气单胞菌菌株及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种气单胞菌菌株及其应用，属于环境微生物应用领域，该菌株命名为气单胞菌(Aeromonas sp.)CM-T1，现保藏在中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO：M2014328，保藏日期为2014年7月9日。本发明专利技术气单胞菌菌株培养条件简单、环境适应性强，对染料的降解谱较宽，是一种能够高效降解染料的菌株，可应用于印染废水、染料废水、造纸废水和皮革废水领域。

【技术实现步骤摘要】
气单胞菌菌株及其应用
本专利技术涉及环境微生物应用领域，尤其涉及一种气单胞菌菌株及其应用。
技术介绍
染料废水对环境的污染及其严重。随着时间的变化和社会的发展，人类的生产和生活方式变得越来越高级，人类对自然界肆意的掠夺和破坏以及不负责任的污染导致环境污染日益严重。据报道，全球每年生产的染料有70万吨，中国每年生产的染料就高达15万吨，在其生产和使用过程中10～15％的染料会随水排放到环境中。染料具有生物毒性和三致性，废水中的染料即使浓度很低，排入水体后也会造成水体的透光度降低，破坏水体生态系统平衡，给人类的身心健康带来极大的危害。染料废水的处理方法。我国作为一个印染、纺织和造纸大国，染料废水的处理问题一直是研究中需要攻克的重点和难点。目前，印染废水处理的方法主要有物理法、化学法和生化法，物化法在实际工程应用中通常造价较高，效率不高，甚至存在二次污染的潜在风险，因而在应用中往往受到限制；而生化处理法具有费用低、操作简单、效果佳、对环境友好等特点，越来越受到人们的关注。目前，报道的降解脱色菌主要有芽孢菌、假单胞菌、埃希氏菌、芽孢杆菌、从毛单胞菌、肠球菌、白腐真菌、酵母菌等。如申请号为CN101906388A的中国专利技术专利文献报道了一种热带假丝酵母(Candidatropicalis)YL3-1CGMCCNo.3432在有氧条件下对多种偶氮染料具有脱色降解能力；申请号为CN102618462A的中国专利技术专利文献报道了一株红球菌(Rhodococcussp.)JB301，可在温度25～37℃、pH值6.0～9.0的条件下对三苯甲烷类染料(以结晶紫和孔雀石绿为典型代表)进行降解脱色。2009年，李怡等从养殖池污泥中分离到的恶臭假单胞菌M6在30℃、150r/min条件下对50mg/L孔雀石绿24h的脱色率高达97.14％。然而，上述这些菌株大多广谱性较差，只能对一种染料或一类染料进行降解脱色，而且耐盐性或耐酸性不强，在染料废水处理应用方面仍非常有限。因此，有必要分离获得培养条件简单、环境适应性强，对染料降解谱较宽的菌株进行染料废水的降解。
技术实现思路
本专利技术提供了一种气单胞菌菌株及其应用，该气单胞菌菌株培养条件简单、环境适应性强，对染料的降解谱较宽，是一种能够高效降解染料的菌株。一种气单胞菌菌株，命名为气单胞菌(Aeromonassp.)CM-T1，保藏编号为CCTCCNO：M2014328，保藏日期为2014年7月9日。所述的气单胞菌菌株于2014年7月9日保藏在中国武汉市武汉大学的中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC)，保藏编号为CCTCCNO：M2014328，命名为气单胞菌(Aeromonassp.)CM-T1。所述的气单胞菌(Aeromonassp.)CM-T1的16SrDNA序列如SEQID：1所示。所述的气单胞菌(Aeromonassp.)CM-T1的生物学特征为：菌落呈黄色，表面突起，湿润有光泽，边缘整齐；菌株细胞为短杆菌，两端微圆，直径为1.3μm左右。本专利技术提供了一种气单胞菌菌株的培养方法，该方法将所述的气单胞菌菌株活化后，接种到初始pH值为5～10、温度为25℃～40℃、盐的质量浓度为0～5％的培养基中培养。该条件下培养获得的气单胞菌菌株对废水中的染料去除率高。本专利技术提供了一种所述的气单胞菌菌株在处理废水中的应用。具体地，所述的废水为印染废水、染料废水、皮革废水或造纸废水。所述的染料废水为对偶氮类染料废水、蒽醌染料废水或三苯甲烷类染料废水。所述的气单胞菌菌株在处理废水中的应用，包括：将所述的气单胞菌菌株固定化后，再对废水进行生化处理。所述的气单胞菌菌株固定化包括将菌株固定化于微球中，或进行生物挂膜将菌株固定于填料上；废水经过固定有菌株的微球或填料时，菌株对废水中的染料进行处理。