一株降解DDT的假单胞菌，涉及一种降解DDT的假单胞菌。本发明专利技术提供了一株假单胞菌菌株，可降解DDT，可应用于DDT污染物的生物强化处理，为降解DDT类有机氯杀虫剂提供帮助。本发明专利技术降解DDT的假单胞菌为假单胞菌12-3#，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2011年11月08日，保藏号为CGMCC?No.5449。本发明专利技术假单胞菌12-3#具有降解DDT类有机氯杀虫剂的特性，对DDT的降解率可达51.6％，不造成环境二次污染。对于解决DDT降解及污染修复等问题很有帮助，具有较高的应用价值。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种降解DDT的假单胞菌。
技术介绍
DDT又叫滴滴涕，化学名为双对氯苯基三氯乙烷(Dichlorodiphenyltrichloroet hane)，是《关于持久性有机污染物POPs的斯德哥尔摩公约》规定的12种禁限PCffs之一， 是一种耐热、耐酸、脂溶性大、残效期长的有机氯类广谱杀虫剂。由于其具有致畸、致癌、致突变的“三致”效应、高毒性及难降解的特点，对环境造成了严重的污染。虽然至今已禁用数十年，但在环境中的累计作用仍很严重。因此，采用一定的技术手段修复有高毒、高残留、 难降解的DDT类的有机氯农药造成的环境问题已迫在眉睫。微生物降解被认为是有机氯农药降解最可靠、最高效的途径。分离筛选高效降解 DDT的微生物是人们进行DDT污染治理、土壤生物修复的有效措施。通过筛选DDT降解菌， 研究其生物学特性、降解特性及其DDT降解菌发酵条件的优化，可为DDT污染土壤的生物修复提供依据，达到恢复土壤生物多样性，保护环境和人类健康的目的。
技术实现思路
本专利技术提供了一株假单胞菌菌株，可降解DDT，可应用于DDT污染物的生物强化处理，为降解DDT类有机氯杀虫剂提供帮助。本专利技术降解DDT的假单胞菌为假单胞菌(I^eudomonas sp. ) 12_3#，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1 号院3号，保藏日期为2011年11月08日，保藏号为CGMCC No. 5449 ；本专利技术假单胞菌12_3# 为革兰氏阳性菌，好氧菌，棒状，菌体大小为(0. 1 μ m 0. 2 μ m) X (0. 4 μ m 0. 6 μ m)，有鞭毛；在固体无机盐培养基上培养，菌落呈圆形，颜色为淡黄色，透明，表面光滑，边缘整齐，粘稠，易挑起。本专利技术假单胞菌12_3#不能够利用葡萄糖，不能氧化乙醇或醛糖。接触酶反应呈阳性，产吲哚试验呈阳性，产氨试验呈阳性，甲基红试验反应呈阴性，淀粉水解呈阴性，油脂水解呈阴性，尿素实验呈阴性，苯丙氨酸脱氨酶实验呈阴性，葡萄糖发酵试验呈阴性。本专利技术假单胞菌12_3#可在添加了 DDT的无机盐培养基上生长，培养基中DDT的最佳终浓度为20mg/L。本专利技术假单胞菌12-3#的最适生长温度为30°C，最适合生长环境的 PH值为7.0。本专利技术假单胞菌(I^eudomonas sp. ) 12_3#经脂肪酸鉴定，与假单胞菌属 (Pseudomonas)最相近，通过结合菌体形态特征、生长条件、生理生化鉴定结果确定假单胞菌12-3#为假单胞菌属(I^eudomonas)的一个新菌种，命名为假单胞菌12_3#。本专利技术假单胞菌12_3#具有降解DDT类有机氯杀虫剂的特性，对DDT的降解率可达51. 6%，不造成环境二次污染。本专利技术假单胞菌12-3#对于解决DDT降解及污染修复等问题很有帮助，具有较高的应用价值。3本专利技术假单胞菌O3SeudomonaS sp. ) 12_3#属于假单胞菌属(I^seudomonas)，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2011年11月08日，保藏号为CGMCC No. M49。附图说明图1为本专利技术假单胞菌12-3#的染色图片；图2为本专利技术假单胞菌12_3#原子力学显微镜形态图；图3为假单胞菌12-3#的脂肪酸鉴定图谱。