本发明专利技术公开了一种泌尿生殖道支原体分型检测试剂盒，包括：（1）一个基因芯片，其上带有：（ⅰ）不同种的支原体的核苷酸探针，其中探针至少是一个选自SEQIDNos:1-11和与SEQIDNos:1-11互补的序列；（ⅱ）标记有生物素点的DNA序列，序列为SEQIDNo.12;（ⅲ）带有编码β-actin蛋白部分的DNA序列，作为内控点，序列为SEQIDNo.13;（2）各种引物，用于扩增临床样本中的DNA序列，选自SEQIDNos:14-22。本发明专利技术试剂盒能快速、准确地检测出泌尿生殖道致病支原体感染及感染的类型，对于泌尿生殖道疾病的诊断和治疗具有重要的意义。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及基因领域，具体是一种泌尿生殖道支原体分型检测试剂盒。
技术介绍
性传播疾病是一类严重危害人类健康的疾病。我国近20多年来，性传播疾病病例逐年增高，其中以支原体感染率的增高尤为显著。支原体是一类大小介于细菌与病毒的能在体外培养基中生长繁殖的最小的微生物，广泛存在于动物、植物和人类。已确定的对人类有致病性的支原体主要有7种,它们是肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae, Mpn)、解脲支原体(Ureaplasma urealyticum, Uu)、人型支原体(Mycoplasma hominis, Mh)、生殖支原体(Mycoplasma genitalium, Mg)、发酵支原体(Mycoplasma fermentans, Mf)、穿通支原体 (Mycoplasma penetrans, Mpe )和梨支原体(Mycoplasma pi rum, Mpi ),均可通过性传播而导致男女泌尿生殖系统感染。支原体感染后可导致各种妇科炎症及非淋菌性尿道(阴道)炎(Nongonococcalurethritis，NGU)、附件炎、子宫内膜炎、绒毛膜羊膜炎及各种不良妊娠结局(自然流产、胎膜早破、早产、低体重新生儿)和男性不育、附睾炎、前列腺炎等，还可通过胎盘感染胎儿，使新生儿受累，发生新生儿肺炎、脑膜炎、败血症等。此外发现Mpe、Mf、Mpi能增强HIV的复制，促进HIV的细胞毒作用，导致HIV感染进一步发展，也可引起全身感染、多器官功能衰竭及急性呼吸窘迫呼吸症，因此被认为是AIDS相关支原体。解脲支原体(Ureaplasma urealyticum, Uu)分为两个生物群和14种血清型，即U. parvum (以前的 Biovarl/parvum 群，包括血清型 1、3、6、14)和 U. urealyticum (以前的Biovar2/T960群，包括血清型2、4、5、7 13)。有研究指出由于不同血清型的Uu毒力不同，其致病性亦不同，U. urealyticum或U. parvum多种血清型的混合感染更容易致病。临床上检出不同生物群Uu的治疗与否、不同生物群Uu菌株体外抗菌药物敏感性及临床治疗过程中抗菌药物的合理选择等一系列方面都可能存在差异，故有必要在临床检验中对Uu进行生物分型。目前支原体检测方法有形态学检查法、培养法、免疫学方法和分子生物学方法。培养法是检测支原体的金标准，但是培养的要求较高且培养的周期较长，并且由于培养基易被杂菌污染，故在临床普及较困难。生殖支原体的临床分离培养更困难。免疫技术要有特异的抗血清，而且易出现交叉反应。PCR技术本身的优越性是无可厚非的，但是使用不当很容易引起交叉污染，出现假阳性；如果反应条件控制不好也可能出现假阴性。以上的检测方法除了自身固有的缺陷外，最大的问题就是只能检测一种特定的支原体，而引起泌尿生殖道感染的支原体多为混合感染。各种支原体的耐药性不一样，为临床治疗带来困难。因此研制和开发一种特异性强、敏感性高同时又快速、经济，能同时检验多种支原体的支原体分型检测方法显得尤为重要，对性传播疾病和艾滋病的诊断和治疗起着重要的作用。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种能简单、快速和准确检测7种致病支原体解脲支原体(Uu)、人型支原体(Mh)、生殖支原体(Mg)、肺炎支原体(Mpn)、穿通支原体(Mpe)、梨支原体(Mpi )、发酵支原体(Mf )，并能对解脲支原体进行血清分型的泌尿生殖道支原体分型检测试剂盒。本专利技术的一种泌尿生殖道支原体分型检测试剂盒，包括 (1)一个基因芯片，其上带有 (i )不同种的支原体的核苷酸探针，其中探针至少是一个选自SEQ ID N0S:1-11和与SEQ ID Nos: 1-11互补的序列，探针序列如下名称序列序列号 Mpe-P 5' -atagctcaaacttcaaccgtgt-31(SEQ ID No. I) Mpi-P 5' -ggactgcaatgcgaacact-3!