一种利用实时定量反转录PCR监测IVF胚胎培养液质量的反转录反应体系制造技术

本发明专利技术提出一种利用实时定量反转录PCR监测IVF胚胎培养液质量的反转录反应体系。所述监测培养液质量的方法是利用实时定量反转录PCR分析IVF单个植入前胚胎的基因表达来进行IVF胚胎培养液的质量监测，所述反转录PCR分析IVF单个植入前胚胎的基因表达方法包括步骤：标本收集及纯化；反转录反应；反转录阴性对照和阳性对照；RT产物进行实时定量PCR检测；使用组织细胞RNA进行优化PCR条件；在该条件下同时放大扩增阴性对照和阳性对照；采用相对定量的方法检测目的基因的表达量；以及进行统计学分析。这种改良的实时定量反转录PCR技术非常敏感，高度精确，同时能产生可观的资料。利用这种方法，可以弥补Microarray的不足，对分析单个关键基因在单个细胞的表达和在IVF科研与临床上有非常广泛的应用价值。此方法为确定新的IVF和体外胚胎培养培养液的条件提供了一个重要的监测手段。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种IVF(In Vitro Fertilization,试管受精)胚胎培养液的质量监测方法，特别涉及以一种利用改良实时定量反转录PCR (Polymerase Chain Reaction,聚合酶链式反应)技术分析IVF单个植入前胚胎的基因表达来进行IVF胚胎培养液质量中的反转录反应体系。
技术介绍
1978年7月25日，世界上第一个成功的“试管”婴孩(IVF，体外受精)路易丝喜悦布朗，在英国出生。从此，IVF为全球超过占10%的不孕症夫妇带来了福音。专利技术IVF的英国科学家罗伯特爱德华兹教授被授予2010年诺贝尔医学生理学奖。然而，三十多年的临 床实践并没有显著提高IVF的成功率。如，2011年，美国妊娠协会统计35岁病人IVF成功率(受孕率)在25-30%左右，而1997年也在30%左右。而婴儿出生率更低。其中一个重要的原因是IVF胚胎培养液的质量。这是IVF胚胎质量最重要的决定性因素之一。目前，选择植入母体的囊胚期胚胎主要是根据胚胎的形态学特性。而迄今尚未有一种特殊的生物学标记及监测手段来确定培养液和胚胎质量。胚胎质量与胚胎学家的经验密切相关。这种人为的选择本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用实时定量反转录PCR监测IVF胚胎培养液质量的反转录反应体系，所述监测方法是利用实时定量反转录PCR分析IVF单个植入前胚胎的基因表达来进行IVF胚胎培养液的质量监测，所述反转录PCR分析IVF单个植入前胚胎的基因表达方法包括步骤：标本收集及纯化；反转录反应；反转录阴性对照和阳性对照；反转录产物进行实时定量PCR检测；使用组织细胞RNA进行优化PCR条件；在该条件下同时放大扩增阴性对照和阳性对照；采用相对定量的方法检测目的基因的表达量；以及进行统计学分析；其特征在于，所述反转录反应体系为：模板1.3μl，反转录酶2.5U，随机引物2.5μM，dNTPs？0.5μM，Mg++4mM，RN...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：金星亮，白丽君，常菁，
申请(专利权)人：江苏迈健生物科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：