一种多酶体系的仿生固定化方法技术

本发明专利技术是一种固定化多酶体系的工艺方法。该方法包括以下步骤是：1）前驱体溶液的制备：在室温下将TMOS（正硅酸甲酯）加入到1mmol/L的HCl溶液中，TMOS完全溶解、澄清后再加入pH=5-9磷酸缓冲液，混匀；2）固定化酶的制备：将多酶溶液与PDADMA溶液均匀混合，得到含酶溶液A；在30℃恒温条件下，取上步预处理过的前驱体溶液加入到溶液A中，立即振荡，室温静置、离心分离后，用磷酸缓冲液清洗，剩余固体真空冷冻干燥24h即得仿生硅化的多酶。本发明专利技术制备固定化酶的方法，制备工艺简单，条件温和，对酶活性损失小，酶活回收率可达85.12%；载体为TMOS，廉价易得。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于固定化酶领域，特别是ー种固定化多酶体系的エ艺方法。
技术介绍
多酶体系是指由不同的酶联合组成的一个结构和功能的整体，能够进行连续的反应催化，自然界中生物体的物质代谢就是由各种各样的多酶体系维系的，多酶体系是高效而精确的系统，常由两个或两个以上的酶组成ー个复合体。复合体中第一个酶催化的产物作为底物直接被第二个酶催化，第二个酶催化的产物又为复合体下一个酶的底物，如此进行连续的催化反应，使催化效率显著提高并有机协调着一系列酶反应之间的平衡。多酶体系在催化过程中表现出的高效率和高度协调性，为后续人工构建多酶反应体系、优化改造生物催化过程提供了借鉴。 多酶体系共固定和共反应已成为ー个活跃的研究領域，近年来已引起了国内外众多酶工程专家的极大兴趣。固定化多酶和普通固定化酶相比，具有以下优点不同酶的催化特性被有机结合起来，使得单ー酶的应用范围扩大；催化反应中，前一种酶的产物作为底物被后一种酶催化，反应过程中由于非搅拌层的存在，使得中间产物到本体溶液的扩散受阻，造成非搅拌层内底物有效浓度较高，反应速度加快，提高了固定化酶的催化效率；反应中，由于产物抑制的减少，逆反应速率大大降低，使反应本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种多酶体系的仿生固定化方法，其特征为包括以下步骤：1）前驱体溶液的制备：在室温下将TMOS（正硅酸甲酯）加入到1？mmol/L的HCl溶液中，TMOS完全溶解、澄清后再加入pH=5？9磷酸缓冲液，混匀；其物料配比为体积比：？TMOS：？HCl溶液：磷酸缓冲液=0.6？：4.4：5；2）固定化酶的制备：将多酶（葡萄糖氧化酶和α？淀粉酶）溶液与PDADMA（6？mg/mL）溶液均匀混合，其配比为体积比：多酶（葡萄糖氧化酶和α？淀粉酶）溶液：PDADMA溶液=1:1，得到含酶溶液A；在30？℃恒温条件下，取上步预处理过的前驱体溶液加入到溶液A中，其配比为：前驱体溶液：酶溶液A体积比=1:10，立即...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：高静，王洪武，姜艳军，
申请(专利权)人：河北工业大学，
类型：发明
国别省市：