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低分子量五味子多糖及其制备方法和用途技术

技术编号:7932818 阅读:170 留言:0更新日期:2012-10-31 23:40
本发明专利技术公开了低分子量五味子多糖及其制备方法和用途,属于医药技术领域。该多糖组分的分子量为3.4×103Da;单糖组成为甘露糖︰葡萄糖︰半乳糖=1︰11.38︰3.55;具有(1→3)-α–glucan(葡聚糖)和三螺旋结构。本发明专利技术的SCPP11多糖组分的体内抗肝癌活性表明,其具有显著地抗肝癌(HepG-2)活性,可显著抑制肝癌的生长,并与5-Fu相比,该多糖组分毒性低,可显著增强小鼠自身免疫能力和体内抗氧化活性。本发明专利技术水溶性低分子量五味子多糖活性成分明确,质量可控,可用作抗肝癌药物或提高机体免疫功能的保健品。?

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医药
,涉及一种低分子量五味子多糖的制备方法及其在抗肝癌和提高机体免疫力方面的应用。
技术介绍
恶性肿瘤是世界公认的对人类健康危害最严重的疾病之一,其危害程度仅次于心血管疾病。据国际癌症研究机构GL0B0CAN 2008统计报告报道(Jemal,A.,Bray, F.,Center, M. M. , Ferlay, J. , Ward,E., Forman,D.. Global Cancer Statistics. CA A CancerJournal for Clinicians. 2011,61 (2) ,69-90 ;GL0B0CAN 2008, Cancer Incidence andMortality Worldwide :International Agency for Research on Cancer ;Available at http://globocan. iarc. fr/.), 2008年,全球有1270万新发癌症病例,760万人死于癌症, 预测2030年,癌症死亡病例预计上升72%,死亡人数由2008年的760万上升至1300万人。可见,恶性肿瘤已是当今世界影响社会发展的重大问题之一。肝癌是常见的恶性肿瘤疾病,据统计(GL0B0CAN 2008, Cancer Incidence and Mortality Worldwide :InternationalAgency for Research on Cancer ;Available at http: //globocan. iarc. fr/. ) 2008 年全球有69. 4万人死于肝癌,其死亡率在全球范围内排第三位,且肝癌的发病率有增长趋势。治疗肿瘤的药物很多,但由于肿瘤细胞与正常组织细胞间缺少根本性的代谢差异,大多数抗肿瘤药在抑制或杀伤肿瘤细胞的同时也会对机体的某些正常细胞、组织和器官造成损害,对人体产生毒性,在很大程度上制约了药物的使用。因此,研究开发高效低毒抗肿瘤药物是当前研究的重点课题之一。多糖是一种天然高分子化合物,具有抗肿瘤、免疫调节、抗氧化等多种活性,且毒性低、安全性高,有着很好的抗肿瘤药物应用前景(庞春红.多糖药理作用研究进展.浙江中医药大学学报,2011,35(4) :639-640.)。于荣敏等申请了专利“一种具有抗肿瘤作用的红豆杉多糖的制备方法及用途”(申请号200910192993. 6),发现不同浓度的红豆杉多糖溶液对多种癌细胞(人乳腺肿瘤细胞MCF-7、人纤维瘤细胞HT1080、人宫颈癌细胞Hela、人慢性髓性细胞K562、人前列腺癌细胞PC3、人肝癌细胞SMMC7721、人急性早幼粒白血病细胞HL-60)均具有抑制作用,且抑制作用与浓度呈线性关系。朱振元等申请的专利“一种具有抗肿瘤活性的水溶性低分子虫草多糖及其制备方法和用途”(申请号200910070325. 6),发现该多糖对人肝癌细胞株Bel-7204和人胃癌细胞株SGC-7901的增殖有显著地抑制效果,对植入小鼠体内的S180肿瘤细胞的生长具有明显的抑制作用,并可提高机体免疫功能。五味子为木兰科五味子(Schisandra chinensis (Turcz. )Baill,俗称北五味子)或华中五味子(S. sphenanthera Rehd. et Wils,俗称南五味子)的干燥成熟果实,因其果实甘、酸、辛、苦、咸五味,故名五味子,又名五梅子、玄及、会及、山花椒等。