一种从桑黄子实体中提取水溶性β葡聚糖的方法技术

本发明专利技术公开了一种从桑黄子实体中提取水溶性β葡聚糖的方法，通过制备桑黄粗多糖，制备桑黄β葡聚糖，制备水溶性β葡聚糖等步骤制成；本发明专利技术提取方法所得到桑黄子实体多糖是除去了α构型多糖的β葡聚糖，并且种β葡聚糖具有良好的水溶性。红外光谱显示本发明专利技术产物为β葡聚糖，硫酸苯酚法检测多糖含量大于50%，多糖平均分子量2000-200000道尔顿不等。有技术中虽然有对双孢菇菇的某一种构型进行了分离并且进一步纯化得到了高纯度多糖，但是其分离方法与本发明专利技术有本质区别，本发明专利技术通过酸水解，水复溶的方法控制双孢菇多糖的分子量在一定范围内增强了双孢菇多糖的水溶性，提高了双孢菇多糖大分子量段的收率，有利于工业化生产双孢菇β水溶性多糖。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及及其产品。属于中药的活性成分提取领域。
技术介绍
桑黄Phellinusigniarius(L.exFr.)，桑黄的成分极其复杂，除含大量多糖类物质夕卜，还含β葡聚糖、几丁质(壳聚糖)、杂多糖(果胶、半纤维素、多糖醛酸等膳食纤维)等成分，在肠道中有促进有害物质及胆固醇排泄的作用。此外，桑黄还具有抗衰老、降低胆固醇、护肝和抗肝硬化等药理作用，而这些药理作用恰恰是备受制药界青睐的。桑黄及其人工培养菌丝体的另一重要应用领域为治疗脂肪肝以及病毒性肝炎引起的肝硬化。日本和韩国早已将桑黄微粉胶囊用于临床治疗脂肪肝或肝纤维化等肝病，其疗效十分显著。据了解，桑黄子实体含有异常丰富的天然氨基酸、维生素与矿物质等成分，能促进肝脏新陈代谢和肝细胞的再生，并可降低血液中G0T、GPT值以及减弱肝炎病毒的复制作用。随着桑黄的应用越来越广泛，桑黄的活性成分提取成为了一个比较热门的课题。桑黄多糖是桑黄的主要活性成分之一，对于桑黄多糖的提取液已经有了一些报道。但是这些文献都只是对桑黄总多糖的提取，桑黄多糖在桑黄中以α和β两种构型共存，目前对于桑黄总多糖的工艺研究的文献都没有提到这两种构型的分离，仅仅是从提取总多糖本身入手，对提取的总多糖进行进一步纯化，分离得到某一种构型的多糖均一体。多糖分子量从几千到几百万不等，分子量越大其水溶性越差，桑黄多糖也不例外。桑黄多糖大分子量部分水溶性较差，在分离提取中用水做溶剂很难提取完全，即使使用碱液提取，虽然提取率高，但是干燥后得到多糖产品应用时仍然不溶解于水。人体对于这种大分子桑黄多糖吸收不好。
技术实现思路
本专利技术主要解决的技术问题为:1、桑黄子实体中提取β葡聚糖的工业化生产问题。现有技术提取通常提取的是总多糖，而本专利技术的方法提取得到了 β葡聚糖，并可应用于工业生产。2，解决β葡聚糖的水溶性问题，更有利于桑黄β葡聚糖的吸收利用和产品开发。分子量大的葡聚糖不溶于水本专利技术利用酸水解技术降低了大分子量桑黄多糖的分子量。提高了桑黄多糖的收率，增加了水溶性，更有利于人体吸收。为了解决上述技术问题，本专利技术的目的在于提供一种从桑黄菇子实体中提取水溶性β葡聚糖的方法。—种从桑黄子实体中提取水溶性β葡聚糖的方法，其特征在于:包括以下步骤: 步骤1、制备桑黄粗多糖: 取桑黄子实体，粉碎得到粉末，粉末用碱液浸提，过滤除去残渣，滤液中加入乙醇，静置，过滤得到沉淀，得桑黄粗多糖； 步骤2、制备桑黄β葡聚糖: 取桑黄粗多糖，干燥后加水搅拌，加入α淀粉酶水解，水解液过滤，弃去滤液，得到残渣，得桑黄β葡聚糖； 步骤3、制备水溶性β葡聚糖: 取桑黄β葡聚糖，加碱液搅拌提取，提取液调酸碱度至ΡΗ2.0-6.8,加热水解，水解液过滤，滤液中加入乙醇，静置，分离沉淀并干燥，得到水溶性β葡聚糖。所述步骤I中，将桑黄子实体粉碎后过50目的筛，得到粉末。所述步骤I中，向粉末中加入5-20倍重量的碱液浸提取1-10小时，所用碱液的浓度优选是0.1-1.0摩尔/升。所述步骤I中，过滤采用滤布进行过滤，其中滤布孔径为0.5-5微米。所述步骤I或步骤3中，向滤液中加入1-4倍体积的无水乙醇静置2小时。所述步骤2中，桑黄粗多糖干燥后加5-10倍重量的水搅拌，充分溶解。所述步骤3中，碱液浓度是0.1-0.4摩尔/升;所述的加热水解优选为加热至80-1000C，水解时间为1-4小时。本专利技术的提取方法的具体描述: 桑黄子实体粉碎得到粉末，粉末用碱液浸提，过滤除渣，滤液中加入乙醇，静置，过滤得到沉淀;此沉淀即桑黄粗多糖。