质量稳定，生产成本低，极具市场竞争力。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生长抑素的生产方法，尤其涉及固相多肽合成生长抑素的新生产工艺。
技术介绍
中文名生长抑素。其他名称生长抑素释放抑制激素，商品名施他宁。英文名Somatostatin，Stilamin0结构式权利要求1.，其特征在于，包括如下步骤以2-氯三苯基醇树脂为起始原料，按照固相合成的方法依次连接具有保护基团的氨基酸，其间依次脱去Fmoc-保护基团，用TBTU及HOBT为缩合剂进行接肽反应，得保护的还原型十四肽树脂后，同步进行脱侧链保护基团及切肽，获得还原型生长抑素，并在pH为7 9的条件下用双氧水氧化，获得生长抑素粗品，再经C18高效液相柱进行分离纯化，再经冷冻干燥后，制得生长抑素精品。2.根据权利要求I所述的方法，其特征在于，依次连接具有保护基团的氨基酸，获得保护十四肽树脂，其间依次脱去Fmoc-保护基团的方法，包括如下步骤 (1)生产Fmoc-Cys (Trt)-树脂 将2-氯三苯基醇树脂，加入DCM，室温搅拌溶胀，加入氯化亚砜，再于室温反应2 3小时，抽干，用DCM洗漆，抽干； ·2_氯三苯基醇树脂与氯化亚砜的重量比为1 I 2 ; 加入DMF，再加入用DMF溶解的Fmoc-Cys (Trt) -OH和DIPEA，于32 38°C反应I. O ·1. 5小时，再加甲醇，32 37 °C反应30 90分钟，抽干，树脂用甲醇洗涤一次，用DMF洗洗，抽干； DMF中，Fmoc-Cys(Trt)-OH 2-氯三苯基醇树脂=I 2 I，摩尔比; DIPEA 2-氯三苯基醇树脂=5 7 1，摩尔比；(2)生产Fmoc-Ser (tBu) -Cys (Trt)-树脂 在步骤(I)的Fmoc-Cys(Trt)-树脂中，加入重量浓度为25. 5 26. 5% PIP的DMF溶液，脱帽反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入用DMF溶解的Fmoc-Ser (tBu) _0H、TBTU、H0BT和NMM的混合物，缩合反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，获得Fmoc-Ser (tBu) -Cys (Trt)-树脂；(3)生产Fmoc-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-树脂 在步骤(2)的Fmoc-Ser (tBu)-Cys (Trt)-树脂中，加入重量浓度为25. 5 26. 5 % PIP的DMF溶液，脱帽，抽干，分别用甲醇和DMF洗涤，抽干； 加入用DMF溶解的Fmoc-Thr (tBu) _0H、TBTU、H0BT和NMM的混合物，缩合反应，抽干，用DMF 洗漆，抽干，获得 Fmoc-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-树脂；(4)生产Fmoc-Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-树脂 在步骤(3)的Fmoc-Thr(tBu)-Ser(tBu)_Cys(Trt)-树脂中，加入重量浓度为25. 5 ·26. 5% PIP的DMF溶液，脱帽反应，抽干，用甲醇洗涤一次，用DMF洗五次，抽干； 加入用DMF溶解的Fmoc-Phe-OH、TBTU, HOBT和NMM的混合物，缩合反应，抽干，用DMF洗漆二次，抽干，获得 Fmoc-Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-树脂；(5)生产Fmoc-Thr (tBu) -Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-树脂 在步骤(4)的Fmoc-Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-树脂中，加入重量浓度为·25.5 26. 5% PIP的DMF溶液，脱帽反应，抽干，用甲醇洗涤一次，用DMF洗五次，抽干； 加入用DMF溶解的Fmoc-Thr (tBu) _0H、TBTU、H0BT和NMM的混合物，缩合反应，抽干，用DMF 洗漆，抽干，获得 Fmoc-Thr (tBu) -Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-树脂；(6)生产Fmoc-Lys (Boc) -Thr (tBu) -Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-树脂 在步骤(5)的 Fmoc-Thr (tBu)-Phe-Thr (tBu)-Ser (tBu)-Cys (Trt)-树脂中，加入重量浓度为25. 5 26. 5% PIP的DMF溶液，脱帽反应，抽干，用甲醇和DMF洗涤，抽干；加入用DMF 7L溶解的Fmoc-Lys (Boc) _0H、TBTU、HOBT和NMM的混合物，缩合反应，抽干，用 DMF 洗搽，抽干，获得 Fmoc-Lys (Boc) -Thr (tBu) -Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-树脂；(7)生产Fmoc-Trp-Lys (Boc) -Thr (tBu) -Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-树脂在步骤(6)的 Fmoc-Lys (Boc) -Thr (tBu) -Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-树脂中，加入重量浓度为25. 5 26. 5% PIP的DMF溶液，脱帽反应，抽干，依次用甲醇和DMF洗涤，抽干； 加入用DMF溶解的Fmoc-Trp-OHJBTlHOBT和NMM的混合物，缩合反应，抽干，用DMF洗搽，抽干，获得 Fmoc-Trp-Lys (Boc) -Thr (tBu) -Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-树脂；(8)生产Fmoc-Phe-Trp-Lys (Boc) -Thr (tBu) -Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-树脂在步骤(7)的 Fmoc-Trp-Lys (Boc) -Thr (tBu) -Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-树脂中，加入重量浓度为25. 5 26. 5% PIP的DMF溶液，脱帽反应，抽干，依次用甲醇和DMF洗搽，抽干； 加入用DMF溶解的Fmoc-Phe-OH、TBTU、HOBT和NMM的混合物，缩合反应，抽干，用DMF洗搽，抽干，获得 Fmoc-Phe-Trp-Lys (Boc)-Thr (tBu) -Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-树脂；(9)生产Fmoc-Phe-Phe-Trp-Lys (Boc) -Thr (tBu) -Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-树脂在步骤(8)的 Fmoc-Phe-Trp-Lys (Boc) -Thr (tBu) -Phe-Thr (tBu) -Ser (tBu) -Cys (Trt)-树脂中，加入重量浓度为25. 5 26. 5% PIP的DMF溶液，脱帽反应，抽干，用甲醇和DMF洗搽，抽干; 加入用DMF试剂溶解的Fmoc-Phe-OH、TBTU、HOBT和NMM的混合物，缩合反应，抽干，用DMF 洗搽，抽干，获得 Fmoc-Phe-Phe-Trp-Lys (Boc) -Thr (t本文档来自技高网...
【技术保护点】
固相多肽合成生长抑素的方法，其特征在于，包括如下步骤：以2?氯三苯基醇树脂为起始原料，按照固相合成的方法依次连接具有保护基团的氨基酸，其间依次脱去Fmoc?保护基团，用TBTU及HOBT为缩合剂进行接肽反应，得保护的还原型十四肽树脂后，同步进行脱侧链保护基团及切肽，获得还原型生长抑素，并在pH为7～9的条件下用双氧水氧化，获得生长抑素粗品，再经C18高效液相柱进行分离纯化，再经冷冻干燥后，制得生长抑素精品。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：周逸明，崔颀，蔡华成，
申请(专利权)人：上海苏豪逸明制药有限公司，周逸明，崔颀，
类型：发明
国别省市：
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