具有收敛固涩、益气生津和补肾宁心之功效,用于久咳虚喘、梦遗滑精、遗尿尿频、久泻不止、自汗、盗汗、津伤口渴和心悸失眠等症,为中医常用滋阴强肾药,广泛应用于肝炎、神经衰弱等病的治疗。五味子资源丰富,含有木脂素、多糖、挥发油等多种活性成分,是一种开发前景广阔的药食兼用的中药材。多糖作为五味子中重要活性成分之一,现代药理学研究表明,其具有抗肿瘤、免疫促进、升白细胞、保肝、抗衰老和降血糖等多种药理作用(闻舒,仰榴青,赵婷,赵江丽,邹艳敏.五味子多糖的最新研究进展.江苏大学学报,(医学版),2009,19 (4)366-368.),已成为人们关注的焦点。朱蓓薇等申请的专利“五味子活性成分多糖的制备方法”(申请号200710159047. 2),提供了一种从五味子中提取活性成分多糖的方法。于赫等研究发现五味子粗多糖具有体内抗肿瘤活性,且可提高荷瘤小鼠的机体免疫。(于赫,李冀,齐彦.五味子多糖对肝癌小鼠肿瘤生长的抑制作用及其免疫学机理初探.中医药信息,2010,27 (2) :26-27 ;于赫,李冀,王艳杰.五味子多糖对H22荷瘤小鼠血清IL-2、IL-10和VEGF表达的干预作用研.中医药学报2010,38 (2) :39-41 ;于赫,李冀,李淑莲五味子多糖对H22荷瘤小鼠血清Zn、Se水平变化的于预作用研究.中医药信息,2010,27 (3) :25-26.)。许河玉等发现一种纯五味子多糖(含量60. 3mg/g)可在细胞水平上有效地抑制survivin表达,增加细胞的凋亡率(许珂玉,肖建英.味子多糖对甲状腺癌细胞株SW579凋亡及survivin表达的影.吉林大学学报,2011,37 (2) :279-284.)。本专利技术人对五味子多糖进行分离纯化,确定多糖组分的结构特征,研究五味子多糖纯化组分体内抗肝癌(HepG-2)活性。但目前有关五味子多糖纯化组分体内抗人肝癌细胞H印G-2的研究未见国内外文献报 道,也未见相应专利公开。
技术实现思路
基于以上
技术介绍
中存在的不足,本专利技术的目的在于提供一种具有肿瘤治疗作用的中草药有效部位-低分子量五味子多糖组分的制备方法与其药物应用。一、本专利技术的第一个目的在于提供一种低分子量五味子多糖组分(SCPPll)。—种低分子量五味子多糖(SCPPll),该多糖分子量为3. 4X IO3Da ;单糖组成为甘露糖(man)葡萄糖(glu)半乳糖(gal) = I 11.38 3. 55 ;该多糖具有a -糖苷键和P -糖苷键;该多糖具有(I — 3)-a _glucan(葡聚糖);该多糖具有三股螺旋结构。二、本专利技术的第二个目的在于提供上述低分子量五味子多糖组分(SCPPll)的制备方法,按照下述步骤进行(I)五味子粗多糖的提取方法将原料水洗,60°C烘干,粉碎,并置索氏提取器中,石油醚(馏程60-90°C)脱脂15h,过滤,滤渣60°C烘干,备用;脱脂五味子粉末以料液比I : 8-1 12,在温度80-100°C水中提取3-5h,提取1-3次,合并上清液,上清液经浓缩后,加入乙醇醇沉,使得多糖的浓缩液中乙醇浓度为80%,所得沉淀离心、经冷冻干燥24-48h后得五味子粗多糖;取五味子粗多糖适量,复溶后使用三氯乙酸法除蛋白,除蛋白后的糖液透析冻干,得到脱蛋白五味子多糖。(2)低分子量五味子多糖的制备取脱蛋白五味子多糖,用适量水溶解,离心除去不溶物,上清液通过DEAE-52离子交换柱进行分离;逐步以0-0. 2mol/L的NaCl水溶液洗脱,用硫酸-苯酚法绘制洗脱曲线,根据洗脱曲线分别收取合并洗脱液,其中Omol/L NaCl水溶液(即水)的洗脱液经浓缩、透析后,上葡聚糖凝胶柱,以0. lmol/L NaCl水溶液洗脱,本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种低分子量五味子多糖,其特征在于该多糖分子量为3.4×103?Da;单糖组成为:甘露糖(man)?:?葡萄糖(glu)?:?半乳糖(gal)?=?1?:?11.38?:?3.55;该多糖具有α?糖苷键和β?糖苷键;该多糖具有(1→3)???α?–葡聚糖(glucan);该多糖具有三股螺旋结构。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:仰榴青赵婷吴向阳邹烨茆广华李芳任月娜
申请(专利权)人:江苏大学
类型:发明
国别省市:

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