(SEQ ID No. 2) Mpn-P 5' -actcagctaatatctggcatctc-3!(SEQ ID No. 3) Mf-P 5f -attagactatgaatacatgaacg-3!(SEQ ID No. 4) Mh-P 5! -acctgcatcatcgcatgcaa-3!(SEQ ID No. 5) Mg-P 5' -gacgcattcgctcgctaca-3!(SEQ ID No. 6) Uuu-P 5! -gtaatatctaaacatagatataacaact-3! (SEQ ID No. 7) Uupl-P 5! -actatcataattaatatagataataaact-3! (SEQ ID No. 8) Uup3-P 5r -gttaatagattagcttatcttactgaat-3! (SEQ ID No. 9)Uup6_P 5! - tattgtaactattatttaatataataaatc-3! (SEQ ID No. 10) Uupl4-P 5' -gtgatataatagttaagtaaaatatt-3!(SEQ ID No. 11) (ii)标记有生物素点的DNA序列(Bio)，用于监控杂交是否成功，序列为SEQIDNo. 12 Bio 5! -cgtccaaggggaaactgatct-3! (SEQ ID No. 12); (iii)带有编码β-actin蛋白部分的DNA序列(1C)，作为内控点，用于监控PCR体系是否成功，序列为SEQ ID No. 13 IC5' -cacgagattcacaatgctca-3!(SEQ ID No. 13); (2)各种引物，用于扩增临床样本中的DNA序列，选自SEQID Nos:14-22,其序列分别如下 (i)用于扩增Uuu、UupUUup3、Uup6、Uupl4的引物，针对支原体DNA的multiplebanded antigen gene 设计，其序列为 SEQ ID Nos: 14 -17 MBA-F 5' -gatatgcattctttatatattgtct-3! (SEQ ID No. 14) MBA-R 5, -atttgttrttttcarctgagttac-3! (SEQ ID No. 15) Uuu-R 5' -actaactgctcccactcc-3!(SEQ ID No. 16) Uup-R 5! -gcactccaaccgaagtaccaat-3! (SEQ ID No. 17) (ii)用于扩增Mh的引物，针对支原体DNA的16SrRNA基因设计，其序列为SEQ IDNos:18-20 Myco-F 5' -gtacctgkgatgaacctg-3!(SEQ ID No. 18) Mh_F2 5' -cctgtgcaatgagagatccga-3! (SEQ ID No. 19)Mh-R2 5' -agttgtaccactgcactgc-3'(SEQ ID No. 20) (iii)用于扩增Mg、Mpn、Mp本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种泌尿生殖道支原体分型检测试剂盒，包括：（1）一个基因芯片，其上带有：（ⅰ）不同种的支原体的核苷酸探针，其中探针至少是一个选自SEQ？ID？Nos:1？11和与SEQ？ID？Nos:1？11互补的序列；（ⅱ）标记有生物素点的DNA序列，序列为SEQ？ID？No.12;（ⅲ）带有编码β？actin蛋白部分的DNA序列，作为内控点，序列为SEQ？ID？No.13;？？？？？？（2）各种引物，用于扩增临床样本中的DNA序列，选自SEQ？ID？Nos:14？22,其序列分别如下：（ⅰ）用于扩增Uuu、？Uup1、？Uup3、？Uup6、？Uup14的引物，针对支原体DNA的multiple？banded？antigen？gene？设计，其序列为SEQ？ID？Nos:14？？17；？？？（ⅱ）用于扩增Mh的引物，针对支原体DNA的16S？rRNA基因设计，其序列为SEQ？ID？Nos:18？20；（ⅲ）用于扩增Mg、Mpn、Mpe、Mpi的引物，针对支原体DNA的16S？rRNA基因设计，其序列为SEQ？ID？No.18和SEQ？ID？No.21；（ⅳ）用于扩增Mf的引物，针对支原体DNA的16S？rRNA基因设计，其序列为SEQ？ID？No.18和SEQ？ID？No.22；其中r表示a或g，k表示g或t，y表示c或t。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：陈伟坚，梁秋菊，谢龙旭，
申请(专利权)人：广东凯普生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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