一种从羊肚菌子实体中提取水溶性β葡聚糖的方法技术

本发明专利技术公开了一种从羊肚菌子实体中提取水溶性β葡聚糖的方法，通过制备羊肚菌粗多糖，制备羊肚菌β葡聚糖，制备水溶性β葡聚糖等步骤制成；本发明专利技术提取方法所得到羊肚菌子实体多糖是除去了α构型多糖的β葡聚糖，并且种β葡聚糖具有良好的水溶性。红外光谱显示本发明专利技术产物为β葡聚糖，硫酸苯酚法检测多糖含量大于50%，多糖平均分子量2000-200000道尔顿不等。有技术中虽然有对羊肚菌菇的某一种构型进行了分离并且进一步纯化得到了高纯度多糖，但是其分离方法与本发明专利技术有本质区别，本发明专利技术通过酸水解，水复溶的方法控制羊肚菌多糖的分子量在一定范围内增强了羊肚菌多糖的水溶性，提高了羊肚菌多糖大分子量段的收率，有利于工业化生产羊肚菌β水溶性多糖。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及及其产品。属于中药的活性成分提取领域。
技术介绍
本专利技术涉及及其产品。属于中药的活性成分提取领域。
技术介绍
羊肚菌又名羊肚菜、羊肚蘑、编笠菌，为羊肚菌科真菌羊肚菌、小顶羊肚菌、尖顶羊肚菌、粗柄羊肚菌、小羊肚菌等的子实体。是一种珍贵贵的食用菌和药用菌。其结构与盘菌相似，上部呈褶皱网状，既像个蜂巢，也像个羊肚，因而得名。羊肚菌的营养相当丰富，据测定，羊肚菌含粗蛋白20%、粗脂肪26%、碳水化合物38.1%，还含有多种氨基酸，特别是谷氨酸含量高达1.76%。因此，有人认为是“十分好的蛋白质来源”，并有“素中之荤”的美称。人体中的蛋白质是由20种氨基酸搭配而组成的，而羊肚菌就含有18种，其中8种氨基酸是人体不能制造的，但在人体营养上显得格外重要，所以被称之为“必需氨基酸”。另外，据测定羊肚菌至少含有8种维生素:维生素Β1、维生素Β2、维生素Β12、烟酸、泛酸、吡哕醇、生物素、叶酸等。羊肚菌的营养成份，可与牛乳、肉和鱼粉相当。因此，国际上常称它为“健康贪品”之一。羊肚菌含抑制肿瘤的多糖，抗菌、抗病毒的活性成分，具有增强机体免疫力、抗疲劳、抗病毒、抑制肿瘤等诸多作用；日本科学家发现羊肚菌提取液中含有酪氨酸酶抑制剂，可以有效地抑制脂褐质的形成。羊肚菌所含丰富的砸是人体红细胞谷胱甘肽过氧化酶的组成成分，可运输大量氧分子来抑制恶性肿瘤，使癌细胞失活；另方面能加强维生素Ε的抗氧化作用。砸的抗氧化作用能改变致癌物的代方向，并通过结合而解毒，从而减少或消除致癌的危险。随着羊肚菌的应用越来越广泛，羊肚菌的活性成分提取成为了一个比较热门的课题。羊肚菌多糖是羊肚菌的主要活性成分之一，对于羊肚菌多糖的提取液已经有了一些报道，比如在实验室条件下魏芸，张天佑的羊肚菌多糖的分离纯化及组成结构分析，植物资源与环境学报，2000 ;贾建会等的深层发酵羊肚菌多糖的提取、分离及纯化研究，食品科学，2002等都对羊肚菌多糖的提取进行了研究，提取方法表述的也各不相同。但是这些文献都只是实验室条件下对羊肚菌总多糖的提取，距离实际生产还有一定的差距。羊肚菌多糖在羊肚菌中以α和β两种构型共存，目前对于羊肚菌总多糖的工艺研究的文献都没有提到这两种构型的分离，仅仅是从提取总多糖本身入手。多糖分子量从几千到几百万不等，分子量越大其水溶性越差，羊肚菌多糖也不例外。羊肚菌多糖大分子量部分水溶性较差，在分离提取中用水做溶剂很难提取完全，即使使用碱液提取，虽然提取率高，但是干燥后得到多糖产品应用时仍然不溶解于水。人体对于这种大分子羊肚菌多糖吸收不好。
技术实现思路
本专利技术主要解决的技术问题为:1、羊肚菌子实体中提取β葡聚糖的工业化生产问题。现有技术提取通常提取的是总多糖，而本专利技术的方法提取得到了 β葡聚糖，并可应用于工业生产。2，解决β葡聚糖的水溶性问题，更有利于羊肚菌β葡聚糖的吸收利用和产品开发。分子量大的葡聚糖不溶于水本专利技术利用酸水解技术降低了大分子量羊肚菌多糖的分子量。提高了羊肚菌多糖的收率，增加了水溶性，更有利于人体吸收。为了解决上述技术问题，本专利技术的目的在于提供一种从羊肚菌菇子实体中提取水溶性β葡聚糖的方法。—种从羊肚菌子实体中提取水溶性β葡聚糖的方法，其特征在于:包括以下步骤: 步骤1、制备羊肚菌粗多糖: 取羊肚菌子实体，粉碎得到粉末，粉末用碱液浸提，过滤除去残渣，滤液中加入乙醇，静置，过滤得到沉淀，得羊肚菌粗多糖； 步骤2、制备羊肚菌β葡聚糖: 取羊肚菌粗多糖，干燥后加水搅拌，加入α淀粉酶水解，水解液过滤，弃去滤液，得到残渣，得羊肚菌β葡聚糖； 步骤3、制备水溶性β葡聚糖: 取羊肚菌β葡聚糖，加碱液搅拌提取，提取液调酸碱度至ΡΗ2.0-6.8，加热水解，水解液过滤，滤液中加入乙醇，静置，分离沉淀并干燥，得到水溶性β葡聚糖。