甘蔗赤腐病菌PCR检测方法技术

技术编号:8188183 阅读:182 留言:0更新日期:2013-01-09 23:52
本发明专利技术涉及一种甘蔗赤腐病菌PCR检测方法,包括基因组DNA的提取、PCR检测体系建立和PCR产物的检测。本发明专利技术的甘蔗赤腐病菌PCR检测方法,具有灵敏度高,所需要的DNA用量少的特点;与常规的根据病菌培养后的孢子形态特征鉴定或根据田间种植后病害表型症状鉴定的方法相比,具有操作简便快速、准确性高和实用性好等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及ー种甘蔗病原菌的检测方法,具体涉及甘蔗赤腐病菌PCR检测方法,属于生物

技术介绍
甘蔗赤腐病属真菌性病害,分布于世界各蔗区。病原无性阶段为铼孢炭疽菌{Colletotrichum falcatum),主要危害甘鹿鹿莖,也危害叶中脉和叶鞘,并可导致植株死亡。该病可造成甘蔗减产,因品种抗病性而不同,严重时减产可达30%以上,并导致蔗糖份显著下降,同时,蔗茎病部的红色素和蔗茎的腐烂都会严重影响糖的质量。甘蔗赤腐病菌可以分生孢子盘和菌丝体在枯叶、宿根或蔗渣中,尽管甘蔗赤腐病 菌不能由土壤传播,但在土壌中可存活1-2个月,因此,甘蔗种茎带菌和甘蔗收获后田间植株残材是病原最初的来源。蔗茎伤ロ、虫孔和生长裂缝等是病原侵入的主要通道,对于健康植株,病原主要由叶痕、根点、生长环和芽等侵入,病原借助雨水、重露水、灌溉和风进行传播。因此,在做好田间卫生的前提下,种茎是否带菌就成为该病害发生的关键,快速、准确判断种茎是否带菌就显得尤为重要。目前,一般采取两种方法判断种茎是否带菌一种是采用分离培养技术,在建立纯培养物的基础上,根据培养物所产生孢子的形态特征进行鉴定;另ー种是基于该病害本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种甘蔗赤腐病菌PCR检测方法,包括基因组DNA的提取、PCR检测体系建立和PCR扩增产物的检测,其特征在于:?(1)PCR检测体系的建立:?PCR扩增体系为总体积25?μl,内含2.5?μl?10×PCR缓冲液,2.5?μl?25?mmol/L?MgCl2,0.5?μl?10?mmol/L?dNTP,10?mmol/L?的检测引物PCR?F和PCR?R各1.0?μl,1.25?U?Taq?DNA?Polymerase,20?50?ng基因组DNA,ddH2O补足到25?μl;?PCR扩增程序如下:94?℃?4?min;94?℃?1?min,65?℃?45?s,72?℃?1?min,35个循环...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:阙友雄许莉萍黄宁徐景升袁照年罗俊
申请(专利权)人:福建农林大学
类型:发明
国别省市:

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