气单胞菌(Aeromonassp.)CM-T1在降解染料的过程中，氧气条件对其降解脱色效率有影响；对于偶氮类染料、蒽醌染料，气单胞菌(Aeromonassp.)CM-T1需在厌氧条件下进行降解；对于三苯甲烷类染料，气单胞菌(Aeromonassp.)CM-T1可在有氧或厌氧条件下进行降解，其中，优选有氧条件，气单胞菌(Aeromonassp.)CM-T1有氧条件下对碱性品红的去除率高达98％，比厌氧条件下高3％。本专利技术提供了一种包含所述的气单胞菌菌株的菌剂。本专利技术还提供了一种包含所述的气单胞菌菌株的微生物微球。本专利技术提供的气单胞菌菌株具有降解谱广的特点，能够分解印染废水、染料废水、造纸废水和皮革废水中的染料，具有较高的降解效果。附图说明图1为本专利技术气单胞菌(Aeromonassp.)CM-T1的菌落形态图片；图2为本专利技术气单胞菌(Aeromonassp.)CM-T1的电子扫描图片；图3为本专利技术气单胞菌(Aeromonassp.)CM-T1基于16SrDNA序列同源性构建的系统发育树；图4为pH值对本专利技术气单胞菌(Aeromonassp.)CM-T1生长的影响；图5为温度对本专利技术气单胞菌(Aeromonassp.)CM-T1生长的影响；图6为盐浓度对本专利技术气单胞菌(Aeromonassp.)CM-T1生长的影响。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术作进一步阐释。实施例1气单胞菌(Aeromonassp.)CM-T1的分离气单胞菌(Aeromonassp.)CM-T1是从绍兴某印染厂排污口采集的土壤中分离得到的。具体分离方法为：取5.0g土壤加至含有4粒玻璃珠的250mL灭菌三角瓶中，加入95mL灭菌生理盐水，于摇床上150r/min振荡3h；取上述菌悬液，按2％(v/v)的量加入到装有150mL富集培养基(KH2PO41.8g/L，Na2HPO4·12H2O3.5g/L，MgSO4·7H2O0.29g/L，FeCl3·6H2O0.01g/L，NaCl3.0g/L，蛋白胨10.0g/L，牛肉膏3.0g/L，pH7.0～7.2)的血清瓶中，30℃、150r/min培养3d，将培养液按十倍稀释法稀释至10-5，10-6，10-7，取0.1mL的稀释液涂布于结晶紫染料固体培养基(牛肉膏3.0g/L，蛋白胨10.0g/L，NaCl5.0g/L，结晶紫20mg/L，琼脂15g/L，pH7.0～7.2)上，每个稀释度做两个平行，倒置于厌氧培养箱内，30℃培养4-5d。挑起平板上有明显脱色圈的菌落多次纯化至单菌落，从而分离到一株结晶紫降解脱色菌，命名为CM-T1。实施例2气单胞菌(Aeromonassp.)CM-T1的鉴定(1)形态特征气单胞菌(Aeromonassp.)CM-T1在固体生长养基上培养48小时后，菌落呈黄色，表面突起，湿润有光泽，边缘整齐；电镜扫描可观察到菌株细胞为短杆菌，两端微圆，直径为1.3μm左右，如图1、图2所示。(2)生理生化鉴定生化指标结果生化指标结果接触酶+氧化酶+葡糖糖发酵+山梨醇发酵-甘露醇发酵+水杨苷发酵+MR-V-P+硝酸盐还原-尿素酶-精氨酸双水解酶+鸟氨酸脱羧酶-赖氨酸脱羧酶-色氨酸肉汤+明胶液化+苯丙氨酸-甘油+七叶苷+西蒙市枸橼酸盐-硫化氢+说明：“+”：反应呈阳性；“-”反应呈阴性(3)16SrDNA测定通过菌株形态特征观察不能确定细菌的种属，对菌株的16SrDNA基因序列进本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种气单胞菌菌株，其特征在于，命名为气单胞菌(Aeromonas sp.)CM‑T1，保藏编号为CCTCC NO：M 2014328，保藏日期为2014年7月9日。

【技术特征摘要】
1.一种气单胞菌菌株在处理造纸废水中的应用，其特征在于，所述气单胞菌菌株命名为气单胞菌(Aeromonassp.)CM-T1，保藏编号为CCTCCNO:M2014328，保藏日期为2014年7月9日；所述气单胞菌菌株的培养方法为：将气单胞菌菌株活化后，接种到初始pH值为5～10、温度为25℃～40℃、盐的质量浓度为0～5％的培养基中培养；处理所述造纸废水的方法为：(1)采用聚氨酯海绵填料作为生物载体进行生物挂膜，填料规格为5cm×5cm×5cm；(2)以造纸废水为处理对象，采用厌氧-好氧两级生物流化床工艺处理造纸废水，流量为0.9L/h，聚氨酯海绵填料投加比为30％，水力停留时间均为10h，厌氧池DO＜0.5mg/L，好氧池DO在2.0-3.0mg/L之间。2.一种气...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵鸭美，谢柳，
申请(专利权)人：浙江至美环境科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33