【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种植物转基因受体材料的制备方法，具体涉及。
技术介绍
转基因研究是植物基因功能鉴定的一种重要途径，通常以烟草或拟南芥为模式植物。烟草或拟南芥转基因稳定表达研究技术已趋成熟，近年来，农杆菌(Agroinfilration)介导的瞬时表达系统广泛地应用在本生烟(AYcoiiaaa benthamian、及其M基趣系16C上。通过农杆菌混合注射将报告基因和RNA沉默抑制子导入本生烟或16C的植株叶片细胞，分析报告基因的表达情况，从而鉴定出植物病毒编码的RNA沉默抑制子活性。甘蔗是一种单子叶禾本科糖料作物，与转基因模式植物或其它作物(如水稻、玉米)相比，转基因研究相对落后，这是由于甘蔗转基因稳定表达研究存在遗传转化效率低、周期长、成本高的缺点，且受甘蔗不同品种基因型的限制。瞬时表达研究是解析基因功能的一种重要辅助手段。至今，开展甘蔗转基因瞬时表达主要以愈伤组织为受体材料，但是，愈伤组织材料的准备需要1-2个月，时间长，效率低，成本高。甘蔗叶片组织是一种开展转基因瞬时表达研究的理想外植体，不受季节限制，制备简便，叶片表面平坦，便于报告基因表达情况的观察，且不受品种基因型的影响。本专利技术采用甘蔗新叶基部幼嫩叶片，经过暗培养后即可作为外源基因表达、启动子分析、基因沉默等转基因瞬时表达研究的受体材料。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供。本专利技术的方法提供了一种快速、高效、简便的甘蔗转基因瞬时表达研究所需的受体材料的制备方法，克服现有以甘蔗愈伤组织为受体材料的转基因瞬时表达研究体系存在的时间长，效率低，成本高的问题。本专利技术的目的是通过以下方法实现的...
【技术保护点】
一种甘蔗转基因瞬时表达叶片受体材料的制备方法，其特征在于操作步骤如下：（1）甘蔗叶片外植体田间采样：取生长正常且无病虫害的甘蔗植株梢部，去除老叶和生长出来的上部叶片；？？？（2）甘蔗叶片外植体表面消毒：去除梢部叶片和蔗茎，留20？30厘米长的叶片组织，用体积比75%酒精溶液消毒后，移入无菌的超净工作台；？？？（3）甘蔗叶片外植体制备：剥去？1和？2叶及以外的叶片，取？3和？4嫩叶，去除中脉后将基部幼嫩叶片切成2厘米×2厘米的小方块，平铺于的MS0.6固体培养基上，上表面朝下；所述MS0.6固体培养基为：改良MS+0.5？g/L水解酪蛋白+0.6？mg/L？2,4？D+30？g/L蔗糖+6.0？g/L琼脂粉；所述改良MS培养基的配方如表1所示；？？？？？？？？？？？？？？？？？表1？？？改良MS培养基配方（4）甘蔗叶片外植体预培养：小方块幼嫩叶片在28？℃条件下暗培养3？5天后，即可作为甘蔗转基因瞬时表达叶片受体材料。2012103920054100001dest_path_image001.jpg
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：高三基，米尔科夫艾瑞克，陈如凯，林艺华，付为林，傅华英，陈永武，
申请(专利权)人：福建农林大学，
类型：发明
国别省市：
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