TNFR-Ig融合蛋白的生产制造技术

技术编号:8211901 阅读:222 留言:0更新日期:2013-01-17 05:07
(本发明专利技术)提供在细胞培养物中大规模生产二聚体融合蛋白的改良系统和方法,所述融合蛋白由人(p75)肿瘤坏死因子受体(TNFR)胞外配基结合部分连接至IgG1的Fc部分组成,特别是在具有下列一项或多项特征的培养基中:i)累积氨基酸浓度大于约70mM;ii)累积谷氨酰胺与累积天冬酰胺的摩尔比率小于约2;iii)累积谷氨酰胺与累积总氨基酸的摩尔比率小于约0.2;iv)累积无机离子与累积总氨基酸的摩尔比率为约0.4至1;或v)谷氨酰胺与天冬酰胺的组合累积浓度在约16mM和36mM之间。

【技术实现步骤摘要】
TNFR-Ig融合蛋白的生产相关申请本申请是申请日为2005年8月26日、专利技术名称为“TNFR-Ig融合蛋白的生产”的中国专利申请200580036938. 8 (国际申请号PCT/US2005/030439)的分案申请。本申请要求于2004年8月27日递交的临时专利申请号60/605,379的优先权,在此处整体引用作为参考。
技术介绍
蛋白质和多肽作为治疗物质已日益重要。大多数情况下,治疗性蛋白质和多肽产生于细胞培养物中,所述细胞经过基因工程操作和/或选择以产生非比寻常的高水平特定目的蛋白质或多肽。细胞培养条件的调控和优化对于蛋白质和多肽的成功商业化生产至关重要。许多在细胞培养物中生产的蛋白质和多肽均系分批或补料分批方法产生,其中将细胞培养一段时间,然后终止培养并分离产生的蛋白质或多肽。细胞培养条件能显著影响所产生蛋白质或多肽的最终数量和质量。例如,常规分批或补料分批培养方法常常导致产生对细胞增殖、存活力以及目的蛋白质和多肽的产生或稳定性有不良影响的代谢废物。尽管已经努力改善分批或补料分批培养方法中蛋白质和多肽的生产,仍然有进一步改进的需要。此外,也投入了大量的精力以发展用于培养细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】
在大规模生产细胞培养物中生产TNFR?Ig的方法,包括步骤:提供细胞培养物,其包括;含有TNFR?Ig编码基因且该基因可在细胞培养条件下表达的哺乳动物细胞;以及含有谷氨酰胺的培养基,其具有选自以下的培养基特征及其组合:(i)每单位体积中累积氨基酸量大于约70mM,(ii)累积谷氨酰胺与累积天冬酰胺的摩尔比率小于约2,(iii)累积谷氨酰胺与累积总氨基酸的摩尔比率小于约0.2,(iv)累积无机离子与累积总氨基酸的摩尔比率为约0.4至1,(v)每单位体积谷氨酰胺与天冬酰胺的组合累积量大于约16mM;将所述培养物在起始生长阶段的第一组培养条件下维持足够长的第一段时间,以使所述细胞增殖至活细胞密度达到...

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员:D·德拉波YT·卢安J·R·梅瑟W·王D·R·拉斯科
申请(专利权)人:辉瑞爱尔兰药品合伙公司
类型:发明
国别省市:

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