使用参考封闭序列的全COLD-PCR富集制造技术

本发明专利技术涉及用于富集样品中低丰度等位基因的方法、组合物和软件。具体来说是涉及在扩增反应混合物中使用过量的参考封闭序列以改进全COLD-PCR的富集效率并减少其循环时间。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及对核酸样品中低丰度靶序列(例如突变)的扩增和富集的改进。具体来说，本专利技术涉及在全COLD-PCR(在较的变性温度下共扩增)过程中使用参考封闭序列。
技术介绍
在遗传分析中经常遇到的情况表明需要在存在大量过量的非变体序列(“参考序列”)下鉴定低百分比的变体DNA序列(“靶序列” )。这种情况的实例包括(a)在存在大量过量的正常等位基因下鉴定及测序几个突变的等位基因；(b)表观遗传分析中在存在大量过量的非甲基化等位基因下鉴定几个甲基化的等位基因(或反之亦然)；(c)在线粒体DNA中检测低水平的异质性；(d)在病毒感染中检测耐药性类物种和(e)在存在大量过量的野生型等位基因下鉴定癌症患者血液中的肿瘤循环DNA(其中该人疑似患有癌症，以跟踪癌症治疗的成功或检测复发)。本申请的专利技术人之前已描述用于富集样品PCR反应混合物中的低丰度等位基因的浓度的COLD-PCR方法；见由Gerassimos Makrigiorgos转让给本专利技术受让人的题为“革巴序列的富集”的公开PCT专利申请(其国际申请号为PCT/US2008/009248，现在为美国编号12/671295)。所本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：G·马克里吉奥古斯，
申请(专利权)人：达纳法伯癌症研究院有限公司，
类型：
国别省市：