所述步骤1中，将羊肚菌子实体粉碎后过50目的筛，得到粉末。所述步骤1中，向粉末中加入5-20倍重量的碱液浸提取1-10小时，所用碱液的浓度优选是0.1-1.0摩尔/升。所述步骤1中，过滤采用滤布进行过滤，其中滤布孔径为0.5-5微米。所述步骤1或步骤3中，向滤液中加入1-4倍体积的无水乙醇静置2小时。所述步骤2中，羊肚菌粗多糖干燥后加5-10倍重量的水搅拌，充分溶解。所述步骤3中，碱液浓度是0.1-0.4摩尔/升；所述的加热水解优选为加热至80_100°C，水解时间为1-4小时。本专利技术的提取方法的具体描述: 羊肚菌子实体粉碎得到粉末，粉末用碱液浸提，过滤除渣，滤液中加入乙醇，静置，过滤得到沉淀；此沉淀即羊肚菌粗多糖。羊肚菌β葡聚糖是羊肚菌粗多糖的一部分，其相当一部分位于真菌的细胞壁上，为了最大限度的提取羊肚菌β葡聚糖，本专利技术选择碱液提取，碱液加量为原料重量的5-20倍，碱液的浓度选取0.1-1.0摩尔/升中任一浓度均可，提取时间1-10小时。碱液可以用氢氧化钠，氢氧化钾，氢氧化锌，有机碱等配制，考虑到成本问题，碱液一般选取氢氧化钠溶液。提取液过滤除去残渣，滤液加1-4倍体积的无水乙醇，静置2小时后过滤得沉淀即羊肚菌粗糖。沉淀干燥后加水搅拌，而后加α淀粉酶水解，水解液过滤，弃去滤液得残渣。此步的残渣即羊肚菌β葡聚糖但水溶性较差。此步骤采用上一步中的沉淀(羊肚菌粗多糖)为原料，加α淀粉酶(因为不同厂家产品酶活力不一样，加量相差巨大，本领域技术人员可根据实际情况和酶的活力确定加入α淀粉酶的用量；用量多一点或者少一点不影响本专利技术的效果)将水不溶解的α构型多糖水解变为可溶，弃去水解液，同时水解液也溶解了粗多糖中的大部分残留单糖和寡糖，起到纯化的作用，虽然水解液中也可能存在少量β葡聚糖，但是考虑到回收成本，故舍去。仅对残渣中的大量β葡聚糖进行下一步处理使其变为可溶解。α淀粉酶选取市售的各种型号均可。水解条件，酶用量依据各厂家不同型号的α淀粉酶说明书。残渣加碱液搅拌提取，提取液调酸度至ρΗ2.0-6.8，加热水解，水解液过滤，滤液中加入乙醇，静置，分离沉淀并干燥，即得。采用步骤b)的残渣为原料，加碱液提取，碱液加量为原料重量的5-20倍，提取液调酸碱至PH2.0-6.8，80-100°C加热水解1_4小时，水解液过滤，滤液加1_4倍体积的无水乙醇进行沉淀，分离沉淀干燥后即本专利技术产物，也就是羊肚菌菇水溶性β葡聚糖。碱碱液可以用氢氧化钠，氢氧化钾，氢氧化锌，有机碱等配制，优选氢氧化钠，液浓度选取0.1-1.0摩尔/升中任一浓度均可。pH可以用盐酸、醋酸、硫酸、乙酸等。pH2.0-6.8中任何一个值均可，只是不同的pH，水解强度不同，水解后所得最终产物重均分子量不同。现有技术中虽然有对羊肚菌菇的某一种构型进行了分离并且进一步纯化得到了高纯度多糖，但是其分离方法与本专利技术有本质区别，在经过常规的水提醇沉后现有方法多使用柱层析对粗多糖分离，截去粗多糖中某一特定部分得到高纯度的羊肚菌多糖以用于科学研究，这和本专利技术的工业化方法有显著区别，并且本专利技术除了对羊肚菌多糖的β构型进行分离提取外，还通过对羊肚菌多糖的分子量控制提高了其水溶性。本专利技术通过酸水解，水复溶的方法控制羊肚菌多糖的分子量在一定范围内增强了羊肚菌多糖的水溶性，提高了羊肚菌多糖大分子量段的收率，有利于工业化生产羊肚菌β水溶性多糖。本专利技术提取方法所得到羊肚菌子实本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从羊肚菌子实体中提取水溶性β葡聚糖的方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤1、制备羊肚菌粗多糖：取羊肚菌子实体，粉碎得到粉末，粉末用碱液浸提，过滤除去残渣，滤液中加入乙醇，静置，过滤得到沉淀，得羊肚菌粗多糖；步骤2、制备羊肚菌β葡聚糖：取羊肚菌粗多糖，干燥后加水搅拌，加入α淀粉酶水解，水解液过滤，弃去滤液，得到残渣，得羊肚菌β葡聚糖；步骤3、制备水溶性β葡聚糖：取羊肚菌β葡聚糖，加碱液搅拌提取，提取液调酸碱度至pH2.0—6.8，加热水解，水解液过滤，滤液中加入乙醇，静置，分离沉淀并干燥，得到水溶性β葡聚糖。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈喜军，
申请(专利权)人：黑龙江众生生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23