具体实施例方式本专利技术技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。具体实施方式一本实施方式降解DDT的假单胞菌为假单胞菌(I^eudomonas sp. )12-3#，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2011年11月08日，保藏号为 CGMCCNo. 5449。本实施方式假单胞菌(Pseudomonas sp. ) 12_3#为革兰氏阳性菌，好氧菌，棒状， 菌体大小为(0. 1 μ m 0. 2 μ m) X (0. 4 μ m 0. 6 μ m)，有鞭毛，假单胞菌12_3#的染色图片如图1所示，假单胞菌12_3#原子力学显微镜形态图如图2所示；在固体无机盐培养基上培养，菌落呈圆形，颜色为淡黄色，透明，表面光滑，边缘整齐，粘稠，易挑起。其中所述固体无机盐培养基(IOOOmL)由 4. Og NaNO3U. 5g ΚΗ2Ρ04、0· 5g Na2HPO4^O. 005g FeCl3、0. Olg CaCl2、20g琼脂粉和20mg/L的DDT组成。参照《伯杰细菌鉴定手册》第八版和《常见细菌系统鉴定手册》对假单胞菌 (Pseudomonas sp.) 12_3#进行生理生化鉴定不能够利用葡萄糖，不能氧化乙醇或醛糖。接触酶反应呈阳性，产吲哚试验呈阳性，产氨试验呈阳性，甲基红试验反应呈阴性，淀粉水解呈阴性，油脂水解呈阴性，尿素实验呈阴性，苯丙氨酸脱氨酶实验呈阴性，葡萄糖发酵试验呈阴性。本实施方式假单胞菌12_3#可在添加了 DDT的无机盐培养基上生长，培养基中DDT 的最佳终浓度为20mg/L。其中添加了 DDT的无机盐培养基由4. Og NaNO3U. 5g KH2P04、0. 5g Na2HPO4^O. 005g FeCl3、0. Olg CaCl2 和 20mg/L 的 DDT 组成。本专利技术假单胞菌 12~3# 的最适生长温度为30°C，最适合生长环境的pH值为7. 0。具体实施方式二 本实施方式假单胞菌O3SeudomonaS sp. ) 12_3#由广州市受DDT 污染的土壤中筛选得到。筛选按以下步骤进行①取IOmL经DDT驯化的土壤悬浊液接入已灭菌的装有玻璃珠和90mL无菌水的锥形瓶中充分振荡，以打散菌胶团，使细菌呈单细胞状态分散于液体中；②从锥形瓶内的土壤菌悬液中取ImL菌悬液，以倍比稀释法接种于以DDT 为唯一碳源的固体无机盐培养基中，倒置于30°C恒温培养箱中培养3d ；③分别挑取不同的典型单菌落，在平皿上做好标记，并划线培养到新的培养皿中，重复以上操作3 4次，得到菌落特征一致的纯菌平板；④所得纯菌转接于保存培养基中4°C保存备用；然后进行复筛， 即是在初筛的基础上进一步以菌株是否具有较高DDT降解率为依据，筛选出降解效能较好的菌株，即为假单胞菌12_3#。本实施方式中每升固体无机盐培养基由4. Og NaNO3U. 5g KH2PO4、0. 5g Na2HPO4,0.005g FeCl3、0. Olg CaCl2、20g 琼脂粉和 20mg/L 的 DDT 组成，pH 值为 7. 0 7. 2，121 °C高压灭菌20min。采用气相色谱法检测假单胞菌12_3#细胞脂肪酸进行菌种鉴定。利用气相色谱对假单胞菌12_3#中特定的短链脂肪酸(C9 C20)进行分析，假单胞菌12-3#的脂肪酸鉴定图谱如图3所示，根据短链脂肪酸的种类和含量的图谱与内置的数据库TSBA66. 00进行比对，结果显示12-3#脂肪酸结构与泡囊假单胞菌属最为接近，相似度为64. 28 %，最终确定假单胞菌12_3#属于假单胞菌属(I^eudomonas)。采用高效液相色谱法测定该菌株对DDT的降解率。将该菌株菌悬液ImL接本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1. 一株降解DDT的假单胞菌，其特征在于降解DDT的假单胞菌为假单胞菌 (Pseudomonas sp.) 12_3#，保藏在中国微生物菌种...
【专利技术属性】
技术研发人员：王继华，刘翔，牛佳，辛佳，宋北，夏琳，
申请(专利权)人：哈尔滨师范大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。