桑黄β葡聚糖是桑黄粗多糖的一部分，其相当一部分位于真菌的细胞壁上，为了最大限度的提取桑黄β葡聚糖，本专利技术选择碱液提取，碱液加量为原料重量的5-20倍，碱液的浓度选取0.1-1.0摩尔/升中任一浓度均可，提取时间1-10小时。碱液可以用氢氧化钠，氢氧化钾，氢氧化锌，有机碱等配制，考虑到成本问题，碱液一般选取氢氧化钠溶液。提取液过滤除去残渣，滤液加1-4倍体积的无水乙醇，静置2小时后过滤得沉淀即桑黄粗糖。沉淀干燥后加水搅拌，而后加α淀粉酶水解，水解液过滤，弃去滤液得残渣。此步的残渣即桑黄β葡聚糖但水溶性较差。此步骤采用上一步中的沉淀(桑黄粗多糖)为原料，加α淀粉酶(因为不同厂家产品酶活力不一样，加量相差巨大，本领域技术人员可根据实际情况和酶的活力确定加入α淀粉酶的用量；用量多一点或者少一点不影响本专利技术的效果)将水不溶解的α构型多糖水解变为可溶，弃去水解液，同时水解液也溶解了粗多糖中的大部分残留单糖和寡糖，起到纯化的作用，虽然水解液中也可能存在少量β葡聚糖，但是考虑到回收成本，故舍去。仅对残渣中的大量β葡聚糖进行下一步处理使其变为可溶解。α淀粉酶选取市售的各种型号均可。水解条件，酶用量依据各厂家不同型号的α淀粉酶说明书。残渣加碱液搅拌提取，提取液调酸度至ρΗ2.0-6.8，加热水解，水解液过滤，滤液中加入乙醇，静置，分离沉淀并干燥，即得。采用步骤b)的残渣为原料，加碱液提取，碱液加量为原料重量的5-20倍，提取液调酸碱至pH2.0-6.8,80-100°C加热水解1-4小时，水解液过滤，滤液加1_4倍体积的无水乙醇进行沉淀，分离沉淀干燥后即本专利技术产物，也就是桑黄菇水溶性β葡聚糖。碱碱液可以用氢氧化钠，氢氧化钾，氢氧化锌，有机碱等配制，优选氢氧化钠，液浓度选取0.1-1.0摩尔/升中任一浓度均可。pH可以用盐酸、醋酸、硫酸、乙酸等。pH2.0-6.8中任何一个值均可，只是不同的pH，水解强度不同，水解后所得最终产物重均分子量不同。现有技术中虽然有对桑黄菇的某一种构型进行了分离并且进一步纯化得到了高纯度多糖，但是其分离方法与本专利技术有本质区别，在经过常规的水提醇沉后现有方法多使用柱层析对粗多糖分离，截去粗多糖中某一特定部分得到高纯度的桑黄多糖以用于科学研究，这和本专利技术的工业化方法有显著区别，并且本专利技术除了对桑黄多糖的β构型进行分离提取外，还通过对桑黄多糖的分子量控制提高了其水溶性。本专利技术通过酸水解，水复溶的方法控制桑黄多糖的分子量在一定范围内增强了桑黄多糖的水溶性，提高了桑黄多糖大分子量段的收率，有利于工业化生产桑黄β水溶性多糖。本专利技术提取方法所得到桑黄子实体多糖是除去了α构型多糖的β葡聚糖，并且种β葡聚糖具有良好的水溶性。红外光谱显示本专利技术产物为β葡聚糖，硫酸苯酚法检测多糖含量大于50%，多糖平均分子量2000-200000道尔顿不等。【具体实施方式】下面结合实施例对本专利技术作进一步说明，应该理解的是这些实施例仅用于例证的目的，决不限制本专利技术的保护范围。实施例1 ，其特征在于:包括以下步骤: 步骤1、制备桑黄粗多糖: 取桑黄子实体，粉碎得到粉末，粉末用碱液浸提，过滤除去残渣，滤液中加入乙醇，当前第1页1 2 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从桑黄子实体中提取水溶性β葡聚糖的方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤1、制备桑黄粗多糖：取桑黄子实体，粉碎得到粉末，粉末用碱液浸提，过滤除去残渣，滤液中加入乙醇，静置，过滤得到沉淀，得桑黄粗多糖；步骤2、制备桑黄β葡聚糖：取桑黄粗多糖，干燥后加水搅拌，加入α淀粉酶水解，水解液过滤，弃去滤液，得到残渣，得桑黄β葡聚糖；步骤3、制备水溶性β葡聚糖：取桑黄β葡聚糖，加碱液搅拌提取，提取液调酸碱度至pH2.0—6.8，加热水解，水解液过滤，滤液中加入乙醇，静置，分离沉淀并干燥，得到水溶性β葡聚糖。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈喜军，
申请(专利权)人：黑龙江众生生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23